Journal
/
Biochemistry
/
Toeprinting analyse av oversettelse innvielsen komplekse formasjon på pattedyr mRNAs
JoVE Journal
Biochemistry
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
Toeprinting Analysis of Translation Initiation Complex Formation on Mammalian mRNAs

Toeprinting analyse av oversettelse innvielsen komplekse formasjon på pattedyr mRNAs

DOI:
10.3791/57519-v

•

10:37 min

•

May 10, 2018

•

,
1Department of Chemistry and Biochemistry, Alberta RNA Research and Training Institute,University of Lethbridge, 2Department of Neuroscience and the Canadian Centre for Behavioral Neuroscience (CCBN),University of Lethbridge, 3Arnie Charbonneau Cancer Institute,University of Calgary

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:34Preparation of mRNA
  • 02:59Toeprinting Assay
  • 06:32Sequencing Reactions and Gel Electrophoresis
  • 07:53Results: Importance of IRES Secondary Structure in the Formation of Translation Initiation Complexes on an Uncapped XIAP IRES RNA
  • 09:35Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Toeprinting mål å måle evne til i vitro transkribert RNA til skjemaet oversettelse innvielsen komplekser med ribosomer under en rekke forhold. Denne protokollen beskriver en metode for toeprinting pattedyr RNA og kan brukes til å studere både cap-avhengige og IRES-drevet oversettelse.

Tags

Toeprinting AnalysisTranslation Initiation ComplexMammalian MRNAsIRESRNA PurificationRabbit Reticulocyte LysateRNase InhibitorATPGMP-PNPDTTSpermidine

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Protein Complex Affinity Capture fra Cryomilled pattedyrceller

Utarbeidelse av Giant vesikler innkapsle mikrosfære ved sentrifugering av en vann-i-olje emulsjon

Kvantitativ Immunofluorescence å måle globale lokalisert oversettelse

Genomet hele kvantifisering av oversettelse i spirende gjær av ribosom profilering

En In Vitro single-molecule imaging assay for analyse av cap-avhengig oversettelse kinetikk

Komplementering av skjøteaktivitet av et Galectin-3 - U1 snRNP-kompleks på perler

Målesammensetning av CD95 Dødsinduserende signalkompleks og behandling av Procaspase-8 i dette komplekset

Rutinemessig innsamling av kryo-EM-datasett med høy oppløsning ved bruk av 200 KV-transmisjonselektronmikroskop

Utvikling og anvendelse av biofysiske analyser for evaluering av ternær kompleksdannelse indusert av proteolyse rettet mot kimærer (PROTACS)

Analyse av proteinkompleksdannelse ved mikromolære konsentrasjoner ved kobling av mikrofluidikk med massefotometri

Read Article