Overview
यह वीडियो फल मक्खियों के लिए एक खिला परख का वर्णन करता है जिसमें रंगीन भोजन का उपयोग खिलाने की निगरानी के लिए किया जाता है और प्रभाव जोड़ा यौगिकों को खिलाने की गतिविधि पर हो सकता है। उदाहरण प्रोटोकॉल कई एंडोक्राइन बाधित रसायनों (ईडीसी) के प्रभावों का परीक्षण करता है।
Protocol
यह प्रोटोकॉल बोवियर एट अल., ड्रोसोफिला मेलनोगेस्टर, जे विस एक्सप्रेस (2019) में एंडोक्राइन व्यवधान का परीक्षण करने के तरीकों का एक अंश है।
1. फीडिंग परख
नोट: इस परख का परीक्षण करने की सिफारिश की जाती है कि क्या माध्यम में चयनित ईडीसी की उपस्थिति मक्खियों के भोजन को प्रभावित कर सकती है।
- चयनित ईडीसी की विभिन्न सांद्रता और एक रंग भोजन के साथ पूरक कॉर्नमील माध्यम (सीएम) युक्त शीशियों में 15 युवा मक्खियों रखो। मक्खियों को 1 दिन के लिए मीडिया पर खिलाने की अनुमति दें।
नोट: उदाहरण के लिए, लाल डाई नंबर 40 (1 मिलीग्राम/एमएल) का उपयोग करें। - अकेले सॉल्वेंट और नियंत्रण के लिए एक रंग भोजन के साथ पूरक सीएम युक्त शीशियों में 15 युवा मक्खियों रखो । मक्खियों को 1 दिन के लिए मीडिया पर खिलाने की अनुमति दें।
- ईथर के साथ मक्खियों के प्रत्येक समूह को व्यक्तिगत रूप से एनेस्थेटाइज करें।
- प्रत्येक समूह की मक्खियों को एक बेलनाकार ग्लास कंटेनर (ईथराइजर) में स्थानांतरित करें, जिसमें एक कीप खुले अंत में डाला गया है, जो कीप पर शीशी को उलटता है और मक्खियों को ईथराइजर में गिरने के लिए धीरे-धीरे दो कंटेनरों को एक साथ टैप करता है।
नोट: फ़नल उन्हें एथराइजर से बाहर निकलने से रोक देगा। - दस्तक धीरे-धीरे एक नरम सतह पर ईथराइजर को टैप करके नीचे उड़ता है, जैसे माउस-पैड, और जल्दी से कीप को ईथर-लथपथ कपास और धुंध प्लग से बदल दें।
- लगभग 1 मिनट तक प्रतीक्षा करें जब तक कि मक्खियों नीचे गिर न जाएं और आगे बढ़ना बंद न करें।
नोट: समय से अधिक न करें या मक्खियों मर जाएंगे।
- प्रत्येक समूह की मक्खियों को एक बेलनाकार ग्लास कंटेनर (ईथराइजर) में स्थानांतरित करें, जिसमें एक कीप खुले अंत में डाला गया है, जो कीप पर शीशी को उलटता है और मक्खियों को ईथराइजर में गिरने के लिए धीरे-धीरे दो कंटेनरों को एक साथ टैप करता है।
- एक स्टीरियो-माइक्रोस्कोप के नीचे स्थिर मक्खियों रखो और नियंत्रण समूह के संबंध में प्रत्येक उपचार समूह के पेट के रंग की तुलना करें।
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 17α-Ethinylestradiol | Sigma | E4876-1G | |
| Agar for Drosophila medium | BIOSIGMA | 789148 | |
| Bisphenol A | Sigma | 239658-50G | |
| Bisphenol AF | Sigma | 90477-100MG | |
| Cornmeal | CA' BIANCA | ||
| Diethyl ether | Sigma | ||
| Drosophila Vials | BIOSIGMA | 789008 | 25 mm x 95 mm |
| Drosophila Vials | BIOSIGMA | 789009 | 29 mm x 95 mm |
| Drosophila Vials | Kaltek | 187 | 22 mm x 63 mm |
| Ethanol | FLUKA | 2860 | |
| Etherizer | Crafts | cylindrical glass container with a cotton plug | |
| Hand blender Pimmy | Ariete | food processor | |
| Instant Success yeast | ESKA | Powdered yeast | |
| Red dye no. 40 | SIGMA | 16035 | |
| Stereomicroscope with LED lights | Leica | S4E |
