Protocol
Alle experimentele procedures zijn goedgekeurd door de McLean Hospital Institutional Animal Care en gebruik Comite. Opmerking: Het volgende protocol beschrijft een benadering van CPP en bewegingsapparaat sensibilisatie, veel details van die verschillen van andere succesvolle protocollen (bijvoorbeeld licht- donker versus-fase test, opeenvolgende versus intermitterende dosering, etc.). Beginners kunnen wensen om te beginnen met deze protocollen, of gewoon gebruik maken van hen als gidsen, het aanpassen van wijzigingen uit de literatuur op basis van de experimentele vraag (s) bij de hand. Geautomatiseerde meetmethoden worden beschreven; het is echter mogelijk om niet-geautomatiseerde middelen voor elke assay (dwz video-opname, scoringsmallen).
1. Geconditioneerde Place Preference
- Apparatuur en Room Set-Up:
- Handvat experimentele muizen gedurende 1-3 minuten per dag, gedurende ten minste 3-5 dagen voorafgaand aan het testen.
LET OP: Nooit-behandelde muizen kan het verwijderen uit de kamer stre vindenssful, te verstoren of te wijzigen conditionering. - Verkrijgen van vier of meer drie-chambered CPP apparaten, bij voorkeur voorzien van photobeams voor geautomatiseerde data verzamelen 18. Zorg ervoor dat elke kamer heeft twee grotere, visually- en tactiel-afzonderlijke kamers te sluiten op een kleinere, neutrale kamer via deuren die kan worden verhoogd / verlaagd om de toegang te controleren. Deksels op elke kamer zou moeten openen voor het inbrengen / verwijderen van muizen en gemonteerd worden met kleine, individueel regelbare (dimbaar) verlichting (één per kamer).
OPMERKING: CPP kamer ontwerpen variëren en kan commercieel worden gekocht of gebouwd door de onderzoekers. Voor de "evenwichtige" design, een aanbevolen regeling is een grotere kamer met witte muren en draadrooster vloeren en de andere met zwarte wanden en vloeren bar. De middelste kamer moet grijze muren en effen grijs plexiglas vloer te hebben. Omwille van de duidelijkheid zullen deze kamers worden aangeduid als "wit", "zwart" en "midden".Deksels moeten duidelijk plexiglas zijn. Alternate-configuraties (één- of twee-kamer) zijn ook mogelijk en besproken elders (zie Discussie). - Setup de kamer zoals het zal zijn tijdens het testen: uitschakelen of overhead lichten om de zwakste instelling en sluit de deur. Gebruik een lichte meter in elke kamer en zet het deksel lichten zodat midden kamers zijn iets helderder (15-20 lux) dan zwart en wit camera's (6-10 lux) om muizen uit tijd doorbrengen daar te ontmoedigen.
LET OP: Als de gemiddelde tijd doorgebracht in het midden is zo veel of meer dan in het zwart of wit kamers, die verder de verlichting contrast in stap 1.1.3 beschreven te verhogen. U kunt ook gebruik maken van minder aantrekkelijk vloer voor het midden. (Bv ~ 220 0,5 cm diameter gaten, gelijkmatig verdeeld in 6 x 3,5 x ¼ "plexiglas), maar voorkomen dat deze kamer aversieve. Pilot eventuele wijzigingen om ervoor te zorgen dat de afname van de middelste tijd zijn niet te wijten aan een afname van de totale verkenningen (overwegen) . - Program verzamelen geautomatiseerde data ( "procedure" Figuur 1A) of handmatig verzamelen volgens de volgende parameters. Set proeven om te beginnen op de eerste bundel breuk in beide conditioning kamer. Set "test" sessies 20 min lang zijn en tijd en balk breekt elke kamer volgen. Stel "conditionering" sessies 30 min lang en (eventueel) overzenden onderbrekingen in iedere ruimte meten. Zet alle kamer lichten te verlichten tijdens de proef.
- Bereid volledige volume van de cocaïne-oplossing die nodig zijn voor het experiment bij de hand. Oplossen cocaïne HCl in 0,9% NaCl (zoutoplossing), de uiteindelijke concentratie te baseren op een injectievolume van 0,1 ml / 10 g lichaamsgewicht (bijvoorbeeld voor een dosis van 5 mg / kg, oplossing concentratie 0,5 mg / ml). Vortex mengsel gedurende 30-45 sec, steriel filter (0,2 um spuit filters) en bewaar bij kamertemperatuur.
- Handvat experimentele muizen gedurende 1-3 minuten per dag, gedurende ten minste 3-5 dagen voorafgaand aan het testen.
- testen:
LET OP: De algemene tijdslijn voor CPP is PRE-TEST, conditionering, endan post-test. De pre-test kan van conditionering worden gescheiden door 1-3 dagen; echter, conditionering en de post-testdag dient plaats op opeenvolgende dagen (Figuur 2A) te nemen. Dit tijdstip moet gelijk zijn voor alle cohorten in hetzelfde experiment worden bewaard.- Test tijdens lichte fase van de dieren met dezelfde apparatuur voor elk dier in heel dagen.
- Elke proef dag (dat wil zeggen, tests en conditionering dagen), te verplaatsen muizen om de gedrags-voorkamer en hen in staat stellen om ongestoord te zitten in hun huis kooien voor 1-1,5 uur voor de proef. Kies een locatie waar de muizen snel uit hun kooi kunnen worden verplaatst naar het apparaat, met een minimale verstoring, wanneer het proces begint. Zet alle apparatuur, zodat geen lawaai gekoppeld aan de test (bijvoorbeeld uitrusting fans) aanwezig zijn.
- Elk apparaat (binnenwanden, vloeren en trays) met een milde grondig te reinigen, alcohol, glycol-ether- of op basis van ammoniak desinfecterende doekjes voor en na elke muis (gebruik de same soort van schonere gedurende het experiment). Niet verwaarlozen vloeren onderzijde.
- Controleer of de kamer lichten zijn goed ingesteld (uitgeschakeld of gedimd) aan het begin van elke dag.
- Ga als volgt naargelang het een "test" of "conditionering" dag:
- On Trial Dagen 1 en 6 (dat wil zeggen, de pre- en post-tests), plaatst u de inter-kamer deuren in de open stand (figuur 2B).
- Laad de "test" computerprogramma en voer dier IDs (Figuur 1A), dan geven start commando (Figuur 1B), indien van toepassing.
- Voorzichtig lagere elke muis in de middelste kamer van de toegewezen toestellen, met uitzicht op de achterwand, en zacht sluit het deksel. Zodra alle kamers worden geladen, laat de testkamer en het lawaai te beperken.
- Laat muizen in elke inrichting tot proeven voor alle muizen hebben gesloten / beëindigd (figuur 1C). proef gegevens exporteren.
<li> Net voor of na de pre-test, wegen de dieren. Gebruik deze gewichten voor berekeningen dosis tijdens het conditioneren.
- Ter voorbereiding voor het conditioneren van proeven, het berekenen van elke muis pre-test "voorkeur" voor de zwarte en witte kamers door het aftrekken van de tijd doorgebracht in elk van deze van de andere (dat wil zeggen, "black minus wit" en "white minus zwart", zie figuur 3, kolommen 9 en 10).
- Omdat muizen met sterke aanvankelijke voorkeuren te maken balanceren moeilijk vast te stellen een aanvaardbare limiet voor preferente scores (bijvoorbeeld <33% van de totale proces tijd) en sluiten muizen dat het overschrijden van de berekeningen. Gebruik een liberale limiet (<66% van de totale proces tijd) om de integratie te maximaliseren wanneer uitputtingsslag is waarschijnlijk na de test is afgerond (bijvoorbeeld als gevolg van off-target chirurgische manipulaties).
OPMERKING: Muizen boven de grens nog worden getest, waarbij een poging hun voortoets voorkeuren in balans te houden. Later, teze muizen kunnen worden uitgesloten van de analyse, indien nodig, pretestscores evenwicht. Als extreme pretest fouten (dwz> 800 sec) onevenredig één groep beïnvloeden, overwegen veranderen van de conditionering milieus en / of het gebruik van andere testen. - Kies de zwarte of witte kamer als de drug-pairing kamer voor elke muis, ondertussen het optellen van de overeenkomstige pre-test voorkeur scores binnen elke groep met de volgende prioriteiten in het achterhoofd:
OPMERKING: Zorg ervoor dat scores tussen groepen in evenwicht te brengen binnen elk cohort, alsmede over eventuele eerdere cohorten.- Maak de bedragen die voor alle groepen zo gelijkwaardig mogelijk.
- Maak bedragen zo dicht mogelijk bij nul (dat wil zeggen, kies de gewenste kant voor sommige muizen en de niet-dominante kant voor anderen). Als een bijna-zero sum is onmogelijk voor een bepaalde groep, opnieuw aan te passen alle anderen die nauw aansluit bij de beste te verkrijgen score voor de beperking van de groep, ten gunste van licht negatief groep somt oppositief.
- Zoveel als mogelijk is, houden opdrachten van zwarte versus wit en bij voorkeur versus niet-aangewezen kamers voor drug paringen zelfs binnen elke groep.
- Aangezien het niet altijd mogelijk om de bovengenoemde doelen te bereiken, corrigeer afwijkingen door tegengestelde overwegingen in evenwicht latere cohorten; echter, proberen te voorkomen dat de productie cohorten met wild verschillende gemiddelde pre-test voorkeuren.
- Op Conditioning Dagen 2-5, plaats inter-kamer deuren in de gesloten stand (figuur 2C).
- Bereid afzonderlijke spuiten met cocaïne (dagen 2 en 4) of zoutoplossing (Days 3 & 5) oplossing, zoals beschreven in stap 1.1.5 en gebaseerd op lichaamsgewicht gemeten pretest.
OPMERKING: dosis moet gekozen worden aan experimentele verwachtingen, overwegingen in de inleiding genoemde en mogelijke vloer en plafond effecten. Het is vaak het beste om onafhankelijke experimenten met tenminste twee verschillende doses voeren. - Load "conditioning "computerprogramma en voer dier IDs (Figuur 1A), dan geven start commando (Figuur 1B), indien van toepassing.
- Scruff en injecteer elke muis (ip), ze onmiddellijk te verlagen in de juiste zwarte of witte kamer van de hun toegewezen toestel met uitzicht op de achterste muur, dan zachtjes sluit het deksel. Zodra alle kamers worden geladen, laat de testkamer en het lawaai te beperken.
- Verwijderen muizen uit de kamer zo dicht precies 30 min als mogelijk (dat wil zeggen dat de eerste muizen uit hun kamers terwijl andere muizen nog conditionering). Verwijder dieren zo stil mogelijk, zonder dat er ruis.
- Kies een analysemethode. Ofwel aftrekken tijd besteed aan de zoutoplossing gepaarde kant tijdens de post-test van de tijd besteed aan de cocaïne gepaarde kant tijdens de post-test (cocaïne - zoutoplossing, sec) of gebruik maken van de tijd doorgebracht in de post-test-drug gepaarde kamerminus de pre-test tijd besteed aan de drug-gepaarde kamer.
LET OP: als u de eerste methode, ook plot grafieken van de gemiddelde tijd doorgebracht in het midden, saline- en drug-gepaarde kamers tijdens de pre- en post-tests voor elke groep. In vergelijking met de pre-test moet de nameting verhoogde weer te geven in de geneesmiddel gepaarde kant en verminderde tijd in de saline-gepaarde zijde (zie figuur 6, bodem en Lees toelichting). - Afhankelijk van de aard en het aantal groepen worden vergeleken, gebruik een t-test-of twee-weg ANOVA, waar nodig, mogelijk met post-hoc analyse, hetzij van de boven gepresenteerde aftrekken scores analyseren.
OPMERKING: Cocaïne voorkeur scores vaak variabel te zijn, en bovendien kan negatief zijn (dat wil zeggen aangeven afkeer van de geneesmiddel gepaarde side). Muizen die afkeer tonen niet verwijderd (tenzij het statistische uitbijters), aangezien dit resultaat is normaal en waarschijnlijk belangrijk voor het bepalen van verschillen tussen groups. Verwacht om steekproeven van 12 tot 30 dieren hebben per groep, afhankelijk van de grootte effect van de behandeling.
2. Locomotor Overgevoeligheid
- Apparatuur en Room Set-Up
- Zorg voor een 4 x 8 (X x Y) fotocel array (buitenafmetingen 11.5 "x 20"). Construct een bovenzijde open kamer van zwart plexiglas (binnenmaat 22 1/6 "x 13 ¾" x 9 3/8 ") naar de matrix (Figuur 4A) huisvesten.
- Bereid de testkamer zodat een rood licht (plafond of wand) tijdens het testen worden gebruikt.
- Maak afzonderlijke programma sessies voor de dagelijkse gewenning en injectie trials.
- Stel gewenning trials 30-60 min en injectie proeven tussen 60-120 min (Figuur 5B). De aanbevolen lengte voor elke 60 min is. Houd proef lengte consistent in meerdere cohorten in hetzelfde experiment.
- Set proeven Reco beginnenrding op de eerste bundel pauze die optreedt na het startsignaal is gestart (Figuur 5B). Voor de injectie proces, stelt u het startsignaal, zodat dozen individueel kan worden gestart (niet in harmonie), indien mogelijk.
- Set balk pauzes worden opgenomen in door de gebruiker gedefinieerde "bakken", bij voorkeur 5 minuten elk (Figuur 5B).
- Bereid volledige volume van de cocaïne-oplossing die nodig zijn voor het experiment bij de hand. Oplossen cocaïne HCl in 0,9% NaCl (zoutoplossing), de uiteindelijke concentratie te baseren op een injectievolume van 0,1 ml / 10 g lichaamsgewicht (bijvoorbeeld voor een dosis van 5 mg / kg, oplossing concentratie 0,5 mg / ml). Vortex mengsel gedurende 30-45 sec, steriel filter (0,2 um spuit filters) en bewaar bij kamertemperatuur.
- testen
OPMERKING: De initiële testfase loopt gedurende 10-11 opeenvolgende dagen. Muizen ontvangt dagelijks twee studies: gewenning (injectie-vrij) en injectie. Dien zoutoplossing voor de eerste drie tot fonze dagen (zie Lees belang zoutoplossing gewenning) en cocaïne voor de volgende zeven met dezelfde dosis (bijv., 15 mg / kg / dag).- Elke dag acclimatiseren muizen in hun kooien aan de gedrags wachtkamer voor 30 minuten tot 1 uur.
- Bereid clean standaard muis-sized acryl behuizing kooien met een extreem dunne laag vers strooisel (bijvoorbeeld grenen chips), teneinde niet obscure photobeams eventueel (figuur 4C en D).
- Plaats kooien tegen de Y-as van de fotocel rij nabij een uiteinde, zodat vijf bundels gelijke afstand langs zijn lengte. X-as bundels worden niet gebruikt in deze test (figuur 4C en D).
- Neem muizen uit hun huis kooi, in willekeurige volgorde, nekvel en wegen. Verwijder elke muis uit de boot af te wegen door de basis van hun staart (met ondersteuning) en plaats direct in de hun toegewezen bewegingsapparaat kooi. Bedek elke kooi met een standaard filter-top deksel.
- Bereid de individuele spuiten wet zoutoplossing of cocaïne oplossing, zoals beschreven in stap 2.1.7, gebaseerd op de huidige dag lichaamsgewicht. Begin met een dosis van 15 of 20 mg / kg, en te overwegen een tweede experiment met behulp van een hogere of lagere dosis (zie: Lees relevante factoren).
- Zodra gewenning studies hebben beëindigd voor alle kooien, laadt u de injectie programma.
- Een tegelijk, verwijderen muizen uit hun test kooi, nekvel en geven hun injectie (ip). Alvorens terug te keren op de muis om zijn test kooi snel starten het startsein voor die kooi (figuur 5C, onderaan).
- Immers injectie studies hebben beëindigd, terug muizen naar hun kooien en hun huisvesting kamer.
- Desgewenst laat muizen een reeks wachttijden en drugs problemen, zoals de volgende ondergaan: dezelfde dosis als origineel, halve dosis, dubbele dosis vervolgens zoutoplossing, waardoor zeven dagen voor de challenge dezelfde dosis en 6:57 dagen voor elke extra uitdaging. Ongeacht de keuze van uitdagingen maintain soortgelijke wachttijden over cohorten binnen een experiment.
Opmerking: Als de oorspronkelijke dosis hoog is (bijvoorbeeld 30 mg / kg of hoger), moet een dubbele dosis worden overgeslagen of vervangen door een lagere dosis. De zoute uitdaging onthult elke geconditioneerd bewegingsapparaat activering door de cocaïne-gepaarde milieu alleen, en in het proces, de hoeveelheid overgevoelige motoriek die cocaïne-afhankelijke (zie Discussie).
- Statistische analyse
- Kies de gedeelte (n) van elke proef die wordt gebruikt voor analyse. De meeste cocaïne-geïnduceerde motoriek bij knaagdieren plaatsvindt binnen de eerste ~ 15-30 minuten na het injecteren van drugs. Afhankelijk betrokken variabelen, overweeg analyseren cumulatieve beweging voor meerdere tijdvensters (bijvoorbeeld de eerste 15, 30, 60 en / of 120 min) of concentreren op onafhankelijke segmenten van de proef.
- Met behulp van de tijd lijst gekozen, vatten de balk pauzes voor elk dier per dag voor de gewenning en de injectie proeven afzonderlijk en vervolgens eenverage de bedragen voor elke groep. Plot betekent en standaard fouten van het gemiddelde (SEM) in een lijngrafiek over alle dagen. Als behandelingen kunnen veranderen hoe muizen reageren op het geneesmiddel vroeg en / of laat in elke dagelijkse proces, ook plotten gemiddelde groep balk breekt door 5-min bin in de loop van elke dagelijkse proef.
LET OP: in kaart brengen dagelijkse activiteit gemiddelden voor gewenning en injectie trials (bv eerste 15 min) maakt het kunstmatig lijkt erop dat de motoriek wordt getemperd door een zoutoplossing injectie, maar vergeet niet dat de activiteit heeft (waarschijnlijk) weigerde dit niveau aan het eind van gewenning elke dag . - Analyseer opeenvolgende zoutoplossing en behandeling met geneesmiddelen dagen afzonderlijk met behulp van herhaalde metingen (RM) ANOVA's met de within-subjects factor van de dag / tijd en inclusief eventuele tussen-subjects factoren in het ontwerp, zo nodig. Gebruik een t-test of one-way ANOVA met groepsverschillen op dag 1 van cocaïne (acute blootstelling) en een Multivariate ANOVA op de uitdagingen onderzoeken. Indien van toepassing, volgt significance met post-hoc tests of Univariate ANOVA.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Representatieve resultaten van de CPP assay worden getoond in figuur 6 gebruikt wildtype C57BL / 6N muizen ongeveer negen weken. De opzet van het onderzoek was een 2 x 3 gemengd faculteit, met een within-subjects variabele Test (pre en post) en een tussen-subjects variabele van de behandeling (zoutoplossing en cocaïne 5 en 10 mg / kg). Een RM ANOVA toonde een significante interactie tussen test en behandeling (F 2,20 = 3,68, p <0,05), die in plaats van significante hoofdeffecten waargenomen voor beide testen werd uitgelegd (1,20 F = 9,86, p <0,01) en behandeling (F 1,20 = 4,37, p <0,05). Post hoc vergelijkingen toonden dat geen van de groepen van elkaar verschillen in de pre-test. Bij de nameting, de 5 mg / kg en 10 mg / kg niet significant van elkaar verschillen; Maar beide groepen vertoonden significant grotere voorkeur voor cocaïne gepaarde kamer dan saline alleen controlegroep (Tukey's: 5 mg / kg, p <0,5; 10 mg / kg, p &# 60; 0,01). Bovendien Bonferroni post hoc tests is gebleken dat zowel de 5 (p <0,05) en 10 (p <0,05) mg / kg vertoonden grotere voorkeur voor cocaïne gepaarde side in de test vergeleken met pre-test, terwijl de zoute -saline groep toonde geen verandering van pre- naar post-test.
Representatieve resultaten van het bewegingsapparaat assay worden getoond in figuur 7A en B via wild-type C57BL / 6N littermate controlemuizen uit een reeks afzonderlijke experimenten die eerder zijn gepubliceerd 18. Na acclimatisering zoutoplossing injecties gedurende 3-4 dagen, ontvingen de muizen een cocaïne injectie (ip) bij 5, 10, 15 of 30 mg / kg per dag gedurende zeven dagen. Na een zeven of 14 dagen wachttijd, kreeg elke groep een cocaïne uitdaging bij de oorspronkelijke dosis, vervolgens na verdere (variabele) wachttijden, sommige ontvangen extra cocaïne uitdagingen bij andere doses, zoals weergegeven. Ten behoeve van het effect aantonen van cocaïne dosis volgens LOCOMOtor sensibilisatie in de huidige publicatie, de vier verschillende groepen dosis werden gecombineerd in een 4 x 7 mixed-factorial design, met een within-subjects variabele Day (eerste 7 cocaïne injecties) en een tussen-proefpersonen factor van de dosis. Een RM ANOVA toonde een significante interactie tussen dosis en Dag (F 18.276 = 12,53, p <0,0001), die werd geïnterpreteerd plaats significante hoofdeffecten die ook werden waargenomen voor beide Day (F 6276 = 18,25, p <0,0001) en Dose ( F 3,46 = 22,63, p <0,0001). Tukey's post hoc analyses toonden significante algemene verschillen tussen 5 en 15 mg / kg (p <0,0001), 5 en 30 mg / kg (p <0,0001), en 10 en 15 mg / kg (p <0,01). Een aantal significante verschillen waargenomen bij groepen per dag vergeleken. opgemerkt verschillen voor Dag 1 Cocaine (5 versus 30 mg / kg, p <0,01; 10 versus 30 mg / kg, p <0,05; 15 versus 30 mg / kg, p <0,01) en dag 7 Cocaine ( 5 versus 10 mg / kg, p <0,05; 5 versus 15 mg / kg, p <0,0001; 10 vs.. 15 mg / kg, p <0,01; 15 vs 30 mg / kg, p <0,0001). Figuur 7C toont mock figuren die de belangrijkste aspecten van de voortbeweging sensibilisatie dit bedrag behandelingsgroepen verschillen. Hoewel deze functies onafhankelijk hier afgebeeld, is het ook mogelijk om verschillen in combinaties daarvan wordt voldaan.
Figuur 1. Med PC CPP basic sessie controle. (A) Standaard vertoning open pictogram sessie (rode doos) en de dialoog openbare zitting box (inzet). Selecteer "custom filename" en het gebruik van de map venster te navigeren naar de map data en de naam van de sessie. Selecteer de gewenste programma uit de "procedure" drop down lijst. Voor elk vak in gebruik, selectievakje en voer relevante informatie in het onderwerp, experiment, en de groep dozen. (B) Load kamer vertoning, startsignaal icoon (blue box), en stuur tekenal dialoogvenster (inzet). Zodra alle kamer gegevens zijn ingevoerd, selecteert u kamers om te worden geladen en de afgifte van startsignaal. Chambers zal nu worden geactiveerd door beam-break om de sessie timer te starten en het verzamelen van gegevens. (C) Ended sessie display. Zoals elke kamer het aangewezen programma is voltooid, wordt het verzamelen van gegevens gebied (groene doos) statisch en de kamer informatie gebied (oranje doos) zal kamers zien als "gesloten." Klik hier voor een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 2. CPP kamer configuratie. (A) Sample experimentele tijdslijn. Pre-test wordt gevolgd door de dagelijkse afwisselende cocaïne (grijs) en zoutoplossing (wit) conditionering sessies. Post-test wordt uitgevoerd 24 uur na de laatste conditionering sessie. ( B) Open kamerconfiguratie voor gebruik in pre- en post-testsessies. Merk op dat inter-kamer deuren zijn in de verhoogde / open positie. (C) gesloten kamer configuratie voor gebruik in conditionering sessies. Merk op dat handmatige deuren worden verlaagd, zonder toegang tussen de kamers. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 3. Balanced ontwerp berekeningen voor CPP. Voorbeeld voor de berekening en de doelstellingen bij de afweging van de pre-test scores in CPP. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
ig4.jpg "/>
Figuur 4. Locomotorische Chamber Configuration. (A) Outer kamer bestaat uit zwarte ondoorzichtige doos in die de bundel reeks past precies (B). Behuizing / schoenendoos formaat camera's moeten worden gevuld met een dunne laag strooisel (C) en uitgelijnd zodat balken gelijkmatig verdeeld zijn langs de lange as (D). Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 5. Locomotorische Kamer Computer Operation. (A) standaard computerprogramma. Start nieuwe sessie database (blue box en inzet). Hernoemen van bestanden en directory voor elk experiment (blauwe sub-inzet). Maak een nieuwe sessie (rode doos en inzet) met een unieke identifier. Session Edit (rood inzet) en nlter dier identificatie-informatie op het tabblad kamer (groene doos en inzet) en het opzetten van start / stop-besturing voor elk type sessie (oranje doos). (B) Selecteer de gewenste start stop controle voor elk type sessie. Ingesteld interval lengte 300 seconden (bij 5 min bin) en 12 intervallen per fase (voor 1 uur sessie). Voor gewenning sessies (links), zal kamers worden geactiveerd om te starten in unisono (handmatig inschakelen Phase ... Al met Unison) en zal beginnen met het toezicht op activiteit onmiddellijk na de eerste bundel pauze. Voor injectie sessies (rechts), zal kamers individueel worden geactiveerd (handmatig inschakelen Phase ... Individueel Screen toetsen) en zal beginnen met het toezicht op activiteit onmiddellijk na de eerste bundel pauze. Beide types sessie eindigt wanneer de totale fase tijd individueel is verstreken voor elke kamer. (C) Nadat de sessie is gestart, kan gewenning sessies worden gestart door op de knop "start all" (boven). Merk op dat na TriggEring, alle kamers zal wachten voor de eerste bundel pauze om sessie te beginnen. Voor injectiesessies, kan elke kamer worden gestart onafhankelijk (onder). Merk op dat na het triggering afzonderlijke kamers (terwijl het dier is uit kamer voor injectie), de Kamers zal wachten op de eerste bundel pauze om sessie te starten. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 6. Representatieve resultaten CPP. (Top) In CPP, muizen vertoonden significante voorkeur voor een kamer eerder gekoppeld met cocaïne (5 of 10 mg / kg), terwijl muizen die zoutoplossing koppelingen in beide kamers ontvangen preferente niet ontwikkelden. Column afkortingen duiden significant tussen de groepen verschillen ten opzichte van de gelabelde bar ten opzichte van de bekende groep op hetzelfde testen tiik erop. (Onder) Door plotten tijd doorgebracht in cocaïne gepaarde versus zoutoplossing kamers tijdens en na de test, kan verhoging van de cocaïne gepaarde zijde te zien in de 5 en 10 mg / kg groepen die ten koste van de tijd doorgebracht in zowel de zoutoplossing gekoppeld en midden kamers. Daarentegen waren er geen opvallende verschillen in tijd doorgebracht in elke kamer tussen vóór en na de test in het zoute controlegroep. De gegevens gepresenteerd als gemiddelde ± SEM. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 7. Representatieve resultaten locomotorische overgevoeligheid (A) Cumulatieve bundel onderbrekingen voor de eerste 20 minuten van elke dagelijkse proef voor vier afzonderlijke doses. 5, 10, 15 en 30 mg / kg in wild-type muizen gevolgd door hetzelfde-, half- , dubbele dosis van eend zoutoplossing uitdagingen, gewijzigd ten opzichte van (18). Alle groepen kregen dezelfde dosis uitdagingen één (10, 15, 30 mg / kg) of twee (5 mg / kg) weken na de laatste blootstelling cocaïne. Sommige groepen ontving verdere uitdagingen, die werden uitgevoerd bij variabele wachttijden. (B) perceel van het bewegingsapparaat data (balk pauzes) samengevat door 5-min bin voor de dagelijkse proeven tijdens de 15 mg / kg cocaïne sensibilisatie experiment. (C) Illustraties met verschillen in het bewegingsapparaat sensibilisatie voor twee behandelingsgroepen die voornamelijk worden gedreven door (links) acute cocaïne reactie verschillen, (midden) een sensibilisatie snelheid verschil of (rechts) verschillen in maximale sensibilisatie. De gegevens gepresenteerd als gemiddelde ± SEM. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Dit protocol toont werkwijzen voor geconditioneerde plaatsvoorkeur en bewegingsapparaat sensibilisatie, die elk de gemiddelde lab kan worden gebruikt om aspecten van geneesmiddelgeïnduceerde behavioral plasticiteit beoordelen. Zoals bij de meeste gedragstesten, er aanvullende overwegingen verdient, naast de normale protocol. Eerste, elk van deze technieken kunnen worden opgevat als met twee fasen, inductie en expressie. "Inductie" omvat de ontwikkeling van het gedrag-van CPP dit tijdens conditioneren en het sensibiliserende is de eerste periode (gewoonlijk opeenvolgend) blootstelling aan geneesmiddelen. "Expressie" van CPP is de nameting, terwijl voor sensibilisatie kan worden gedefinieerd als een geneesmiddel uitdaging die hetzij na stoppen of eenvoudig als laatste opeenvolgende belichting.
Het is de moeite waard om het beperken van manipulaties te overwegen om een van deze fasen ten opzichte van de andere om hun potentiële effecten beter te ontleden. Virussen met tijdelijk beperkte effectiviteit (bijvoorbeeld HSV) of geneesmiddel co-administraties / voorbehandelingen (bijvoorbeeld agonisten / antagonisten) zijn bruikbaar in dergelijke inspanningen. Bij deze benadering, kan het verder noodzakelijk om gecomprimeerde protocollen zodat een bepaalde fase beter zal samenvallen met viraal expressiesysteem. Voor CPP is het mogelijk om een tweedaagse conditioneringmethode voeren, zoals we eerder 37 beschreven. Speciaal voor bewegingsapparaat sensibilisatie, kunnen veranderingen in de wachttijd tussen inductie en expressie in combinatie met deze methoden, processen die betrokken zijn bij het onderhoud of de stabiliteit van het gedrag bloot te leggen. Bovendien kunnen dergelijke benaderingen worden gebruikt om het fenomeen van de overgevoeligheid, waarbij een lichtgevoelig gedrag geïnduceerd via een geneesmiddel maar door blootstelling aan een ander geneesmiddel worden uitgedrukt bestuderen. Aangezien de overgevoeligheid treedt niet tussen alle sensibiliserende drugs kan een gevoelig gedrag dat enigszins afwijkt van de oorspronkelijke wekken, en niet noodzakelijk bidirectioneeleen bepaalde set van drugs, kan haar onderzoek unieke kansen om te begrijpen waar en hoe verschillende drugs beïnvloeden plasticiteit van het brein en de functie aan te bieden.
De juiste interpretatie van de CPP, in het bijzonder, hangt af van het uitsluiten van alternatieve verklaringen van de bevindingen. Gegenereerde gegevens in een drie-chambered apparaat moet verder worden onderzocht voordat het definiëren van aftrek van de tijd doorgebracht in de zoutoplossing gepaarde kant van de cocaïne-gepaarde kant aan post-test als de voorkeur, omdat een toename van een voorkeur voor de drug-gepaarde kant die resulteert uitsluitend uit een daling van de tijd doorgebracht in de zoutoplossing gepaarde kamer is waarschijnlijk niet geschikt voor een dergelijke interpretatie. De middelste kamer laat voor dit resultaat, omdat de muis kan tijde wijzigen doorgebracht in plaats van de drug-gepaarde kamer. Het is ook mogelijk verhoogde tijd doorgebracht in de geneesmiddel gepaarde kant ten koste van de middelste kamer in plaats van de zoutoplossing gepaarde side nemen; misschien wel, kan dit resultaat nog steeds acceptabel uitleggingted als een toename in drug voorkeur. De opname van derde compartiment verschaft een neutrale kamer die onpartijdige plaatsing van het dier laat tijdens en na de testsessies 41. Hoewel nuttig voor adressering initiële positie spant dragen tot testdagmodel scores, wordt de derde kamer niet vereist voor het conditioneren. Alternatieve CPP ontwerpen die twee afzonderlijke compartimenten of een enkele ruimte met gevarieerde stimulus configuraties voorzien worden elders 41-42 besproken.
Een eventueel tekort in plaats voorkeur voor een geneesmiddel moet ook gepaard gaan met beoordeling van zowel het vermogen om contextueel verenigingen en algemene beloning functie te leren. Er zijn een aantal aanpassingen die kunnen worden aangebracht in het CPP paradigma dat kan aide bij de interpretatie van veranderde voorkeur, zoals modificeren van de opvallendheid van de UCS (geneesmiddel) door het verhogen (of verlagen) van het aantal paren of door hogere of lagere geneesmiddel dosis. CPP kan worden uitgevoerd met behulp van verteerbaar food (bijvoorbeeld hoog vetgehalte, sucrose) of sociale interacties om te beoordelen of de waargenomen veranderingen is specifiek voor drug of natuurlijke beloningen van belang is; non-CPP benaderingen nuttig is voor dit doel omvatten intracraniële zelfstimulatie, sucrose voorkeur, en / of appetitive benadering taken. Echter, al deze opties variëren in hun vermogen om op adequate wijze de gewenste vraag. Voedsel op basis van CPP bijzonder vruchtbaar kan zijn, omdat de normale reacties tonen een vermogen om te leren en vorm er passende contextuele associaties met een natuurlijke beloning. Extra controles voor de beoordeling van leervermogen onder andere taken die een beroep doen op contextueel leren / geheugen (contextuele angst conditionering en CPA). CPA heeft het voordeel dat vergelijkbaar met CPP werking, vaak in dezelfde kamers, vervanging van de appetitive geneesmiddel met een aversieve ervaring (bijvoorbeeld lithiumchloride injectie). Dieren die tekorten in CPP, maar normaal CPA vertonen, tonen een vermogen om de nodige contextuele vereniging vormens, wat aangeeft dat de bijzondere waardeverminderingen in drug CPP hoogstwaarschijnlijk betrekking hebben te belonen (drug-specifiek of anderszins). Een waarschuwing voor de CPA gebruiken lithium chloride te onderzoeken, is de vraag of deze drug is een bekende behandeling voor een aandoening die kan worden gemodelleerd door de proefdieren. Zo is lithiumbehandeling aangetoond dat tekorten leren tegen in het muismodel van fragiele X 43, waarop deze besturingswerkwijze zou verwarren.
Naast de klassieke CPP paradigma er mogelijke uitbreidingen gebruikers nuttig, zoals het testen uitsterven van de geleerde drug-context vereniging en herstel na CPP. Geconditioneerde responsen (CR), eenmaal vastgesteld, kan worden gehandhaafd voor langere perioden 19,20 wanneer de dieren ongestoord worden gelaten. Ondanks de relatieve persistentie van de CR, kan effectief worden gedoofd door herhaalde presentaties van de CS (context) bij afwezigheid van de UCS (drug). Twee CPP uitsterven methoden verschijnen in de literature: herhaalde testen blootstelling zonder injectie 21 of re-paringen van de eerder drug gekoppeld aan zij met het voertuig 22. Extinction processen weerspiegelen het nieuwe leren, in tegenstelling tot "afleren" van de oorspronkelijke airconditioning, een idee daadwerkelijk aangetoond door middel van "herstel." Herplaatsing is klassiek veroorzaakt door re-blootstelling aan de UCS, die het herstel van de CR produceert. In de context van CPP, zal een enkele injectie van het geneesmiddel veroorzaken training dieren plaatsvoorkeur tonen. Interessant vele niet-training drug signalen kunnen ook herstel van CPP, waaronder priming met alternatieve geneesmiddelen en 22 verschillende stressoren 23-26. Uitsterven en herstel experimenten zijn van bijzonder belang voor het gebied drugsverslaving als modellen van de behandeling met geneesmiddelen en terugval. Interventies die de snelheid van uitsterven te verbeteren en / of de omvang van het herstel te verminderen kan zijn waardevolle doelwitten voor menselijke pharmacotherapies.
(bv, 27-29). Met name heeft echter contextonafhankelijke sensibilisatie duidelijk aangetoond in andere studies (bijvoorbeeld 30-32). Experimentele details die kunnen bijdragen of een context-afhankelijke toename van sensibilisatie waarneembaar omvatten drug dosis, duur van de blootstelling, of een groep worden vervoerd voor de test of sensibilisering en bepaalde aspecten van pre-blootstelling aan de testkamer; Echter, deze gegevens blijft enigszins onduidelijk. Een methode voor het bepalen van de bijdrage van contextuele sensibilisatie is om een zoutoplossing uitdaging geven volgende drug overgevoeligheid 33. Het gebruik van de beschreven paradigma minimaliseert de bijdrage van context-afhankelijke overgevoeligheid zoals blijkt uit weinig locomotorische activiteit in eerdere studies bij saline uitdaging. De contextuele bijdrage aan sensibilisatie is beoordeeld in een aantal kranten, vaak met inbegrip van de besprekingen van andere dan bewegingsactiviteit 34 gedrag.
Om verontreiniging door drugs geïnduceerde activatie en sensitisatie van de locomotorische stimulerende effecten geïnduceerd door een nieuwe omgeving te beperken, worden muizen gewend aan zoutoplossinginjecties drie tot vier dagen in het begin van elk experiment. Zoals te zien in figuur 7, muizen vertonen meestal beperkte beweging tussen de eerste enlaatste zoutoplossing acclimatisatie dag. Bovendien, de muizen aanmerkelijk rustiger en gemakkelijker te hanteren en injecteren van de laatste zoutoplossing belichting. Vorige werken zijn meerdere stammen en genotypes van muizen met behulp van dit paradigma getest en zie niet veel verschil in een zoutoplossing acclimatisering activiteit over hen; het is echter mogelijk om af te observeren sterke hyperactiviteit fenotypen geassocieerd met bepaalde genotypen die niet overwonnen worden met deze methode. In deze gevallen kan het wenselijk zijn om meerdere zoutoplossing acclimatisatie dagen uitgevoerd (tot voortbeweging plateaus in de hyperactieve groep) en normaliseren van de hyperactieve groep met de controlegroep met de laatste dag saline injectie data. Hoewel niet ideaal, het zorgt voor een redelijke vergelijking van de effecten van een geneesmiddel op beweging tussen deze groepen. Andere opties die extreme hyperactiviteit kan verminderen moeten de proef lengte gewenning vóór injectie per dag uitstrekken door één tot 5 uur, en / of gebruik langere injectie trials (2-4 uur) each dag.
Er zijn aanvullende overwegingen die belangrijk zijn voor de interpretatie van het bewegingsapparaat gedrag. Zoals weergegeven in figuur 7C, kan verschillen waargenomen groep primair gedreven door verschillen in de acute motorische respons, de mate van sensibilisatie over dagen, de maximale grens van sensibilisatie, of een combinatie van deze factoren. Ontleden van de bijdragen van deze factoren afzonderlijk kan nuttig zijn. Daartoe de acute motorische respons kan alleen statistisch geanalyseerd. Dan is de snelheid van de sensibilisatie kan worden beoordeeld met behulp van een programma dat in staat is curve fitting en een normalisatieproces tarief dat elke acute bewegingsapparaat verschillen kortingen. Veranderde maximale sensibilisatie wordt meestal geopenbaard in een RM ANOVA over de opeenvolgende blootstelling aan het geneesmiddel dagen, waar de follow-up van dag tot dag post-hoc vergelijkingen zijn significant op dagen nadat de groep reacties zijn plateaued. Men moet zich ervan bewust dat de maximale sensibilisatie niet kan worden bepaaldvoor alle groepen die een lineaire bewegingsapparaat respons over blootstelling aan het geneesmiddel dagen, zoals afgebeeld in figuur 7C onderhoudt (middelste, blauwe lijn). In dat geval kan blootstelling aan het geneesmiddel worden verlengd om te proberen en te bepalen maximale sensibilisatie.
Tenslotte is doorgaans het meest sensibilisatie vergelijking tussen groepen die ten minste twee primaire drug doses uitgevoerd in afzonderlijke cohorten dieren. Verschillen in een van de bovenstaande aspecten van de voortbeweging activering met één dosis of beide, worden gebruikt voor verdere tests begeleiden naar sluiten andere verklaringen, met inbegrip van wijzigingen in de ontwikkeling van stereotypie. Herhaalde blootstelling aan bepaalde drugs, zoals cocaïne en amfetamine produceert niet alleen gesensibiliseerde beweging op een dosis-afhankelijke manier, maar ook sensibiliseert concurrerende stereotype gedrag. Deze stereotiep geworden bijzonder openlijke bij hoge doses, zodat bewegingsapparaat sensibilisatie is vaak geheel of gedeeltelijk verduisterd, maar bleek opnieuw na toediening vaneen lagere dosis. Daarom kan een "tekort" in locomotorische sensibilisatie in een experimentele groep eigenlijk tijdens verhoogde gevoeligheid voor het geneesmiddel-geïnduceerde ontwikkeling van stereotypieën. De beoordeling van stereotypy kan lastig zijn, maar er zijn een aantal gepubliceerde tabellen 35 en 36 andere benaderingen. Met behulp van zowel een algemene stereotypy schaal en een beoordeling van specifiek gedrag is aan te bevelen, zoals eerder 18 gepubliceerd.
Tot slot is een aantal gedragstesten ontwikkeld in diermodellen in een poging om de complexiteit van de menselijke verslaving ontleden. Geconditioneerde plaats voorkeur en bewegingsapparaat sensibilisatie zijn twee proeven op grote schaal gebruikt bij knaagdieren en, respectievelijk, kunnen zij bijzonder nuttig zijn bij de beoordeling van de vroege-drug verbonden beloning en de aanhoudende plasticiteit veroorzaakt door herhaald gebruik zijn. Er zijn een aantal overwegingen voor het ontwerp en de interpretatie van elk type onderzoek, waardoor het WORthwhile zorgvuldig overwegen de experimentele doelen en eerdere literatuur bij de planning van deze evaluaties.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
De auteurs verklaren dat ze geen concurrerende financiële belangen.
Acknowledgments
De auteurs danken Karen Dietz en Shari Birnbaum voor eerdere ingang op gedrags- ontwerp overwegingen en Lauren Peca voor hulp bij gedrags-testen. De auteurs ook de genereuze steun van de Simons Foundation (Simons Foundation Autism Research Initiative subsidie aan CWC), NIDA (DA008277, DA027664 en DA030590 om CWC, F32DA027265 tot LNS en F32DA036319 RDP), de FRAXA Research Foundation en Eleanor en Miles erkennen Shore Fellowship Program (fellowship steun aan LNS), en de John Kaneb Fellowship Program (fellowship ondersteuning van MT).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Cocaine Hydrochloride USP | Mallinckrodt Pharmaceuticals | 0406-1520 | Purchase and use (Schedule II controlled substance) for research purposes requires compliance and licensure according to state and federal law. |
| Conditioned Place Preference, Three Compartment Apparatus with Manual Doors and Lights for Mouse | Med-Associates Inc. | MED-CPP-MS & MED-CPP-3013 | Our laboratory has used these boxes; however, many alternative boxes are available & acceptable. |
| PAS-Home Cage Activity Monitoring Photobeam Arrays | San Diego Instruments | 2325-0223 & 7500-0221 | Our lab houses these arrays inside of custom built chambers, as described in the text. There are alternatives available. |
| Disposable Sani-Cloth disenfecting wipes | PDI | 13872 |
References
- National Institute on Drug Abuse. Drug Facts: Understanding Drug Abuse and Addiction. www.drugabuse.gov. , Available from: http://www.drugabuse.gov/publications/drugfacts/understanding-drug-abuse-addiction (2012).
- Kasanetz, F., et al. Transition to addiction is associated with a persistent impairment in synaptic plasticity. Science. 328 (5986), 1709-1712 (2010).
- Beach, H. D.
- van der Kooy, D. Chapter 13, Place Conditioning: A simple and effective method for assessing the motivational properties of drugs. Methods of Assessing the Reinforcing Properties of Abused Drugs. Bozarth, M. A. , 229-240 (2012).
- Carlezon, W. A. Place conditioning to study drug reward and aversion. Methods Mol Med. 84, 243-249 (2003).
- Prus, A. J., James, J. R., Rosecrans, J. A. Chapter 4, Conditioned Place Preference. Methods of Behavior Analysis in Neuroscience. Buccafusco, J. J. , (2009).
- Tzschentke, T. M. Measuring reward with the conditioned place preference (CPP) paradigm: update of the last decade. Addict Biol. 12 (3-4), 227-462 (2007).
- Aguilar, M. A., Rodrìguez-Arias, M., Miñarro, J. Neurobiological mechanisms of the reinstatement of drug-conditioned place preference. Brain Res Rev. 59 (2), 253-277 (2009).
- Feduccia, A. A., Duvauchelle, C. L. Novel apparatus and method for drug reinforcement. JoVE. (42), (2010).
- Brabant, C., Quertemont, E., Tirelli, E. Influence of the dose and the number of drug-context pairings on the magnitude and the long-lasting retention of cocaine-induced conditioned place preference in C57BL/6J mice. Psychopharmacology. 180 (1), 33-40 (2005).
- Pliakas, A. M., Carlson, R. R., Neve, R. L., Konradi, C., Nestler, E. J., Carlezon, W. A. Altered responsiveness to cocaine and increased immobility in the forced swim test associated with elevated cAMP response element-binding protein expression in nucleus accumbens. J Neurosci. 21 (18), 7397-7403 (2001).
- Knackstedt, L. A., Samimi, M. M., Ettenberg, A. Evidence for opponent-process actions of intravenous cocaine and cocaethylene. Pharmacol Biochem Behav. 72 (4), 931-936 (2002).
- Post, R. M., Rose, H. Increasing effects of repetitive cocaine administration in the rat. Nature. 260 (5553), 731-732 (1976).
- Marin, M. T., Cruz, F. C., Planeta, C. S. Cocaine-induced behavioral sensitization in adolescent rats endures until adulthood: lack of association with GluR1 and NR1 glutamate receptor subunits and tyrosine hydroxylase. Pharmacol Biochem Behav. 91 (1), 109-114 (2008).
- Henry, D. J., White, F. J. The persistence of behavioral sensitization to cocaine parallels enhanced inhibition of nucleus accumbens neurons. J Neurosci. 15 (9), 6287-6299 (1995).
- Hope, B. T., Simmons, D. E., Mitchell, T. B., Kreuter, J. D., Mattson, B. J. Cocaine-induced locomotor activity and Fos expression in nucleus accumbens are sensitized for 6 after repeated cocaine administration outside the home cage. Eur J Neurosci. 24 (3), 867-875 (2006).
- Shuster, L., Yu, G., Bates, A. Sensitization to cocaine stimulation in mice. Psychopharmacology. 52 (2), 185-190 (1977).
- Smith, L. N., Jedynak, J. P., Fontenot, M. R., Hale, C. R., Dietz, K. C., Taniguchi, M., Thomas, F. S., Zirlin, B. C., Birnbaum, S. G., Huber, K. M., Thomas, M. J., Cowan, C. W. Fragile X mental retardation protein regulates synaptic and behavioral plasticity to repeated cocaine administration. Neuron. 82 (3), 645-658 (2014).
- Mueller, D., Stewart, J. Cocaine-induced conditioned place preference: reinstatement by priming injections of cocaine after extinction. Behav Brain Res. 115 (1), 39-47 (2000).
- Sakoori, K., Murphy, N. P. Maintenance of conditioned place preferences and aversion in C57BL6 mice: effects of repeated and drug state testing. Behav Brain Res. 160 (1), 34-43 (2005).
- Bardo, M. T., Neisewander, J. L., Miller, J. S. Repeated testing attenuates conditioned place preference with cocaine. Psychopharmacologia. 89 (2), 239-243 (1986).
- Itzhak, Y., Martin, J. L. Cocaine-induced conditioned place preference in mice: induction, extinction and reinstatement by related psychostimulants. Neuropsychopharmacology. 26 (1), 130-134 (2002).
- Kreibich, A. S., Blendy, J. A. cAMP response element-binding protein is required for stress but not cocaine-induced reinstatement. J Neurosci. 24 (30), 6686-6692 (2004).
- Briand, L. A., Blendy, J. A. Not all stress is equal: CREB is not necessary for restraint stress reinstatement of cocaine-conditioned reward. Behav Brain Res. 246, 63-68 (2013).
- Redila, V. A., Chavkin, C. Stress-induced reinstatement of cocaine seeking is mediated by the kappa opioid system. Psychopharmacology. 200 (1), 59-70 (2008).
- Do Couto, R. ibeiro, Aguilar, B., A, M., Manzanedo, C., Rodriguez-Arias, M., Armario, A., Minarro, J. Social stress is as effective as physical stress in reinstating morphine-induced place preference in mice. Psychopharmacology. 185 (4), 459-470 (2006).
- Post, R. M., Lockfeld, A., Squillace, K. M., Contel, N. R. Drug-environment interaction: context dependency of cocaine-induced behavioral sensitization. Life sciences. 28 (7), 755-760 (1981).
- Badiani, A., Browman, K. E., Robinson, T. E. Influence of novel versus home environments on sensitization to the psychomotor stimulant effects of cocaine and amphetamine. Brain Res. 674 (2), 291-298 (1995).
- Li, Y., Acerbo, M. J., Robinson, T. E. The induction of behavioural sensitization is associated with cocaine-induced structural plasticity in the core (but not shell) of the nucleus accumbens. Eur J Neurosci. 20 (6), 1647-1654 (2004).
- Partridge, B., Schenk, S. Context-independent sensitization to the locomotor-activating effects of cocaine. Pharmacol Biochem Behav. 63 (4), 543-548 (1999).
- Le Foll, B., Diaz, J., Sokoloff, P. Increased dopamine D3 receptor expression accompanying behavioral sensitization to nicotine in rats. Synapse. 47 (3), 176-183 (2003).
- Heidbreder, C. A., Babovic-Vuksanovic, D., Shoaib, M., Shippenberg, T. S. Development of behavioral sensitization to cocaine: influence of kappa opioid receptor agonists. J Pharmacol Exp Ther. 275 (1), 150-163 (1995).
- Tirelli, E., Michel, A., Brabant, C. Cocaine-conditioned activity persists for a longer time than cocaine-sensitized activity in mice: implications for the theories using Pavlovian excitatory conditioning to explain the context-specificity of sensitization. Behav Brain Res. 165 (1), 18-25 (2005).
- Anagnostaras, S. G., Schallert, T., Robinson, T. E. Memory processes governing amphetamine-induced psychomotor sensitization. Neuropsychopharmacology. 26 (6), 703-715 (2002).
- Spangler, R., Zhou, Y., Schlussman, S. D., Ho, A., Kreek, M. J. Behavioral stereotypies induced by 'binge' cocaine administration are independent of drug-induced increases in corticosterone levels. Behav Brain Res. 86 (2), 201-204 (1997).
- Kelley, A. E. Measurement of rodent stereotyped behavior. Curr Protoc Neurosci. Chapter 8, Unit 8.8 (2001).
- Taniguchi, M., Carreira, M. B., Smith, L. N., Zirlin, B. C., Neve, R. L., Cowan, C. W. Histone deacetylase 5 limits cocaine reward through cAMP-induced nuclear import. Neuron. 73 (1), 108-120 (2012).
- Zangen, A., Solinas, M., Ikemoto, S., Goldberg, S. R., Wise, R. A. Two brain sites for cannabinoid reward. J Neurosci. 26 (18), 4901-4907 (2006).
- Huston, J. P., de Souza Silva, M. A., Topic, B., Müller, C. P. What's conditioned in conditioned place preference. Trends Pharmacol Sci. 34 (3), 162-166 (2013).
- Schechter, M. D., Calcagnetti, D. J. Trends in place preference conditioning with a cross-indexed bibliography; 1957-1991. Neurosci Biobehav Rev. 17, 21-41 (1993).
- Bevins, R. A., Cunningham, C. L. Chapter 9, Place Conditioning: A Methodological Analysis. Tasks and Techiniques: A sampling of methodologies for the investigation of animal learning, behavior, and cognition. Anderson, M. , 99-110 (2006).
- Hitchcock, L. N., Cunningham, C. L., Lattal, K. M. Cue configuration effects in the acquisition of a cocaine-induced place preference. Behav Neurosci. 128 (2), 217-227 (2014).
- Liu, Z. -H., Chuang, D. M., Smith, C. B. Lithium amerliorates phenotypic deficits in a mouse model of fragile X syndrome. Int J Neuropscyhopharmacol. 14 (5), 618-630 (2011).
- Bardo, M. T., Rowlett, J. K., Harris, M. J. Conditioned place preference using opiate and stimulant drugs: A meta-analysis. Neurosci Biobehav Rev. 19 (1), 39-51 (1995).
