C. elegans Rörelsespårning: En metod för att bedöma rörelse i maskar

Abstract

Källa: Davies, A. G. et al. En analys för att mäta effekterna av etanol på Caenorhabditis rörelsehastighet elegans. J. Vis. Exp. (2015). 

Den här videon beskriver användningen av video- och spårningsprogram för att spela in maskrörelser på en arena.  Exempelprotokollet mäter effekten av etanolexponering på maskrörelse.

Protocol

Följande protokoll är ett utdrag från Davies et al, An Assay for Measuring the Effects of Ethanol on the Locomotion Speed of Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2015). Steg att utföra dagen före analysen Välj L4-scenmaskar till färska nematodtillväxtmedium (NGM) plattor sådda med en gräsmatta op50 E. coli<…

Materials

C. elegans strains	Caenorhabditis Genetics Center
60 x 15 mm Petri plates, triple vented	Greiner Bio-One	628161	Other plate brands will suffice.
NGM agar	Various		NaCl (3 g/L), agar (17 g/L), peptone (2.5 g/L), 1 ml cholesterol (5 mg/ml in ethanol), 1 ml (1 M) MgSO4, 1 ml (1 M) CaCl2, 25 ml (1 M) KPO4, pH=6, 975 ml H2O
Forceps	Various		e.g., Fisher Scientific #10300
37 °C Incubator	Various		For drying agar
Copper rings	Plumbmaster	STK#35583 (48 cap thread gasket)	1.6 cm inner diameter, 1.8 cm outer diameter copper rings
100% ethanol	Various
Parafilm M	Bemis	PM996
CCD camera	QImaging	RET-4000R-F-M-12	This camera has a large field of view.
Stereomicroscope with C-mount and 0.5X objective	Leica	MZ6	Discontinued model, M60 is current equivalent.
Light source	Schott	A08923	3”x3”  backlight for even illumination across the field of view
Imaging and tracking software	Media Cybernetics	ImagePro-Plus v6.0-6.3	Newer versions of the software have tracking functions.