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Toeprinting Analysis of Translation Initiation Complex Formation on Mammalian mRNAs
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Toeprinting análisis de formación de complejos de iniciación traducción de mRNAs mamíferos

DOI:
10.3791/57519-v

•

10:37 min

•

May 10, 2018

•

,
1Department of Chemistry and Biochemistry, Alberta RNA Research and Training Institute,University of Lethbridge, 2Department of Neuroscience and the Canadian Centre for Behavioral Neuroscience (CCBN),University of Lethbridge, 3Arnie Charbonneau Cancer Institute,University of Calgary

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:34Preparation of mRNA
  • 02:59Toeprinting Assay
  • 06:32Sequencing Reactions and Gel Electrophoresis
  • 07:53Results: Importance of IRES Secondary Structure in the Formation of Translation Initiation Complexes on an Uncapped XIAP IRES RNA
  • 09:35Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Toeprinting tiene como objetivo medir la capacidad de in vitro transcrito RNA para formar complejos de iniciación de traducción con los ribosomas en una variedad de condiciones. Este protocolo describe un método para RNA mamíferos toeprinting y puede utilizarse para estudiar traducción dependiente de la tapa y IRES-conducido.

Tags

Toeprinting AnalysisTranslation Initiation ComplexMammalian MRNAsIRESRNA PurificationRabbit Reticulocyte LysateRNase InhibitorATPGMP-PNPDTTSpermidine

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