Drosophila Aktivitetsmonitor (DAM): En metode for å måle lokomotorisk aktivitet i fluer

Abstract

Kilde: Chiu, J.C., et al. Analyse av lokomotorisk aktivitet for å studere døgnrytme og søvnparametere i Drosophila. J. Vis. Utt. (2010).

Denne videoen beskriver Drosophila activity monitor (DAM)-systemet som brukes til å spore lokomotorisk aktivitet. Forskere bruker aktivitetsdata samlet inn fra DAM for å studere døgnrytmer i fruktfluer. Det utvalgte protokollklippet viser hvordan du laster fluer i enheten og registrerer aktivitetsdata for døgneksperimenter.

Protocol

Denne protokollen er et utdrag fra Chiu et al.,som analysen av lokomotorisk aktivitet for å studere døgnrytmer og søvnparametere i Drosophila, J. Vis. Exp. (2010). 1. Lasting av fluer i aktivitetsrør og lokomotorisk aktivitetsovervåkingssystem Før du laster fluer inn i aktivitetsrør, slå på inkubatorene som skal brukes til å huse aktivitetsmonitorene. Juster temperaturen ved hjelp av inkubatorkontrollene og still inn det lyse/mørke regimet ved h…

Representative Results

Figur 1: Eduction grafer generert ved hjelp av FaasX som viser daglige lokomotoriske aktivitetsrytmer av rytmiske villtype fluer (w per0 fluer som bærer en per + transgene) (A og B) vs. arytmisk w per0 mutanter (C og D). Mannlige fluer ble holdt ved 25 °C og indusert i 4 dager i 12:12 LD (lys: mørke) sykluser etterfulgt av syv dager i DD (konstant mørke). For hver flylinje ble…

Materials

Drosophila activity monitor (DAM)	Trikinetics Inc.; Waltham, MA	DAM2 or DAM5	DAM2 monitors are more compact, and more can fit into a single incubator
Power supply interface unit (for DAM system)	Trikinetics Inc.; Waltham, MA	PSIU9	Includes PS9-1 AC Power Supply
Light controller	Trikinetics Inc.; Waltham, MA	LC6
Pyrex glass tubes	Trikinetics Inc.; Waltham, MA	PGT5, PGT7, and PGT10
Plastic activity tube caps	Trikinetics Inc.; Waltham, MA	CAP5	Yarn can be used instead of plastic caps.
DAM System data collection software	Trikinetics Inc.; Waltham, MA		Versions available for both Mac and PC
FaasX software	Centre National de la Recherche Scientifique		Only for Mac
Insomniac 2.0 software	University of Pittsburgh School of Medicine		Runs on Matlab. Can be used on both PC and Macintosh.
Environmental incubator with temperature and diurnal control, e.g. Percival incubator	Percival Scientific, Inc.	I-30BLL	Interior space dimension:Width: 65cm;Height: 86cm;Depth: 55cm
Environmental incubator with temperature and diurnal control, e.g. DigiTherm Heating/Cooling Incubator with Circadian Timed Lighting and Timed Temperature	Tritech Research, Inc.	05DT2CIRC001	Interior space dimension:Width: 36m;Height: 56m;Depth: 28cm
APC Smart-UPS 2200VA 120V (Emergency power backup unit)	APC	SU2200NET	Output Power Capacity of 1600 Watts
Sucrose	Sigma-Aldrich	S7903
Bacto Agar	BD Biosciences	214010
TissuePrep Paraffin pellets	Fisher Scientific	T565	Melting point 56 °C-57 °C
Block heater	VWR international	12621-014