/
/
Pålidelig Identifikation af Living dopaminerge neuroner i midthjernen Cultures Brug RNA Sequencing og TH-promotor-drevet eGFP Expression
A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:05Title
- 00:59Isolation of Embryonic Midbrain
- 02:55Dissociation and Plating of Cells
- 05:34Harvesting Cultured Dopaminergic Neurons for RNA Sequencing
- 07:04Generation, Purification and Amplification of First-strand cDNA
- 09:13Results: RNA-seq Detection of Expressed Transcripts in Single Dopaminergic Neurons
- 09:39Conclusion
Ved Parkinsons sygdom (PD), sorte substans (SNC) dopaminerge neuroner degenerere, hvilket fører til motorisk dysfunktion. Her rapporterer vi en protokol til dyrkning ventrale midthjernen neuroner fra en mus, der udtrykker eGFP drevet af en tyrosinhydroxylase (TH) promotorsekvens, høst individuelle fluorescerende neuroner fra kulturerne, og måling af deres transkriptom anvendelse af RNA-seq.
