Drosophila (olika betydelser) Optogenetik: En metod för att manipulera neuronala kretsar

Published: April 30, 2023

Abstract

Källa: de Vries, S. E., Clandinin, T. Optogenetic Stimulation of Escape Behavior in Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2013).

Optogenetik gör det möjligt att använda ljus för att manipulera nervceller som är genetiskt konstruerade för att uttrycka specifika opsiner – ljuskänsliga proteiner vars ljusaktivering utlöser en förändring i neurons tillstånd. Här beskriver vi ett optogenetiskt tillvägagångssätt i Drosophila med hjälp av opsin Channelrhodopsin2. Exempelprotokollet har en optogenetikanalys inställd för att studera de neuronala kretsarna bakom flugans flyktbeteende.

Protocol

Detta protokoll är ett utdrag från de Vries och Clandinin, Optogenetic Stimulation of Escape Behavior i Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2013). 1. Generera Channelrhodopsin flugor Cross UAS-ChR2 flyger med Gal4-föraren du väljer, vi använder G105-Gal4, som uttrycks i Foma-1-nervceller i optikloben. För att eliminera möjligheten till ett visuellt svar på blåljusstimuleringen är båda fluglinjerna i en w+norpA-bakgrund. …

Representative Results

Figur 1: Experimentell uppsättning som visar plattformen med den vertikala hållaren och de fyra kylvätskespolande armarna som håller kylflänsar med LED-matriser fästa på dem. a)Uppsättningen under omgivande belysning. B)Uppsättningen när lysdioderna tänds. (C) En närbild av en Tri-Star LED på kylflänsen. (D) En närmslutning av Tri-Star med …

Materials

Reagent
All-trans Retinal Advance Scientific Chemical Inc R3041
Equipment
Heat Sink 9.2 C/W Luxeonstar LPD30-30B 30 mm square X 30 mm high
Carclo 18° Tri-Lens Luxeonstar 10507
Blue Rebel LED on Tri-Star Base Luxeonstar MR-B0030-20T 470 nm, 174 lm @ 700 mA.
700 mA BuckPuck DC Driver Luxeonstar 3021-D-E-700
Wiring Harness for BuckPuck Driver Luxeonstar 3021-HE
Pre-cut thermal adhesive tape Luxeonstar LXT-S-12 20 mm Hex Base
Snap-Loc Coolant Hose, ¼" ID McMaster-Carr 5307K49
Snap-Loc Coolant Hose Connector McMaster-Carr 5307K39 ¼" NPT Male
Laboratory Grade Switching Mode Programmable DC Power Supply BK Precision 1698
Exilim camera Casio EX-FH20

Play Video

Cite This Article
Drosophila Optogenetics: A Method to Manipulate Neuronal Circuits. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20149, doi: (2023).

View Video