C. 예인대 이동 추적: 웜의 운동 을 평가하는 방법

Abstract

출처: 데이비스, A. G. 외. 에탄올이 카노르하비티스 예레건의운동 속도에 미치는 영향을 측정하기 위한 분석. J. 비스 익스펙. (2015). 

이 비디오는 비디오에서 웜 움직임을 기록하기 위해 비디오 및 추적 소프트웨어를 사용하여 설명합니다.  예제 프로토콜은 웜 운동에 에탄올 노출의 효과를 측정합니다.

Protocol

다음 프로토콜은 데이비스 외에서 발췌, Caenorhabditis elegans의운동 속도에 에탄올의 효과를 측정하기위한 분석, J. Vis. Exp. (2015).  분석 전날 에 수행할 단계 Op50 E. 대장균의잔디로 시드된 신선한 선충 성장 매체(NGM) 플레이트에 L4 단계 웜을 ?…

Materials

C. elegans strains	Caenorhabditis Genetics Center
60 x 15 mm Petri plates, triple vented	Greiner Bio-One	628161	Other plate brands will suffice.
NGM agar	Various		NaCl (3 g/L), agar (17 g/L), peptone (2.5 g/L), 1 ml cholesterol (5 mg/ml in ethanol), 1 ml (1 M) MgSO4, 1 ml (1 M) CaCl2, 25 ml (1 M) KPO4, pH=6, 975 ml H2O
Forceps	Various		e.g., Fisher Scientific #10300
37 °C Incubator	Various		For drying agar
Copper rings	Plumbmaster	STK#35583 (48 cap thread gasket)	1.6 cm inner diameter, 1.8 cm outer diameter copper rings
100% ethanol	Various
Parafilm M	Bemis	PM996
CCD camera	QImaging	RET-4000R-F-M-12	This camera has a large field of view.
Stereomicroscope with C-mount and 0.5X objective	Leica	MZ6	Discontinued model, M60 is current equivalent.
Light source	Schott	A08923	3”x3”  backlight for even illumination across the field of view
Imaging and tracking software	Media Cybernetics	ImagePro-Plus v6.0-6.3	Newer versions of the software have tracking functions.