Drosophila Optogenetica: een methode om neuronale circuits te manipuleren

Published: April 30, 2023

Abstract

Bron: de Vries, S. E., Clandinin, T. Optogenetic Stimulation of Escape Behavior in Drosophila melanogaster. J.Vis. Exp. (2013).

Optogenetica maakt het gebruik van licht mogelijk om neuronen te manipuleren die genetisch zijn ontworpen om specifieke opsines-lichtgevoelige eiwitten uit te drukken waarvan de lichtactivatie een verandering in de toestand van het neuron teweegbrengt. Hier beschrijven we een optogenetische benadering in Drosophila met behulp van de opsin Channelrhodopsin2. Het voorbeeldprotocol bevat een optogenetische testset om het neuronale circuit achter het ontsnappingsgedrag van de vlieg te bestuderen.

Protocol

Dit protocol is een fragment uit de Vries en Clandinin, Optogenetic Stimulation of Escape Behavior in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2013). 1. Genereer Channelrhodopsin-vliegen Cross UAS-ChR2 vliegt met de Gal4 driver van uw keuze, we gebruiken G105-Gal4, die wordt uitgedrukt in Foma-1 neuronen in de optische kwab. Om de mogelijkheid van een visuele reactie op de blauwlichtstimulatie te elimineren, bevinden beide vlieglijnen zich op een w+</s…

Representative Results

Figuur 1: Experimentele opstelling met het platform met de verticale houder en de vier koelvloeistof hosing armen met koellichaamken met LED-arrays erop bevestigd. (A) De opstelling onder omgevingsverlichting. (B) De opstelling wanneer de LED’s branden. (C) Een close-up van een Tri-Star LED op het koellichaam. (D) Een close-up van de Tri-Star met de tri-l…

Materials

Reagent
All-trans Retinal Advance Scientific Chemical Inc R3041
Equipment
Heat Sink 9.2 C/W Luxeonstar LPD30-30B 30 mm square X 30 mm high
Carclo 18° Tri-Lens Luxeonstar 10507
Blue Rebel LED on Tri-Star Base Luxeonstar MR-B0030-20T 470 nm, 174 lm @ 700 mA.
700 mA BuckPuck DC Driver Luxeonstar 3021-D-E-700
Wiring Harness for BuckPuck Driver Luxeonstar 3021-HE
Pre-cut thermal adhesive tape Luxeonstar LXT-S-12 20 mm Hex Base
Snap-Loc Coolant Hose, ¼" ID McMaster-Carr 5307K49
Snap-Loc Coolant Hose Connector McMaster-Carr 5307K39 ¼" NPT Male
Laboratory Grade Switching Mode Programmable DC Power Supply BK Precision 1698
Exilim camera Casio EX-FH20

Play Video

Cite This Article
Drosophila Optogenetics: A Method to Manipulate Neuronal Circuits. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20149, doi: (2023).

View Video