Drosophila Aktivitätsmonitor (DAM): Eine Methode zur Messung der Bewegungsaktivität bei Fliegen

Abstract

Quelle: Chiu, J.C., et al. Assaying Locomotor Activity to Study Circadian Rhythms and Sleep Parameters in Drosophila. J. Vis. (2010).

Dieses Video beschreibt das Drosophila Activity Monitor (DAM) System, das verwendet wird, um die Aktivität des Bewegungsapparates zu verfolgen. Die Forscher verwenden Aktivitätsdaten, die vom DAM gesammelt wurden, um zirkadiane Rhythmen in Fruchtfliegen zu untersuchen. Der vorgestellte Protokollclip zeigt, wie Man Fliegen im Gerät lädt und Aktivitätsdaten für zirkadiane Experimente aufzeichnet.

Protocol

Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Chiu et al., Assaying Locomotor Activity to Study Circadian Rhythms and Sleep Parameters in Drosophila, J. Vis. Exp. (2010). 1. Laden von Fliegen in Aktivitätsröhren und Bewegungsüberwachungssystem Bevor Sie Fliegen in Aktivitätsrohre laden, schalten Sie die Inkubatoren ein, mit denen die Aktivitätsmonitore untergebracht werden. Stellen Sie die Temperatur mit den Inkubatorsteuerungen ein und stellen Sie das Licht-Du…

Representative Results

Abbildung 1: Eduction-Graphen, die mit FaasX erzeugt werden und die tägliche bewegungsmotorische Aktivitätsrhythmen rhythmischer Wildtypfliegen (w pro0 Fliegen mit einem per+-Transgen) (A und B) vs. arrhythmische w pro0 Mutanten (C und D) zeigen. Männliche Fliegen wurden bei 25 °C gehalten und für 4 Tage in 12:12 LD (hell: dunkel) Zyklen, gefolgt von sieben Tagen in DD (konst…

Materials

Drosophila activity monitor (DAM)	Trikinetics Inc.; Waltham, MA	DAM2 or DAM5	DAM2 monitors are more compact, and more can fit into a single incubator
Power supply interface unit (for DAM system)	Trikinetics Inc.; Waltham, MA	PSIU9	Includes PS9-1 AC Power Supply
Light controller	Trikinetics Inc.; Waltham, MA	LC6
Pyrex glass tubes	Trikinetics Inc.; Waltham, MA	PGT5, PGT7, and PGT10
Plastic activity tube caps	Trikinetics Inc.; Waltham, MA	CAP5	Yarn can be used instead of plastic caps.
DAM System data collection software	Trikinetics Inc.; Waltham, MA		Versions available for both Mac and PC
FaasX software	Centre National de la Recherche Scientifique		Only for Mac
Insomniac 2.0 software	University of Pittsburgh School of Medicine		Runs on Matlab. Can be used on both PC and Macintosh.
Environmental incubator with temperature and diurnal control, e.g. Percival incubator	Percival Scientific, Inc.	I-30BLL	Interior space dimension:Width: 65cm;Height: 86cm;Depth: 55cm
Environmental incubator with temperature and diurnal control, e.g. DigiTherm Heating/Cooling Incubator with Circadian Timed Lighting and Timed Temperature	Tritech Research, Inc.	05DT2CIRC001	Interior space dimension:Width: 36m;Height: 56m;Depth: 28cm
APC Smart-UPS 2200VA 120V (Emergency power backup unit)	APC	SU2200NET	Output Power Capacity of 1600 Watts
Sucrose	Sigma-Aldrich	S7903
Bacto Agar	BD Biosciences	214010
TissuePrep Paraffin pellets	Fisher Scientific	T565	Melting point 56 °C-57 °C
Block heater	VWR international	12621-014