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Chapters
- 00:00Title
- 02:56Plating of Cells and Treatment with BMP
- 04:12Fixation and Permeabilization
- 05:26Blocking and Primary Antibodies Application
- 06:49The Proximity Ligation Assay (PLA)
- 09:54Preparation for Imaging
- 10:56In Situ Proximity Ligation Assay Results from Neuro2a Cells Treated with BMP4
- 12:18Conclusion
Ici, nous montrons comment utiliser Assay ligature de proximité (APL), avec une combinaison d'anticorps de visualiser des protéines morphogénétiques osseuses (BMP) de signalisation dans les cellules fixes. Cette technique nous a permis de suivre l'accumulation nucléaire de BMP endogènes effectrices activées-complexes et de quantifier leur niveau au cours du temps sous BMP4 stimulation.
Tags
DetectionSignaling Effector-complexesBMP4In Situ PLAProximity Ligation AssayBMP ReceptorsSmad1/5/8 EffectorsSmad4NucleusTranscription FactorsTraditional Immuno-fluorescence TechniquesPhospho-Smad PeptidesSensitivityHigh BackgroundGross QuantificationAntibody SignalIntensityPhotosensitive FluorescentProtein InteractionsSpecificityAmplification Of DNA SurrogateLocalized SignalSpotsRecognition EventMeasurement
