Prueba de alimentación: Evaluación de las preferencias de alimentación en Drosophila melanogaster

Overview

Este video describe un ensayo de alimentación para moscas de la fruta en el que se utilizan alimentos de color para monitorear la alimentación y el efecto que pueden tener los compuestos añadidos en la actividad de alimentación. El protocolo de ejemplo prueba los efectos de varios productos químicos disruptores endocrinos (EDC).

Protocol

Este protocolo es un extracto de Bovier et al., Methods to Test Endocrine Disruption in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2019).

1. Ensayo de alimentación

NOTA: Se recomienda este ensayo para comprobar si la presencia de la EDC seleccionada en el medio podría afectar la alimentación de las moscas.

1. Poner 15 moscas jóvenes en viales que contengan medio cornmeal (CM) complementado con diferentes concentraciones de la EDC seleccionada y un alimento para colorear. Permita que las moscas se alimenten de los medios durante 1 día.
   NOTA: Por ejemplo, utilice el tinte rojo nº 40 (1 mg/ml).
2. Poner 15 moscas jóvenes en viales que contengan CM complementado con el disolvente solo y un alimento para colorear para el control. Permita que las moscas se alimenten de los medios durante 1 día.
3. Anestesia individualmente cada grupo de moscas con éter.
   1. Transfiera las moscas de cada grupo a un recipiente de vidrio cilíndrico (eterizador) con un embudo insertado en el extremo abierto, invirtiendo el vial sobre el embudo y tocando suavemente los dos recipientes juntos para hacer que las moscas caigan en el eterizador.
      NOTA: El embudo les impedirá salir del eterizador.
   2. Derriba las moscas tocando suavemente el eterizador en una superficie suave, como una almohadilla de ratón, y reemplaza rápidamente el embudo con un tapón de algodón y gasa empapado en éter.
   3. Espere aproximadamente 1 minuto hasta que las moscas caigan al fondo y dejen de moverse.
      NOTA: No exceda el tiempo o las moscas morirán.
4. Coloque moscas inmovilizadas bajo un estéreo-microscopio y compare la coloración abdominal de cada grupo de tratamiento con respecto al grupo de control.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
17α-Ethinylestradiol	Sigma	E4876-1G
Agar for Drosophila medium	BIOSIGMA	789148
Bisphenol A	Sigma	239658-50G
Bisphenol AF	Sigma	90477-100MG
Cornmeal	CA' BIANCA
Diethyl ether	Sigma
Drosophila Vials	BIOSIGMA	789008	25 mm x 95 mm
Drosophila Vials	BIOSIGMA	789009	29 mm x 95 mm
Drosophila Vials	Kaltek	187	22 mm x 63 mm
Ethanol	FLUKA	2860
Etherizer	Crafts		cylindrical glass container with a cotton plug
Hand blender Pimmy	Ariete		food processor
Instant Success yeast	ESKA		Powdered yeast
Red dye no. 40	SIGMA	16035
Stereomicroscope with LED lights	Leica		S4E