Journal
/
Biology
/
Split-Ubiquitine membraanfilters op Yeast Two-Hybrid (mythe) Systeem: een krachtig hulpmiddel voor het identificeren van eiwit-eiwit interacties
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
Split-Ubiquitin Based Membrane Yeast Two-Hybrid (MYTH) System: A Powerful Tool For Identifying Protein-Protein Interactions
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Split-Ubiquitine membraanfilters op Yeast Two-Hybrid (mythe) Systeem: een krachtig hulpmiddel voor het identificeren van eiwit-eiwit interacties

DOI:
10.3791/1698-v

•

14:04 min

•

February 01, 2010

•

, , ,
1Department of Biochemistry,University of Toronto, 2Department of Molecular Genetics,University of Toronto, 3Terrence Donnelly Centre for Cellular and Biomolecular Research (CCBR),University of Toronto

Chapters

  • 00:00Title
  • 01:22Introduction
  • 01:41Selection of Bait and Appropriate MYTH System
  • 03:04Generation of tMYTH Baits by Gap Repair
  • 03:07a. Vector Preparation and Amplification of Gene of Interest
  • 05:30b. Yeast Transformation and Recovery of Bait Plasmid DNA
  • 07:03Bait Validation
  • 08:10MYTH Screening
  • 08:12a. Large Scale Yeast Transformation
  • 11:31b. Bait Dependency Test
  • 12:54Representative Results/ Outcome
  • 13:12Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

MYTHE kan de gevoelige detectie van voorbijgaande aard en stabiele interacties tussen eiwitten die worden uitgedrukt in het model organisme Saccharomyces cerevisiae. Het is met succes toegepast op exogene en gist integrale membraaneiwitten bestuderen om hun interagerende partners in een high throughput manier te identificeren.

Tags

Split-ubiquitinMembrane Yeast Two-hybridProtein-protein InteractionsMYTH SystemFull-length Transmembrane ProteinsSaccharomyces CerevisiaeBait ProteinPrey ProteinsUbiquitin MoietiesArtificial Transcription FactorPseudo-ubiquitin MoleculeDeubiquitinating EnzymesReporter Gene Expression

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Imaging eiwit-eiwit interacties In vivo</em

Associated Chromosoom Trap voor het vaststellen van lange afstand DNA-interacties

Gemodificeerde gist-twee-hybride systeem aan eiwitten Interactie met de groeifactor progranuline identificeren

Een protocol voor de identificatie van eiwit-eiwit interacties op basis van<sup> 15</sup> N Metabole Labeling, Immunoprecipitatie, kwantitatieve Massaspectrometrie en Affiniteit Modulatie

Het identificeren van eiwit-eiwit interactie in<em> Drosophila</em> Adult Heads door Tandem Affinity Purification (TAP)

Reverse Gist Twee-hybride systeem voor het identificeren van zoogdieren Nuclear Receptor Residuen die interageren met liganden en / of antagonisten

Capture Compound Massaspectrometrie - een krachtig hulpmiddel om het identificeren van nieuwe c-di-GMP effectoreiwitten

Onderzoeken eiwit-eiwit interacties in levende cellen met behulp van bioluminescentie resonantie energieoverbrenging

Probing hoge dichtheid functioneel eiwit Microarrays om eiwit-eiwit interacties Detect

Het identificeren van eiwit-eiwit interacties sites maken met Peptide Arrays

Read Article