/

/

Utveckling av knock-out muskelcellinjer med Lentivirusmedierad CRISPR / Cas9-genredigering

JoVE Journal
Genetics

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Genetics

Development of Knock-Out Muscle Cell Lines using Lentivirus-Mediated CRISPR/Cas9 Gene Editing

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Utveckling av knock-out muskelcellinjer med Lentivirusmedierad CRISPR / Cas9-genredigering

DOI:

10.3791/64114-v

•

10:12 min

•

June 16, 2022

•

Mathilde Beaufils, Amandine Tourel, Anne Petiot, Nicole B. Halmai, Dave J. Segal, John Rendu, Isabelle Marty

¹University Grenoble Alpes, INSERM, U1216, CHU Grenoble Alpes, Grenoble Institut Neurosciences, ²Genome Center,University of California, Davis

Chapters

00:05Introduction
00:43CRISPR Guide Design
02:03Plasmid Cloning
03:43Lentivirus Production
06:28Myoblast Transduction
07:20Functional Characterization of Edited Clones
08:53Results: Development of RYR1-Knock Out Human Muscle Cell Line
09:42Conclusion

Summary

Automatic Translation

Protokollet beskriver hur man genererar knock-out myoblaster med CRISPR / Cas9, från utformningen av guide-RNA till cellulär kloning och karakterisering av knock-out-klonerna.

Tags

CRISPR/Cas9 Gene Editing Knock-out Muscle Cells Lentivirus IPS Cells Guide RNA PCR Agarose Gel Restriction Enzymes Plasmid Cloning

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

QTL-kartläggning och CRISPR / Cas9 redigering för att identifiera en läkemedelsresistensgen i<em> Toxoplasma gondii</em

Urval-beroende och oberoende generering av CRISPR / Cas9-medierade genknockouts i däggdjursceller

En standardmetod att undersöka Hotellets mutagenicitet som en funktion av punktmutation reparation katalyseras av CRISPR/Cas9 och SsODN i mänskliga celler

Mikroskop av CRISPR/Cas9 Protein till kanal havskatt, Ictalurus punctatus, embryon för Gene Editing

Högeffektiva gen störningar av murina och mänskliga hematopoetiska stamceller av CRISPR/Cas9

CRISPR/Cas9 gen redigering till göra villkorlig mutanter av humana malariaparasiten P. falciparum

Endogen Protein taggning i mänskliga inducerade pluripotenta stamceller med CRISPR/Cas9

Genomet redigering i däggdjur cellinjer med CRISPR-Cas

CRISPR/Cas9 Ribonucleoprotein-medierad exakt gen redigering av Tube Electroporation

Införa en gen knockout direkt i Amastigote skede av Trypanosoma cruzi med hjälp av CRISPR/Cas9 systemet

Read Article