ड्रोसोफिला ऑप्टोजेनेटिक्स: न्यूरोनल सर्किट में हेरफेर करने के लिए एक विधि

Abstract

स्रोत: डी वेरियों, एस ई, क्लेनडिनिन, टी ऑप्टोजेनेटिक उत्तेजना से बचने के व्यवहार के ड्रोसोफिला मेलनोगास्टरमें। जे विस एक्सप्रेस। (2013).

ऑप्टोजेनेटिक्स प्रकाश के उपयोग को न्यूरॉन्स में हेरफेर करने में सक्षम बनाता है जो आनुवंशिक रूप से विशिष्ट ऑप्सिन-प्रकाश-संवेदनशील प्रोटीन को व्यक्त करने के लिए इंजीनियर होते हैं जिनकी प्रकाश सक्रियण न्यूरॉन की स्थिति में बदलाव को ट्रिगर करती है। यहां हम ऑप्सिन चैनलरोडोप्सिन 2 का उपयोग करके ड्रोसोफिला में एक ऑप्टोजेनेटिक दृष्टिकोण का वर्णन करते हैं। उदाहरण प्रोटोकॉल में फ्लाई के भागने के व्यवहार के पीछे न्यूरोनल सर्किटरी का अध्ययन करने के लिए एक ऑप्टोजेनेटिक्स परख सेट है।

Protocol

यह प्रोटोकॉल डी वेरियों और क्लेडिनिन, ऑप्टोजेनेटिक उत्तेजना ऑफ एस्केप बिहेवियर इन ड्रोसोफिला मेलनोगेस्टर, जे विस एक्सपी (2013) का एक अंश है। 1. चैनलरोडोप्सिन मक्खियों को उत्पन्न करें …

Representative Results

चित्रा 1: वर्टिकल होल्डर के साथ मंच दिखाते हुए प्रायोगिक सेट-अप और एलईडी सरणी के साथ गर्मी सिंक रखने वाले चार कूलेंट होसिंग हथियार। (A)परिवेश रोशनी के तहत सेट-?…

Materials

Reagent
All-trans Retinal	Advance Scientific Chemical Inc	R3041
Equipment
Heat Sink 9.2 C/W	Luxeonstar	LPD30-30B	30 mm square X 30 mm high
Carclo 18° Tri-Lens	Luxeonstar	10507
Blue Rebel LED on Tri-Star Base	Luxeonstar	MR-B0030-20T	470 nm, 174 lm @ 700 mA.
700 mA BuckPuck DC Driver	Luxeonstar	3021-D-E-700
Wiring Harness for BuckPuck Driver	Luxeonstar	3021-HE
Pre-cut thermal adhesive tape	Luxeonstar	LXT-S-12	20 mm Hex Base
Snap-Loc Coolant Hose, ¼" ID	McMaster-Carr	5307K49
Snap-Loc Coolant Hose Connector	McMaster-Carr	5307K39	¼" NPT Male
Laboratory Grade Switching Mode Programmable DC Power Supply	BK Precision	1698
Exilim camera	Casio	EX-FH20