Journal
/
Biochemistry
/
ניתוח Toeprinting של תרגום חניכה היווצרות מורכבות על יונקים mRNAs
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
Toeprinting Analysis of Translation Initiation Complex Formation on Mammalian mRNAs
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

ניתוח Toeprinting של תרגום חניכה היווצרות מורכבות על יונקים mRNAs

DOI:
10.3791/57519-v

•

10:37 min

•

May 10, 2018

•

,
1Department of Chemistry and Biochemistry, Alberta RNA Research and Training Institute,University of Lethbridge, 2Department of Neuroscience and the Canadian Centre for Behavioral Neuroscience (CCBN),University of Lethbridge, 3Arnie Charbonneau Cancer Institute,University of Calgary

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:34Preparation of mRNA
  • 02:59Toeprinting Assay
  • 06:32Sequencing Reactions and Gel Electrophoresis
  • 07:53Results: Importance of IRES Secondary Structure in the Formation of Translation Initiation Complexes on an Uncapped XIAP IRES RNA
  • 09:35Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Toeprinting נועד למדוד את היכולת של במבחנה עיבד RNA ל טופס תרגום חניכה מתחמי עם הריבוזומים תחת מגוון תנאים. פרוטוקול זה מתאר שיטה עבור toeprinting בתרבית של RNA והוא יכול לשמש כדי ללמוד תרגום תלויי-קאפ והן מונחות IRES.

Tags

Toeprinting AnalysisTranslation Initiation ComplexMammalian MRNAsIRESRNA PurificationRabbit Reticulocyte LysateRNase InhibitorATPGMP-PNPDTTSpermidine

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

לכידת חלבון זיקה מורכבת מ בתאי יונקי Cryomilled

הכנת ענק שלפוחית ​​encapsulating מיקרוסכמות על ידי צנטריפוגה של אמולסיה מים ב-שמן

Immunofluorescence כמותי מודדים הגלובלי לשפות אחרות תרגום

הגנום כולו כימות של תרגום ניצני שמרים על-ידי יצירת פרופיל ריבוזום

מבחני הדמיה של מולקולות בודדות במבחנה לניתוח קינטיקה של תרגום תלוי-כובע

השלמת פעילות התרסיס על ידי מתחם גלקטין-3 - U1 snRNP על חרוזים

מדידת הרכב של CD95 מוות גרימת איתות מורכב ועיבוד של Procaspase-8 במתחם זה

איסוף שגרתי של מערכי נתונים cryo-EM ברזולוציה גבוהה באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים של 200 KV

פיתוח ויישום של בדיקות ביופיזיקליות להערכת היווצרות קומפלקס טרינרי המושרה על ידי פרוטאוליזה מכוונת כימרות (PROTACS)

ניתוח היווצרות קומפלקס חלבונים בריכוזים מיקרומולרים על ידי צימוד מיקרופלואידיקה עם פוטומטריית מסה

Read Article