Immunology and Infection
A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 2 minutes.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Dang humması virüs kaynaklı akut viral Ensefalitis-benzeri hastalık bir Murine modeli
Chapters
Summary April 28th, 2019
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Burada, nöropati gelişimini görüntülemek için bir immünopetik ıCR (Kanser Araştırma Enstitüsü) merkezi sinir sistemi enfeksiyonu murine modeli oluşturmak için bir protokol sunuyoruz. Akut viral ensefalitik bozuklukların aynı hastalık puanları ile izlenmesi, Dang virüse bağlı nöropati içinde vivo göstermek için gerçekleştirilebilir.
Transcript
Beyinde dang virüsü enfeksiyonu gördüğünüz bir hastalık modelinin bu protokolü nöropatogenez ile ilişkili viral ve konak vektörleri taranması için bir in vivo platform haline gelir. Önceki modellerin aksine, bizim modeller düşük viral titre ile enfeksiyon araçları kullanmak, ensefalik benzeri hastalık üreme indüksiyon için immünobeceriksiz Kanser Araştırma Enstitüsü emzirme fareler enfekte etmek. Prosedürü gösteren Ting-Jing Shen, benim laboratuvarımdan doktora adayı olacak.
Enfeksiyon prosedürünü başlatmadan önce, adapte olmayan dang virüsü iki stokseyreltmek, bir kez 10 beşinci plak oluşturan birimleri rpmi 1640 orta konsantrasyon40 mikrolitre başına. Sonra, seyreltilmiş virüs 10 mikrolitre ile 30 gauge iğne ile donatılmış bir 0.3 mililitre şırınga yükleyin. Ve bir 0.3 mililitrelik şırınga 30 ölçü iğnesi ile donatılmış, hayvan başına 30 mikrolitre virüs.
Virüsün interserebral teslimi için, yavaşça eğilimli bir pozisyonda yedi günlük emzirme Kanser Araştırma Enstitüsü fare dizginlemek ve lambda alana seyreltilmiş virüsün 10 mikrolitre hacmi enjekte başparmak ve işaret parmağı arasında oracle basın, sagittal ve lambdoid sütür kesiştiği. Intercerebral enjeksiyonsonra, bir supine pozisyonda fare tutmak için başparmak ve işaret parmağı kullanın, ve yavaşça intraperitoneally, seyreltilmiş virüsün 30 mikrolitre hacmi enjekte, murine karın içine. Hastalığın ilerlemesini puanlama için, akut viral ensefalit benzeri hastalıkların derecesine göre, her bir aşılanmış fare günlük sıfır dan beş puan atamak ve her grupta günlük test puanları standart sapma ortalama artı ve eksi kullanarak, bir eğri tabanlı rakam olarak her gün için puanları arsa.
Sahte, orta sadece aşılanmış farelerde ölçülen vücut ağırlığı değişiklikleri ile karşılaştırıldığında, dang virüsü aşılanmış hayvanlar deneme sırasında her zaman vücut ağırlığında bir azalma sergilerler. Buna ek olarak, dang virüsü enfekte hayvanlar kambur sırt duruşları önemli bir artış göstermektedir, limbik nöbetler, limbik güçsüzlük, felç, ve ölüm sahte aşılanmış hayvanların gösterdiği belirtilere göre. Gerçekten de, dang virüsü sıçanlarda sahte aşılanmış hayvanlarda gözlenmez sağkalım oranlarında zamana bağlı bir azalma sergileyen, farelerde akut viral ensefalit benzeri hastalıkların ilerlemesini gösteren merkezi sinir sistemi içinde dang virüsü bulaşıcı bir model kurulmasını doğrulayan.
Yanlış bölgede delinme, skor ve virüs çözeltisinin kafa dışında taşması sonucu iğne tıkanmasına neden olabilir, bu da başarısız enjeksiyon ve başarısız bir enfeksiyona neden olabilir. İşlemden sonra, beyin örnekleri patolojik hasar, immün hücre infiltrasyonu ve viral replikasyon analizi için hematoksilin ve eozin boyama akış sitometrisi ve plak oluşumu tahlilleri için hasat edilebilir. Bizim immünobeceriksiz murine modeli, dang virüsü enfeksiyonu patojenik mekanizmaları keşfetmek için bir platform sağlar, dang virüsü aşıları gelişimi için, veya anti-dang virüsü ilaçları.
Dang virüsü bir biyogüvenlik düzeyi iki patojen, ve, bu nedenle, bu virüs ile tüm deney nitelikli bir hayvan biyogüvenlik düzeyi iki laboratuvarda tamamlanmalıdır.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.
