Drosophila Aktivitetsmonitor (DAM): En metode til måling af lokomotivaktivitet i fluer

Abstract

Kilde: Chiu, J.C., et al. Assaying Locomotor Activity at studere døgnrytmen og søvn parametre i Drosophila. J. Vis. Exp. (2010).

Denne video beskriver Drosophila aktivitetsmonitor (DAM) system, der anvendes til at spore bevægelsesaktivitet. Forskere bruger aktivitetsdata indsamlet fra DAM til at studere døgnrytmen i frugtfluer. Det fremhævede protokolklip viser, hvordan man indlæser fluer i enheden og registrerer aktivitetsdata for døgnrytmeeksperimenter.

Protocol

Denne protokol er et uddrag fra Chiu et al.,Assaying Locomotor Activity to Study Circadian Rhythms and Sleep Parameters in Drosophila, J. Vis. Exp. (2010). 1. Lastning fluer i aktivitetsrør og lokomotorisk aktivitet overvågningssystem Før du indlæser fluer i aktivitetsrør, skal du tænde for de inkubatorer, der vil blive brugt til at huse aktivitetsmonitorerne. Juster temperaturen ved hjælp af inkubatorstyringen, og indstil lys-/mørkeregimet ved hj?…

Representative Results

Figur 1: Forførelsesgrafer genereret ved hjælp af FaasX, der viser daglige lokomotoriske aktivitetsrytmer af rytmiske vilde typefluer (w pr.0 fluer med en per+ transgen) (A og B) vs. arytmisk w pr.0 mutanter (C og D). Hanfluer blev holdt ved 25 °C og trænet i 4 dage i 12:12 LD (lys: mørk) cyklusser efterfulgt af syv dage i DD (konstant mørke). For hver fluelinje blev de indi…

Materials

Drosophila activity monitor (DAM)	Trikinetics Inc.; Waltham, MA	DAM2 or DAM5	DAM2 monitors are more compact, and more can fit into a single incubator
Power supply interface unit (for DAM system)	Trikinetics Inc.; Waltham, MA	PSIU9	Includes PS9-1 AC Power Supply
Light controller	Trikinetics Inc.; Waltham, MA	LC6
Pyrex glass tubes	Trikinetics Inc.; Waltham, MA	PGT5, PGT7, and PGT10
Plastic activity tube caps	Trikinetics Inc.; Waltham, MA	CAP5	Yarn can be used instead of plastic caps.
DAM System data collection software	Trikinetics Inc.; Waltham, MA		Versions available for both Mac and PC
FaasX software	Centre National de la Recherche Scientifique		Only for Mac
Insomniac 2.0 software	University of Pittsburgh School of Medicine		Runs on Matlab. Can be used on both PC and Macintosh.
Environmental incubator with temperature and diurnal control, e.g. Percival incubator	Percival Scientific, Inc.	I-30BLL	Interior space dimension:Width: 65cm;Height: 86cm;Depth: 55cm
Environmental incubator with temperature and diurnal control, e.g. DigiTherm Heating/Cooling Incubator with Circadian Timed Lighting and Timed Temperature	Tritech Research, Inc.	05DT2CIRC001	Interior space dimension:Width: 36m;Height: 56m;Depth: 28cm
APC Smart-UPS 2200VA 120V (Emergency power backup unit)	APC	SU2200NET	Output Power Capacity of 1600 Watts
Sucrose	Sigma-Aldrich	S7903
Bacto Agar	BD Biosciences	214010
TissuePrep Paraffin pellets	Fisher Scientific	T565	Melting point 56 °C-57 °C
Block heater	VWR international	12621-014