Drosofilia Optogenetica: un metodo per manipolare i circuiti neuronali
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: de Vries, S. E., Clandinin, T. Stimolazione optogenetica del comportamento di fuga in Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2013).
L’optogenetica consente l’uso della luce per manipolare i neuroni geneticamente ingegnerizzati per esprimere specifiche proteine sensibili alle opsine-luce la cui attivazione della luce innesca un cambiamento nello stato del neurone. Qui descriviamo un approccio optogenetico in Drosophila usando l’opsina Channelrhodopsin2. Il protocollo di esempio presenta un saggio di optogenetica impostato per studiare i circuiti neuronali dietro il comportamento di fuga della mosca.
Protocol
Questo protocollo è un estratto da de Vries e Clandinin, Stimolazione optogenetica del comportamento di fuga in Drosophila melanogaster,J. Vis. Exp. 1. Genera mosche Channelrhodopsin Cross UAS-ChR2 vola con il driver Gal4 di vostra scelta, usiamo G105-Gal4, che è espresso nei neuroni Foma-1 nel lobo ottico. Per eliminare la possibilità di una risposta visiva alla stimolazione della luce blu, entrambe le linee di volo si trovano su uno sfondo w+</…
Representative Results
Figura 1: Configurazione sperimentale che mostra la piattaforma con il supporto verticale e i quattro bracci di tubo del refrigerante che tengono i dissipatori di calore con array LED apposti su di essi. (A) L’ambiente sotto illuminazione ambientale. (B) L’configurazione quando i LED sono illuminati. (C) Una vista ravvicinata di un LED Tri-Star sul dissipatore di calore. …
Materials
| Reagent | |||
| All-trans Retinal | Advance Scientific Chemical Inc | R3041 | |
| Equipment | |||
| Heat Sink 9.2 C/W | Luxeonstar | LPD30-30B | 30 mm square X 30 mm high |
| Carclo 18° Tri-Lens | Luxeonstar | 10507 | |
| Blue Rebel LED on Tri-Star Base | Luxeonstar | MR-B0030-20T | 470 nm, 174 lm @ 700 mA. |
| 700 mA BuckPuck DC Driver | Luxeonstar | 3021-D-E-700 | |
| Wiring Harness for BuckPuck Driver | Luxeonstar | 3021-HE | |
| Pre-cut thermal adhesive tape | Luxeonstar | LXT-S-12 | 20 mm Hex Base |
| Snap-Loc Coolant Hose, ¼" ID | McMaster-Carr | 5307K49 | |
| Snap-Loc Coolant Hose Connector | McMaster-Carr | 5307K39 | ¼" NPT Male |
| Laboratory Grade Switching Mode Programmable DC Power Supply | BK Precision | 1698 | |
| Exilim camera | Casio | EX-FH20 |
Cite This Article
Drosophila Optogenetics: A Method to Manipulate Neuronal Circuits. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20149, doi: (2023).