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Eine Alternative Kultur-Methode, um genomische Hypomethylierung von embryonalen Stammzellen der Maus mit MEK-Inhibitor PD0325901 und Vitamin C aufrechtzuerhalten
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Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
An Alternative Culture Method to Maintain Genomic Hypomethylation of Mouse Embryonic Stem Cells Using MEK Inhibitor PD0325901 and Vitamin C
DOI:

11:53 min

June 01, 2018

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Chapters

  • 00:04Title
  • 00:57Grow Mouse ES Cells on Gelatin-coated Dishes
  • 02:48Extract DNA from Cells and Enzymatic Digestion of DNA into Single Nucleosides
  • 05:29Analyze 5mC and 5hmC Using UHPLC-MS/MS
  • 08:34Results: Methylation Status of Mouse Embryonic Stem Cells
  • 10:17Conclusion

Summary

Automatic Translation

Wir sind zwei Chemie-basierte Protokolle für die Kultivierung embryonalen Stammzellen der Maus ausführlich beschrieben. Diese neue Methode nutzt synergistische Mechanismen der Förderung Tet-vermittelten Oxidation (durch Vitamin C) und de-Novo -Synthese von 5-Methylcytosine (durch PD0325901) zu unterdrücken, um DNA-Hypomethylierung und Pluripotenz von embryonalen Stammzellen der Maus zu erhalten.

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