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Split-Ubiquitina membrana a base di lievito Due-Hybrid (MITO) Sistema: un potente strumento per identificare interazioni proteina-proteina
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Split-Ubiquitin Based Membrane Yeast Two-Hybrid (MYTH) System: A Powerful Tool For Identifying Protein-Protein Interactions
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Split-Ubiquitina membrana a base di lievito Due-Hybrid (MITO) Sistema: un potente strumento per identificare interazioni proteina-proteina

DOI:
10.3791/1698-v

•

14:04 min

•

February 01, 2010

•

, , ,
1Department of Biochemistry,University of Toronto, 2Department of Molecular Genetics,University of Toronto, 3Terrence Donnelly Centre for Cellular and Biomolecular Research (CCBR),University of Toronto

Chapters

  • 00:00Title
  • 01:22Introduction
  • 01:41Selection of Bait and Appropriate MYTH System
  • 03:04Generation of tMYTH Baits by Gap Repair
  • 03:07a. Vector Preparation and Amplification of Gene of Interest
  • 05:30b. Yeast Transformation and Recovery of Bait Plasmid DNA
  • 07:03Bait Validation
  • 08:10MYTH Screening
  • 08:12a. Large Scale Yeast Transformation
  • 11:31b. Bait Dependency Test
  • 12:54Representative Results/ Outcome
  • 13:12Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

MITO permette di rilevare sensibile delle interazioni transienti e stabili tra proteine ​​che sono espresse nel modello organismo Saccharomyces cerevisiae. E 'stato applicato con successo allo studio esogeni e lievito proteine ​​integrali di membrana allo scopo di individuare i propri partner che interagiscono in modo elevato throughput.

Tags

Split-ubiquitinMembrane Yeast Two-hybridProtein-protein InteractionsMYTH SystemFull-length Transmembrane ProteinsSaccharomyces CerevisiaeBait ProteinPrey ProteinsUbiquitin MoietiesArtificial Transcription FactorPseudo-ubiquitin MoleculeDeubiquitinating EnzymesReporter Gene Expression

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