Please note that all translations are automatically generated.
Dit artikel beschrijft de ontwikkeling van een methode om acute of chronische droge oogziekte bij konijnen te veroorzaken door concanavalin A te injecteren in alle delen van het orbitale traankliersysteem. Deze methode, superieur aan de reeds gemelde, genereert een reproduceerbaar, stabiel model van droge ogen geschikt voor de studie van farmacologische middelen.
Onze methode biedt het ontbrekende betrouwbare diermodel van droge oogziekte dat acuut of chronisch kan zijn dankzij onze methode om alle traanklieren en herhaalde injecties te injecteren. Deze techniek levert concanavalin A betrouwbaar aan de inferieure traanklier gebruikend ultrasone begeleiding aan de klieren van wijd veranderlijke grootte en tot superieure traanklier die deze methode een volledige benadering maakt. Dit model biedt een eenvoudige, geoptimaliseerde, niet-chirurgische middelen om waterige-deficiënte droge oogziekte te induceren.
Het is zeer geschikt om de werkzaamheid van geneesmiddelen en de ziekte pathofysiologie te bestuderen. Het identificeren van achterste incisure en het gebruik van echografie lokalisatie kan een uitdaging zijn op het eerste. Het verwijderen van alle bont is van cruciaal belang om te helpen bij echografie lokalisatie voor beide stappen.
Het aantonen van de procedure zal Wei Huang zijn, een afgestudeerde student van mijn laboratorium. Na het bevestigen van milde sedatie door het observeren van een ontspannen hoofdpositie met de oorlellen niet meer volledig rechtop, gebruik een micropipet om 25 microliter conserveermiddel-vrij lidocaïne toe te passen op het eerste oog en plaats een flexibele draad deksel speculum tussen de oogleden. Met behulp van 0,3 tangen, pak het nictating membraan aan de top en breid het over het hoornvlies.
Met behulp van een 26-meter scherpe naald, injecteren lidocaïne 1%met 1:100, 000e epinephrinum subconjuctivally in de basis van de nictating membraan. Een matige bleb moet zich over het membraan vormen. Verwijder vervolgens het speculum en maak een identieke injectie in het linker nictating membraan.
Na ongeveer vijf minuten, plaats het deksel speculum terug in het medeoog en gebruik 0,3 tangen om de nictating membraan in te trekken op de top. Met behulp van Westcott schaar, snijd de nictating membraan af aan de basis en verwijder het speculum. Plaats dan actuele antibiotica zalf op het oog.
Voor palpebral portionering van de superieure traanklier injectie, na bevestiging van sedatie, scheren uit de vacht in de pre-orbitale en hoofdhuid gebied en gebruik ontharingscrème om volledig te verwijderen eventuele resterende bont. Verwijder na twee minuten de crème en breng 25 microliter van 1% conserveermiddelvrij lidocaïne aan op het juiste oog. Evert het bovenste ooglid en breng zachte mediale druk op de achterste orbitale rand totdat de uitstulende markering van de palpebral gedeelte van de klier wordt gezien.
Met behulp van fijngetande tangen en een tuberculinespuit uitgerust met een 27-meter naald, direct doordringen in de klier via een transconjunctival aanpak het bevorderen van de naald twee millimeter in het weefsel en injecteren 100 microliters van een 500 microgram oplossing van Concanavalin A of Con A.Onmiddellijk na de injectie, mediale druk uitoefenen op de aardbol om de orbitale superieure traanklier te veroorzaken uit de achterste incisure. Met behulp van gesloten gebogen tangen, inspringen het gebied tot de benige opening in de schedel wordt gevoeld en verdere bescheiden druk met tangen toe te passen om een inkeping in de huid te verlaten om te dienen als het oriëntatiepunt voor de naald plaatsing. Steek een tuberculine spuit uitgerust met een 27-meter naald loodrecht op de huid over de inkeping merk ongeveer een kwart inch in de incisie en redirect de naald posteriorly en extern in de richting van de laterale canthus gericht op het middelpunt tussen de injectieplaats en de benige orbitale rand.
Zodra de spil van de naald is bereikt, langzaam injecteren 0,2 milliliter van een 1.000 microgram oplossing van Con A.For ILG injectie, bekijk het dier vanaf de zijkant om de bekendheid van de ILG te lokaliseren langs de onderste voorste gedeelte van de baan. Gebruik een chirurgische markering pen om een verticale lijn te trekken op de huid waar het oppervlakkige deel van de ILG klier overgangen van de oppervlakkige rustplaats op de zygomatische bot naar de meer mediale locatie in de baan. Veeg een verticaal gehouden echografie sonde over de lijn op de huid om het einde van het jukbeen te identificeren.
De ILG-overgang vindt plaats wanneer het beeld van de klier verandert van een omschreven hyperechoïsche lijn naar een lijn zonder een herkenbare mediale rand. De relatieve positie van het handstuk van de lijn die op de huid wordt getekend wanneer deze verandering wordt waargenomen, is de injectieplaats. Om Con A in een klier te plaatsen op een punt dat net mediaal is voor het jukbeen van de zygomatische boog, stel de gewenste diepte van de injectie in als de diepte van het zygomatische bot hyperechoïsche signaal plus een millimeter minus de bekende lengte van de naald.
Steek de naald ongeveer 12 millimeter in de klier op de injectieplaats voordat u zich langzaam terugtrekt totdat de lengte van de blootgestelde naald buiten het lichaam gelijk is aan het berekende verschil. Injecteer vervolgens 0,2 milliliter van een 1.000 microgram Con A-oplossing en bevestig het succes van de injectie door echografie. De ILG moet een karakteristieke hyperechoïsche ruimte tentoonstellen.
Con A-injecties veroorzaken een sterke ontstekingsreactie in de traanklier die wordt gekenmerkt door een dichte lymfatische infiltrant die gepaard gaat met een verminderde traanproductie. Scheur lactoferrine niveaus worden onderdrukt wat resulteert in een gecompromitteerd hoornvlies en conjunctival epitheel en een verhoogde roos bengaalse kleuring. De injectie van de drie orbitale LG weefsels produceert een consistente en uniforme droge ogen ziekte staat.
Een enkele set con A-injecties produceert droge oogziekte die ongeveer een week duurt met alle klinische parameters die normaliseren per dag 10. Sequentiële Con A injecties ongeveer een week uit elkaar te verlengen de duur van de droge ogen ziekte dienovereenkomstig. Na ongeveer vijf sets injecties wordt de toestand van de droge oogziekte vaak permanent zonder de noodzaak van verdere injecties.
Het optimaal lokaliseren van de traanklierstructuren is het belangrijkst. Vertrouwdheid met craniale anatomie en aandacht voor fijne details met inbegrip van verwijdering van de vacht samen met vaardigheid met behulp van de echografie alle resultaten te verbeteren. Aangezien deze eenvoudige techniek het gebruik van scherpe punten vereist, moet het onderzoek de juiste voorzorgsmaatregelen nemen om verwondingen van de naaldstok te voorkomen.
