En kanin model af vandig-mangelfuld tørre øjne sygdom induceret af Concanavalin En injektion i lacrimal kirtler: Ansøgning til Drug Efficacy Studies

Vores metode giver den manglende pålidelige dyremodel af tørre øjne sygdom, som kan være akut eller kronisk takket være vores metode til injektion af alle lacrimal kirtler og gentagne injektioner. Denne teknik pålideligt leverer Concanavalin A til ringere lacrimal kirtel ved hjælp af ultralyd vejledning til kirtler i vidt varierende størrelser og op til overlegen lacrimal kirtel gør denne metode en komplet tilgang. Denne model giver en enkel, optimeret, nonsurgical midler til at fremkalde vandige-mangelfuld tørre øjne sygdom.

Det er velegnet til at studere lægemiddeleffektivitet og sygdom patofysiologi. Identifikation posterior fortænder og udnytte ultralyd lokalisering kan være udfordrende i første omgang. Fjernelse af alle pelsen er afgørende for støtte i ultralyd lokalisering for begge disse trin.

Demonstration af proceduren vil være Wei Huang, en kandidat studerende fra mit laboratorium. Efter bekræftelse af mild sedation ved at observere en afslappet hoved position med øreflipperne ikke længere helt oprejst, bruge en mikropipette til at anvende 25 mikroliter af konserveringsmiddel-fri lidocain til det første øje og placere en fleksibel tråd låg speculum mellem øjenlågene. Brug 0,3 stænde, forstå nictating membranen på sit spids og udvide den over hornhinden.

Ved hjælp af en 26 gauge skarp nål, injicere lidocain 1% med 1:100, 000:e adrenalin subkonjuctivally i bunden af nictating membranen. Der dannes en moderat bleb over membranen. Fjern derefter speculum og gøre en identisk injektion i venstre nictating membran.

Efter ca. fem minutter skal lågets speculum sættes tilbage i medøjet og bruge 0,3 kraftvipper til at trække nictating membranen tilbage ved spidset. Brug Westcott saks, skære nictating membranen ud på sin base og fjerne speculum. Derefter placere aktuel antibiotika salve på øjet.

For palpebral portioning af den overlegne lacrimal kirtel injektion, efter bekræftelse sedation, forskydning af pels i præ-orbital og hovedbund område og bruge depilatory creme til helt at fjerne eventuelle resterende pels. Efter to minutter skal cremen fjernes og påføres 25 mikroliter af 1% konserveringsmiddelfri lidocain på det relevante øje. Evert det øverste øjenlåg og anvende blid mediale tryk på den bageste orbital fælg, indtil fortjenesten mærkning palpebral del af kirtlen er set.

Brug af fintandet kraftbefængdere og en tuberkulinsprøjte udstyret med en 27 gauge nål, direkte trænge ind i kirtlen via en transkonjunctival tilgang fremme nålen to millimeter ind i vævet og injicere 100 mikroliter af en 500 mikrogram opløsning af Concanavalin A eller Con A.Umiddelbart efter injektionen, anvende mediale pres til kloden for at forårsage orbital overlegen lacrimal kirtel til at stikke ud fra den bageste fortænder. Ved hjælp af lukkede buede kraftbepind, indrykke området, indtil knoklet åbning i kraniet mærkes og anvende yderligere beskedne tryk med hændel til at forlade en fordybning i huden til at tjene som vartegn for nålen placering. Indsæt en tuberkulin sprøjte udstyret med en 27 gauge nål vinkelret på huden over indrykningsmærket omkring en kvart tomme ind i snittet og omdirigere nålen posteriort og eksternt mod laterale canthus sigter mod midtpunktet mellem injektionsstedet og knoklet orbital fælg.

Når omdrejningspunktet for nålen er nået, skal du langsomt injicere 0,2 milliliter en 1.000 mikrogram opløsning af Con A.For ILG-injektion, se dyret fra siden for at finde ILG’ens fremtrædende plads langs den nederste forreste del af kredsløbet. Brug en kirurgisk mærkning pen til at tegne en lodret linje på huden, hvor den overfladiske del af ILG kirtel overgange fra sin overfladiske hvilested på zygomatic knoglen til sin mere mediale placering i kredsløb. Feje en lodret holdt ultralyd sonde på tværs af linjen på huden for at identificere slutningen af zygomatic knoglen.

ILG overgang opstår, hvor billedet af kirtlen skifter fra en afgrænset hyperekotisk linje til en uden en genkendelig mediale grænse. Håndstykkets relative position til den linje, der trækkes på huden, når denne ændring observeres, vil være injektionsstedet. At placere Con A i en kirtel på et punkt bare mediale til zygomatic arch knogle, indstille den ønskede dybde injektion som dybden af zygomatic knogle hyperekok signal plus en millimeter minus den kendte længde af nålen.

Sæt nålen ca. 12 millimeter ind i kirtlen på injektionsstedet, før du langsomt trækker sig tilbage, indtil længden af den eksponerede nål uden for kroppen er lig med den beregnede forskel. Derefter injiceres 0,2 milliliter af en 1.000 mikrogram Con A-opløsning og bekræfte injektionens succes ved ultralyd. ILG bør udvise et karakteristisk hyperekotisk rum.

Con A injektioner fremkalde en stærk inflammatorisk reaktion i lacrimal kirtel karakteriseret ved en tæt lymfocytisk infiltrere, der er ledsaget af en nedsat tåreproduktion. Tear lactoferrin niveauer undertrykkes resulterer i en kompromitteret hornhinde og konjunktival epitel og en øget rose bengal farvning. Injektionen af de tre orbital LG væv producerer en konsekvent og ensartet tørre øjne sygdom tilstand.

Et enkelt sæt Con A injektioner producerer tørre øjne sygdom varer omkring en uge med alle de kliniske parametre normalisere ved dag 10. Sekventielle Con A injektioner omkring en uge fra hinanden forlænge varigheden af den tørre øjensygdom i overensstemmelse hermed. Efter ca. fem sæt injektioner bliver tilstanden for tørøjesygdom ofte permanent uden behov for yderligere injektioner.

Optimalt lokalisere lacrimal kirtel strukturer er vigtigst. Kendskab til kranieanatomi og sans for fine detaljer, herunder fjernelse af pelsen sammen med dygtighed ved hjælp af ultralyd alle forbedre resultaterne. Da denne enkle teknik kræver brug af skarpe, undersøgelse bør tage passende forholdsregler for at forhindre nålen stick skader.