Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Behavior
Click here for the English version

Behavior

Vurdering av kokain-indusert Behavioral sensibilisering og kondisjonerte sted Preference i Mus

Published: February 18, 2016 doi: 10.3791/53107
Automatic Translation
*1, *1, 1, 1
1Department of Psychiatry, Harvard Medical School, McLean Hospital
* These authors contributed equally

Protocol

Alle eksperimentelle prosedyrer har blitt godkjent av McLean Hospital Institutional Animal Care og bruk komité. MERK: Følgende protokoll beskriver en enkel tilnærming til CPP og lokomotorisk sensibilisering, mange detaljer som er forskjellige fra andre vellykkede protokoller (for eksempel lys- vs. mørke-fase testing, suksessiv sammenlignet med periodisk dosering, etc.). Nybegynnere kan ønske å begynne med disse protokollene, eller bare bruke dem som guider, tilpasse endringer fra litteraturen basert på eksperimentelle spørsmål (ene) for hånden. Automatiserte målemetoder er beskrevet; Det er imidlertid mulig å bruke ikke-automatisert middel for hver analyse (dvs. video-opptak, hånd-scoring).

1. kondisjonerte sted Preference

  1. Utstyr og Room Set-Up:
    1. Håndtak eksperimentelle mus i 1-3 minutter hver dag, i minst 3-5 dager før testing.
      MERK: Du må aldri håndteres mus kan finne fjerning fra kammeret stressful, som kan forstyrre eller endre condition.
    2. Skaff fire eller flere tre-kamret CPP apparater, gjerne utstyrt med photobeams for automatisert datainnsamling 18. Pass på at hvert kammer har to større, visually- og tactilely-distinkte kamre å koble til et mindre, nøytral kammeret via dører som kan heves / senkes for å kontrollere tilgang. Lokk på hvert kammer bør åpne for innsetting / fjerning av mus og monteres med små, individuelt kontroller (dimmes) lys (ett per kammer).
      MERK: CPP kammer design varierer, og kan kjøpes kommersielt eller konstruert av forskere. For "balansert" design, er en anbefalt ordningen en større kammer med hvite vegger og trådnett gulv og det andre med sorte vegger og bar gulv. Den midterste kammeret bør ha grå vegger og solid grå Plexiglass gulv. For forklaringsformål, vil disse kamre bli referert til som "hvite", "sort" og "midtre".Lokk bør være klart pleksiglass. Alternative kupé konfigurasjoner (ett- eller to-kammer) er også mulig og diskutert andre steder (se diskusjon).
    3. Oppsett rommet som det vil være under testing: slå av eller satt indirekte lys til dimmest innstillingen og lukke døren. Bruk en lys meter inne hvert kammer og sette lokket lysene slik at middel kamre er litt lysere (15-20 lux) enn svart og hvitt kamre (6-10 lux) for å hindre mus fra å tilbringe tid der.
      MERK: Hvis gjennomsnittlig tid brukt i midten er like mye eller mer enn i de svarte eller hvite kamre, ytterligere øke belysningen kontrast beskrevet i trinn 1.1.3. Alternativt kan du bruke mindre tiltalende gulv for midten. (F.eks ~ 220 0,5 cm diameter hull, jevnt fordelt på 6 x 3,5 x ¼ "PMMA), men unngå å gjøre dette kammeret motvilje. Pilot noen endringer for å sikre at reduksjon i midten tid er ikke på grunn av nedgang i totalt antall undersøkelser (kryssinger) .
    4. Program automatisert innsamling av data ( "prosedyre," figur 1A) eller manuelt samle inn data i henhold til de følgende parametre. Sett forsøk å starte på den første strålen pause i enten conditioning kammeret. Sett "test" økter for å være 20 min i lengde og for å spore tidsbruk og strålebrudd i hvert kammer. Sett "condition" økter for å være 30 minutter lang og (eventuelt) for å måle strålebrudd i hvert kammer. Sett alle kammer lys for å belyse under rettssaken.
    5. Fremstille hele volumet av kokain som er nødvendig for forsøket for hånden. Oppløs kokain HCl i 0,9% NaCl (saltløsning), basere den endelige konsentrasjonen på et injeksjonsvolum på 0,1 ml / 10 g kroppsvekt (f.eks, for en dose på 5 mg / kg, er løsningskonsentrasjon 0,5 mg / ml). Vortex blandingen i 30-45 sek, sterilt filter (0,2 mikrometer sprøytefilter) og oppbevar ved romtemperatur.
  2. testing:
    MERK: Den generelle tidslinjen for CPP er PRE-TEST, condition, ogderetter POST-TEST. Den pre-test kan skilles fra condition av 1-3 dager; Men condition og post-test dagen bør finne sted på påfølgende dager (Figur 2A). Dette tidspunkt holdes den samme for alle kullene i det samme eksperiment.
    1. Test under dyrenes lette fase ved hjelp av det samme apparat for hvert dyr på tvers dager.
    2. Hver prøve dag (dvs. tester og condition dager), flytt mus til atferds forværelse og tillate dem å sitte uforstyrret i hjem bur for 1-1,5 timer før rettssaken. Velg et sted der mus kan flyttes raskt fra buret til apparatet, med minimale forstyrrelser, når rettssaken begynner. Slå på alt utstyr slik at eventuelle lyder knyttet til testen (f.eks utstyr fans) er til stede.
    3. Rengjør hvert apparat (innvendige vegger, gulv og skuffer) med mild, alkohol-, glykoleter eller ammoniakk-baserte desinfiserende våtservietter før og etter hver mus (bruk same type rengjøringsmiddel gjennom hele forsøket). Ikke overse gulv under.
    4. Sjekk at rommet lysene er riktig angitt (av eller nedtonet) i begynnelsen av hver dag.
    5. Fortsett med følgende avhengig av om det er en "test" eller "condition" dag:
      1. På Trial dag 1 og 6 (dvs. pre- og post-tester), plasserer den inter-kammer dører i åpen stilling (figur 2B).
      2. Last "test" dataprogram og skriv dyre IDer (figur 1A), deretter utstede starte kommandoen (figur 1B), hvis det er aktuelt.
      3. Forsiktig nedre hver mus inn i det midtre kammer av den tilordnede apparat, som vender mot bakveggen, og mykt lukke lokket. Når alle kamrene er lastet, la i testingen rommet og redusere støy.
      4. La mus inne hvert apparat til studier for alle mus har lukket / avsluttet (figur 1C). Export studiedata.
      6. <li> Like før eller etter pre-testen, veie dyrene. Bruk disse vekter for doseberegninger under condition.
    6. For å forberede seg condition studier beregne hver mus pre-test "preferanse" for de svarte og hvite kamre ved å trekke tid brukt i hver av disse fra den andre (dvs. "svart minus hvit" og "hvit minus svart", se Figur 3, Columns 9 og 10).
    7. Siden mus med sterke startinnstillingene gjør balansering vanskelig, etablere en akseptabel grense for preferanse score (for eksempel <33% av total prøve tid) og inkluderer mus som overstiger den fra beregninger. Bruk en liberal grense (<66% av total prøve tid) for å maksimere inkludering når avgang er sannsynlig etter testingen er ferdig (f.eks på grunn av off-target kirurgiske manipulasjoner).
      MERK: Mus som overskrider grensen kan fortsatt bli testet, med et forsøk på å holde sine pre-test preferanser balansert. Senere, these mus kan ekskluderes fra analysen, om nødvendig, for å balansere pre-testresultater. Hvis ekstreme pre-test skjevheter (dvs.> 800 sek) uforholdsmessig påvirke en gruppe, kan du vurdere å endre condition miljøer og / eller ved hjelp av andre analyser.
    8. Velg svart eller hvit kammer som narkotika-sammenkobling kammer for hver mus, i mellomtiden å summere de tilsvarende pre-test preferanse score innenfor hver gruppe med følgende prioriteringer i tankene:
      MERK: Pass på å balansere score mellom grupper innenfor hver årsklasse samt over noen tidligere kull.
      1. Gjør summene for alle grupper som tilsvarende som mulig.
      2. Gjør summene så nær null som mulig (dvs. velge foretrukket side for noen mus og den ikke-foretrukne side for andre). Hvis en nær null sum er umulig for en gitt gruppe, re-justere alle andre være svært lik den best oppnåelige poengsum for å begrense gruppen, favoriserer litt negativ gruppe oppsummerer løpetpositiv.
      3. Så mye som mulig, holde oppdrag av svart kontra hvit og foretrukne versus ikke-foretrukne kamre for narkotika motstandere selv innenfor hver gruppe.
      4. Som det er ikke alltid mulig å møte de ovennevnte mål, korrigere eventuelle avvik ved å gjøre opposisjon balansere hensynene i senere kohorter; men prøv å unngå å produsere kohorter med vilt forskjellige gjennomsnitts pre-test preferanser.
    9. På Produkter dager 2-5, plasserer inter-kammer dører i lukket stilling (figur 2C).
    10. Forbered forskjellige sprøyter med kokain (Dager 2 og 4) eller saltvann (dag 3 og 5) løsning, som beskrevet i trinn 1.1.5 og basert på kroppsvekt målt ved pre-test.
      MERK: Dose bør velges med hensyn til eksperimentelle forventninger, hensyn som er nevnt i innledningen, og potensielle gulv og tak effekter. Det er ofte best å utføre uavhengige eksperimenter ved bruk av minst to forskjellige doser.
    11. Load "cdyre IDer onditioning "dataprogram og Enter (Figur 1a), deretter utstede starte kommandoen (figur 1B), hvis det er aktuelt.
    12. Scruff og injisere hver mus (ip), umiddelbart senke dem i riktig sort eller hvit kammer av sine tildelte apparat mot bakveggen, så sakte lukker lokket. Når alle kamrene er lastet, la i testingen rommet og redusere støy.
    13. Fjern mus fra sitt kammer som nær til nøyaktig 30 min som mulig (dvs. at den første mus fjernet fra sitt kammer, mens andre mus fremdeles condition). Fjern dyr så stille som mulig, uten å innføre støy.
  3. Statistisk analyse:
    1. Velge en metode for analyse. Enten subtrahere tid brukt på saltvann-paret side under post-test fra tid brukt på kokain-paret side under post-test (kokain - saltvann, sek) eller bruke tid brukt i den post-test narkotika-paret kammerminus pre-test tid brukt på narkotika-paret kammeret.
      MERK: Hvis du bruker den første metoden, også plottet linje grafer av gjennomsnittlig tid brukt på midten, saline- og narkotika paret kamre under pre-og post-tester for hver gruppe. Sammenlignet med pre-test, skal posttest viser økt tid i narkotika-paret side og redusert tidsbruk i saltvann-paret side (se figur 6, bunnen og diskusjon for forklaring).
    2. Avhengig av art og antall grupper som sammenlignes, må du bruke en t-test, en-eller to-veis ANOVA, som hensiktsmessig, muligens med post-hoc analyse, for å analysere noen av de oven presenteres subtraksjon score.
      MERK: Kokain preferanse score tendens til å være variabel, og dessuten kan være negativ (dvs. indikere aversjon mot stoffet sammenkoblet side). Mus som viser aversjon bør ikke fjernes (med mindre de er statistiske utliggere), siden dette resultatet er normal og sannsynligvis viktig for å bestemme forskjeller mellom groups. Forventer å trenge prøvestørrelser på 12 til 30 dyr per gruppe, avhengig av effekten størrelsen av behandlingen.

2. Locomotor Sensibilisering

  1. Utstyr og Room Set-Up
    1. Skaff en 4 x 8 (X x Y) photobeam utvalg (ytre mål 11,5 "x 20"). Konstruer en åpen toppet kammer laget av svart Pleksiglass (indre dimensjoner 22 1/6 "x 13 ¾" x 9 3/8 ") for å huse array (Figur 4A).
    2. Forbered testing rom, slik at et rødt lys (tak- eller veggmontert) kan brukes under testing.
    3. Utarbeide egne programøkter for daglig tilvenning og injeksjon forsøk.
      1. Satt tilvenning forsøk til å være mellom 30-60 min og injeksjons forsøk å være mellom 60-120 min (figur 5B). Den anbefalte lengden for hver enkelt er 60 min. Hold prøve lengde konsistente på tvers av flere årskull i samme eksperiment.
      2. Sett forsøk å starte recording på den første strålen pause som skjer etter at startsignalet er startet (figur 5B). For injeksjons rettssaken, sette startsignal slik at boksene kan startes enkeltvis (ikke i kor), hvis det er mulig.
      3. Sett stråle pauser for å bli registrert i brukerdefinerte "binger", helst 5 min hver (figur 5B).
    4. Fremstille hele volumet av kokain som er nødvendig for forsøket for hånden. Oppløs kokain HCl i 0,9% NaCl (saltløsning), basere den endelige konsentrasjonen på et injeksjonsvolum på 0,1 ml / 10 g kroppsvekt (f.eks, for en dose på 5 mg / kg, er løsningskonsentrasjon 0,5 mg / ml). Vortex blandingen i 30-45 sek, sterilt filter (0,2 mikrometer sprøytefilter) og oppbevar ved romtemperatur.
  2. testing
    MERK: Den innledende fasen av testing går for 10-11 dager. Mus motta to daglige studier: habituering (sprøyte gratis) og injeksjon. Administrere saltvann for første tre til fvåre dager (se Diskusjon for betydningen av saltvann tilvenning), og kokain for neste syv hjelp av den samme dose (f.eks., 15 mg / kg / dag).
    1. Hver dag, akklimatisere musene i hjem bur til atferds forværelse for 30 min til 1 time.
    2. Forbered rene standard mus-sized klar akryl bolig bur med et ekstremt tynt lag med friskt sengetøy (f.eks furu chips), slik at man ikke obskure photobeams, hvis det er aktuelt (figur 4C & D).
    3. Plasser bur mot Y-aksen av photobeam matrise nær den ene ende, slik at fem bjelker ligger i avstand jevnt langs sin lengde. X-aksen bjelker blir ikke brukt i denne testen (figur 4C og D).
    4. Ta mus fra sine hjem bur, i tilfeldig rekkefølge, Scruff og veie dem. Fjern hver mus fra veie båten ved foten av halen (med støtte) og plasser direkte inn i sin tildelte bevegelses buret. Dekk hver merd med en standard filter-lokket.
    5. Forbered forskjellige sprøyter with saltvann eller kokain løsning, som beskrevet i trinn 2.1.7, basert på gjeldende dagens kroppsvekt. Begynn med en dose på 15 eller 20 mg / kg, og vurdere en andre eksperiment ved hjelp av en høyere eller lavere dose (se diskusjon for relevante faktorer).
    6. Når tilvenning studier har utgått for alle merder, laste injeksjon programmet.
    7. En av gangen, fjerne mus fra deres test bur, Scruff og gi sin injeksjon (ip). Før retur musen til sin test bur, raskt sette i gang startsignal for at buret (figur 5C, nederst).
    8. Etter at alle injeksjons forsøk har endt, returnere musene til sine hjem bur og deres bolig rom.
    9. Om ønskelig at mus å gjennomgå en rekke uttak perioder og narkotika utfordringer, for eksempel følgende: samme dose som originalen, halv dose dobbeltdose, deretter saltvann, slik at sju dager før det samme dose utfordring og 06:57 dager før hver ekstra utfordring. Uansett valg av utfordringer, maintain tilsvarende abstinens perioder på tvers av kohorter innenfor et eksperiment.
      MERK: Hvis den opprinnelige dosen er høy (f.eks 30 mg / kg eller høyere), bør det doble dosen utelates eller erstattes med en lavere dose. Saltvann utfordring avslører noen betinget muskelaktivering av kokain-paret miljø alene, og i prosessen, mengden sensitivisert bevegelse som er kokain-avhengig (se diskusjon).
  3. Statistisk analyse
    1. Velge den del (e) av hvert forsøk som vil bli brukt for analyse. Mest kokain-indusert bevegelse hos gnagere skjer innen den første ~ 15-30 minutter etter injeksjon av narkotika. Avhengig involverte variabler, bør du vurdere å analysere kumulativ bevegelse for flere tidsvinduer (for eksempel de første 15, 30, 60 og / eller 120 min) eller fokusere på uavhengige segmenter av rettssaken.
    2. Ved hjelp av tidsperioden velges, sum bjelke bryter for hvert dyr ved dag for tilvenning og injeksjonsforsøk separat og deretter enverage summene for hver gruppe. Plot betyr og standardfeil for gjennomsnittet (SEM) i et linjediagram over all dager. Som behandlinger kan forandre hvordan mus svare på medikamentet tidlig og / eller for sent i hver daglige prøve, også plotte gjennomsnittlig gruppe strålebrudd av 5-min bin i løpet av hver prøve daglig.
      MERK: Plotting daglige aktivitet gjennomsnitt for tilvenning og injeksjons studier (f.eks første 15 min) gjør det kunstig ut til at bevegelse er dempet av saltvann injeksjon, men husk at aktiviteten har (mest sannsynlig) falt til dette nivået innen utgangen av tilvenning hver dag .
    3. Analyser påfølgende saltvann og behandlings dager separat ved hjelp av gjentatte målinger (RM) ANOVAs ha innen-fagene faktor på dag / tid og med noen mellom-fagene faktorer i design, som passer. Bruk en t-test eller One-Way ANOVA å undersøke gruppeforskjeller på dag 1 av kokain (akutt eksponering), og en multivariat ANOVA for utfordringene. Når det er hensiktsmessig, følger significance med post-hoc tester eller Univariat ANOVAs.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Representative resultater fra CPP-analyse er vist i figur 6 ved hjelp av villtype C57BL / 6N-mus ved ca. ni ukers alder. Studien var samtidig en 2 x 3 blandet fakultetet, med en innen-fag variabel av Test (før og etter) og en mellom-fag variabel av behandling (saltvann og kokain 5 og 10 mg / kg). En RM ANOVA viste en signifikant interaksjon mellom test og behandling (F 2,20 = 3,68, p <0,05), som ble tolket i stedet for signifikante hoved effektene observert for både Test (F 1,20 = 9,86, p <0,01) og behandling (F 1,20 = 4,37, p <0,05). Post-hoc sammenligninger viste at ingen av gruppene skilte seg fra hverandre under for-testen. På post-test, 5 mg / kg og 10 mg / kg var ikke signifikant forskjellig fra hverandre; imidlertid begge grupper viste signifikant større preferanse for kokain-parede kammer enn den saltvann-kontrollgruppe bare (Tukey s: 5 mg / kg, p <0,5; 10 mg / kg, p# 60; 0,01). I tillegg, Bonferroni post hoc tester viste at både 5 (p <0,05) og 10 (p <0,05) mg / kg grupper viste større preferanse for kokain-sammenkoblet side ved post-test sammenlignet med pre-test, mens saltvann -saline gruppen viste ingen endring fra pre- til post-test.

Representative resultater fra den lokomotoriske analyse er vist i figur 7A og B ved hjelp av villtype C57BL / 6N kull kontrollmus fra en serie av separate forsøk som tidligere har blitt publisert 18. Etter akklimatisering til saltvannsinjeksjoner i 3-4 dager, mottok musene en kokain injeksjon (ip) ved 5, 10, 15 eller 30 mg / kg per dag i syv dager. Etter en syv eller 14-dagers seponeringsperiode, fikk hver gruppe en kokain utfordring på den opprinnelige dose, og etter ytterligere (variabel) abstinens perioder, noen fikk flere kokain utfordringer på andre doser, som vist. For det formål å demonstrere effekten av kokain dose på locomOTOR sensibilisering i dagens publikasjon, ble de fire forskjellige dosegruppene sammen til en 4 x 7 mixed-faktoriell design, med en innen-fag variabel of Day (første 7 kokain injeksjoner) og en mellom-fag faktor på Dose. En RM ANOVA viste en signifikant interaksjon mellom Dose og Day (F 18276 = 12,53, p <0,0001), noe som ble tolket i stedet for betydelige viktigste effektene som ble også observert for både Day (F 6276 = 18,25, p <0,0001) og Dose ( F 3,46 = 22,63, p <0,0001). Tukey s post hoc analyse viste signifikante generelle forskjeller mellom 5 og 15 mg / kg (p <0,0001), 5 og 30 mg / kg (p <0,0001), og 10 og 15 mg / kg (p <0,01). Det ble observert en rekke betydelige forskjeller når gruppene ble sammenlignet hver dag. Bemerket her er forskjellene for dag 1 Kokain (5 vs 30 mg / kg, p <0,01; 10 vs 30 mg / kg, p <0,05; 15 vs 30 mg / kg, p <0,01) og Dag 7 Kokain ( 5 vs. 10 mg / kg, p <0,05, sammenlignet med 5 15 mg / kg, p <0,0001; 10 vs. 15 mg / kg, p <0,01; 15 vs. 30 mg / kg, p <0,0001). Figur 7C viser uekte figurer som illustrerer de viktigste aspektene ved bevegelses sensibilisering som kan være forskjellig mengde behandlingsgruppene. Selv om disse funksjonene er illustrert uavhengig av hverandre her, er det også mulig å observere forskjellene i kombinasjoner av disse.

Figur 1
Figur 1. Med PC CPP basic økt kontroll. (A) Standard display, åpen session ikonet (rød boks), og åpen session dialogboksen (innfelt). Velg "custom filnavn" og bruke mappevinduet for å navigere til data mappen og navngi økten. Velg riktig program fra "prosedyren" i rullegardinlisten. For hver boks i bruk, sjekk boksen nummer, og skriv relevant informasjon i faget, eksperiment, og gruppebokser. (B) Load kammer skjerm, start signal ikonet (blå boks), og sender signDialogboksen al (innfelt). Når alle kammer data er lagt inn, velger kamre som skal lastes og problemet starter signal. Chambers vil nå bli utløst av bjelke-pause for å starte session timer og samle inn data. (C) Avsluttet økten display. Som hvert kammer fullfører eget program, vil datainnsamlingen området (grønn boks) blir statisk og kammerinformasjonsområdet (oransje boks) viser kamre som "lukket". Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figur 2
Figur 2. CPP kammer konfigurasjon. (A) Prøve eksperimentelle tidslinje. Pre-test etterfølges av daglig vekslende kokain (grå) og saltvann (hvit) condition økter. Post-test er gjennomført 24 timer etter siste conditioning økten. ( B) Åpen kammer konfigurasjon for bruk i pre- og post-test økter. Legg merke til at inter-kammerdørene er i den hevede / åpen stilling. (C) lukket kammer konfigurasjon for bruk i kondisjoneringssesjoner. Merk at manuelle dører er senket, uten tilgang mellom kamrene. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figur 3
Figur 3. Balansert konstruksjonsberegninger for CPP. Eksempel viser beregninger og mål når balansering pre-test score i CPP. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

ig4.jpg "/>
Figur 4. Locomotor Chamber-konfigurasjon. (A) ytre kammer består av svart ugjennomsiktig boksen inne hvilken strålen matrisen ligger tett (B). Bolig / skoen boksen størrelse kamre skal være fylt med et tynt lag av sengetøy (C) og innrettet slik at bjelkene er jevnt fordelt langs lengdeaksen (D). Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figur 5
Figur 5. Locomotor Chamber Computer drift. (A) Standard dataprogram. Start nytt session database (blå boks og innfelt). Endre navn på fil og katalog for hvert forsøk (blå under innfelt). Opprett ny sesjon (rød boks og innfelt) med unik identifikator. Edit Session (rød innfelt) og enter dyr identifikator informasjon i kategorien kammeret (grønn boks og innfelt) og sette opp start / stopp-kontroll for hver økt type (oransje boks). (B) Velg riktig start stopp kontroll for hver økt type. Sett intervall lengde til 300 sekunder (i 5 min bin) og 12 intervaller per fase (for en time sesjon). For tilvenning økter (til venstre), vil kamre bli utløst for å begynne i kor (Aktiver Phase ... Alt i Unison manuelt) og vil begynne overvåking for aktivitet umiddelbart etter den første strålen pause. For injeksjon økter (til høyre), vil kamre utløses individuelt (manuelt Aktiver Phase ... Individuelt skjermknapper) og vil begynne overvåking for aktivitet umiddelbart etter den første strålen pause. Begge sesjonstyper vil ende når den totale fasen tiden er utløpt for hvert kammer individuelt. (C) Når økten har startet, kan tilvenning økter startes ved å velge "starte" -knappen (øverst). Merk at etter triggering, vil alle kamrene vente på første strålen pause for å begynne økten. For injeksjon økter, kan hvert kammer startes uavhengig (nederst). Legg merke til at etter å ha utløst individuelle kamre (mens dyret er ute av kammeret for injeksjon), vil kamre venter på den første strålen pause for å begynne økten. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figur 6
Figur 6. Representant CPP resultater. (Til toppen) I CPP, mus viste signifikant preferanse for et kammer sammenkoblet med kokain (enten 5 eller 10 mg / kg), mens musene som fikk saltvann motstandere i begge kamre ikke utviklet noen preferanse. Kolonne forkortelser betegne betydelig mellom-gruppe forskjeller fra den merkede bar i forhold til den kjente gruppen på samme testing timeg påpeke. (Bottom) Ved å plotte tid tilbrakt i kokain-versus saltvann-paret kamre under pre- og posttester, kan økningen i kokain-paret side sees i 5 og 10 mg / kg grupper som er på bekostning av tid brukt i både saltvann-paret og midtre kammer. I kontrast, var det ingen slående forskjeller i tidsbruk i alle kammer mellom pre- og post-tester i saltvann kontrollgruppen. Data presentert som gjennomsnitt ± SEM. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figur 7
Figur 7. Representative bevegelsesoverfølsomhets resultater (A) Kumulative strålebrudd for de første 20 min av hver daglige retten for fire separate doser. 5, 10, 15 og 30 mg / kg i villtype mus etterfulgt av samme-, halv- dobbelt~~POS=TRUNC dose end saltvann utfordringer, modifisert fra (18). Alle gruppene fikk samme dose utfordringer enten en (10, 15, 30 mg / kg) eller to (5 mg / kg) uker etter den siste eksponering kokain. Noen grupper har mottatt ytterligere utfordringer, som ble utført ved variable abstinensperioder. (B) Plot av locomotor data (strålebrudd) oppsummerte med 5-min bin for daglige forsøk i løpet av 15 mg / kg kokain sensibilisering eksperiment. (C) Illustrasjoner som viser forskjeller i muskel allergi for to behandlingsgrupper som primært drevet av (til venstre) akutt kokain responsforskjeller, (i midten) en allergi rate forskjellen eller (høyre) forskjeller i maksimal sensibilisering. Data presentert som gjennomsnitt ± SEM. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Denne protokollen demonstrerer metoder for kondisjonert sted preferanse og lokomotorisk sensibilisering, hver av hvilke kan brukes av den gjennomsnittlige laboratoriet for å vurdere aspekter av medikament-indusert adferds plastisitet. Som med de fleste adferdstester, er det ekstra verdige betraktninger ut over basisprotokollen. Først, hver av disse teknikkene kan bli oppfattet som å ha to faser, induksjon og ekspresjon. "Induksjon" omfatter utvikling av adferds for CPP det oppstår under kondisjonering, og for sensibilisering det er den første perioden av (typisk sammenhengende) legemiddeleksponering. "Ekspresjon" for CPP er post-test, mens for sensibilisering den kan defineres som et medikament utfordring gitt enten etter uttak eller ganske enkelt som den siste eksponering rad.

Det er verdt å vurdere å begrense manipulasjoner til en av disse fasene versus den andre for å bedre tolke deres potensielle effekter. Virus med timelig begrenset effektivitet (f.eks, HSV) eller narkotika co-administrasjoner / forbehandlinger (f.eks agonister / antagonister) er nyttige i dette arbeidet. Ved å ta denne tilnærmingen, kan det være ytterligere nødvendig å bruke komprimerte protokoller, slik at en bestemt fase vil bedre falle sammen med viral ekspresjon. For CPP, er det mulig å gjennomføre en to-dagers kondisjonering metode, som vi har beskrevet tidligere 37. Spesielt for bevegelses allergi, kan endringer i tilbaketrekning perioden mellom induksjon og uttrykk kombinert med disse metodene, avdekke prosesser involvert i vedlikehold eller stabiliteten til atferd. I tillegg kan slike fremgangsmåter brukes til å studere fenomenet kryss-sensibilisering, hvor et lysfølsomt oppførsel indusert ved hjelp av en medikament men kan uttrykkes ved eksponering for et annet medikament. Siden kryssoverfølsomhet ikke oppstår mellom alle sensibiliserende narkotika av misbruk, kan lokke fram en sensitivisert atferd som avviker noe fra originalen, og er ikke nødvendigvis toveis forenhver gitt sett av narkotika, kan dens undersøkelse tilby unike muligheter til å forstå hvor og hvordan ulike stoffer påvirker hjernens plastisitet og funksjon.

Riktig tolkning av CPP, særlig avhengig av utelukker alternative forklaringer av funnene. Data generert i en tre-kammer-apparater bør videre gransket før definere subtraksjon av tid brukt i saltvann-paret side fra kokain-paret side ved post-test som preferanse, siden en økning i en preferanse for narkotika-paret side at resulterer utelukkende fra en nedgang i tid brukt i saltvann-paret kammer er trolig uegnet for en slik tolkning. Den midterste kammeret åpner for dette resultatet siden musen kan endre tid brukt det i stedet for narkotika-paret kammeret. Det er også mulig å observere økt tid brukt i den legemiddelsammenkoblet side på bekostning av det midtre kammer i stedet for saltvann-sammenkoblet side; uten tvil, kan dette utfallet fortsatt være akseptabelt interpreted som en økning i narkotika preferanse. Inkludering av tredje avdeling gir en nøytral kammer som gjør at objektiv plassering av dyret under pre- og post-test økter 41. Selv nyttig for å ta første plassering skjevheter som bidrar til testdags score, er det tredje kammeret ikke nødvendig for condition. Alternative CPP design som har to forskjellige avdelinger eller en enkelt avdeling med varierte stimulans konfigurasjoner er omtalt andre steder 41-42.

Underskudd på plass preferanse for et legemiddel bør også være ledsaget av vurderinger av både evnen til å lære kontekstuelle foreninger og generell belønning funksjon. Det finnes en rekke justeringer som kan gjøres til CPP-paradigmet som kan aide i tolkningen av endret preferanse, herunder å modifisere salience av UCS (medikament) ved å øke (eller avtagende) antall sammenkoblinger eller ved å bruke høyere eller lavere medikament dose. CPP kan utføres ved hjelp spiselig food (f.eks høy fett, sukrose) eller sosiale interaksjoner for å vurdere om den observerte endringen er spesifikke for stoffet eller er relevant for naturlige belønninger; ikke-CPP nærmer seg anvendelige for dette formål inkluderer intrakranselvstimulering, sukrose preferanse, og / eller appetitive tilnærming oppgaver. Men alle disse alternativene varierer i sin evne til å tilstrekkelig adresse ønsket spørsmålet. Mat-baserte CPP kan være spesielt gunstig fordi normale reaksjoner demonstrere en evne til å lære og danne riktige kontekstuelle assosiasjoner med en naturlig belønning. Ekstra kontroller for å vurdere læringsevne omfatter oppgaver som er avhengige av kontekstuelle læring / hukommelse (kontekstuell frykt condition og CPA). CPA har fordelen av å være drevet på samme måte som CPP, ofte i de samme kamre, og erstatte den appetitive medikament med en motvilje erfaring (for eksempel litiumklorid injeksjon). Dyr som viser underskudd i CPP, men normal CPA, vise evne til å danne riktig kontekstuell forenings, noe som indikerer at svekkelser i stoffet CPP mest sannsynlig relatert til belønne (medikament-spesifikke eller på annen måte). En forsiktig for CPA bruker lithium klorid å vurdere er om dette stoffet er en kjent behandling for en tilstand som kan modelleres av forsøksdyr. For eksempel har litiumbehandling vist seg å motvirke læring underskudd i musemodellen av skjøre X-43, noe som ville forvirre denne kontrollmetode.

I tillegg til den klassiske CPP paradigme, det er potensielle utvidelser brukere kan finne nyttig, for eksempel testing utryddelse av lært narkotika-sammenheng foreningen og dens gjeninnsettelse etter CPP. Betinget svar (CRS), når etablert, kan opprettholdes i lengre perioder 19,20 når dyr blir liggende uforstyrret. Til tross for den relative varighet av CR, kan det være effektivt slukkes ved gjentatte presentasjoner av CS (konteksten) i fravær av den UCS (medikament). To CPP utryddelse metoder vises i literature: gjentatt test eksponering uten injeksjon 21 eller re-motstandere av den tidligere narkotika-paret side med kjøretøy 22. Extinction prosesser reflektere ny læring, i motsetning til "unlearning" av den opprinnelige condition, en idé effektivt demonstrert gjennom "gjeninnsettelse." Oppfriskning er klassisk utløst av re-eksponering for UCS, som produserer utvinning av CR. I sammenheng med CPP, vil en enkelt injeksjon av trenings medikament føre dyr å vise sted preferanse. Interessant mange ikke-trening narkotika pekepinner kan også produsere gjeninnføringen av CPP, inkludert priming med alternative legemidler 22 og en rekke stressfaktorer 23-26. Extinction og gjenopptakelses eksperimenter er av spesiell interesse for narkotikaavhengighet feltet som modeller for behandling og tilbakefall. Tiltak som bedrer frekvensen av utryddelse og / eller redusere omfanget av gjeninnføringen kan være verdifulle mål for menneske farmakoterapi.

(f.eks 27-29). Spesielt har imidlertid sammenheng uavhengig allergi klart blitt vist i andre studier (f.eks 30-32). Eksperimentelle detaljer som kan bidra til hvorvidt en kontekstavhengig økning i sensibilisering er observerbar omfatte medikamentdose, lengden på eksponeringen, hvorvidt en hvilken som helst gruppe må transporteres for testen of sensibilisering og visse aspekter av pre-eksponering til testkammeret; Men disse detaljene er fortsatt noe uklart. En metode for å bestemme bidraget av kontekstuelle sensibilisering er for å gi en saltløsning utfordring følgende medikament sensibilisering 33. Bruken av den beskrevne paradigmet reduserer bidraget av kontekstavhengig allergi som vist ved meget lite bevegelsesaktivering i tidligere studier ved salt utfordring. Den kontekstuelle bidrag til allergi har blitt vurdert i en rekke papirer, ofte med diskusjoner om andre enn bevegelsesaktivitet 34 atferd.

For å begrense forurensning av legemiddelindusert aktivering og allergi med bevegelses stimulerende effekter indusert av en roman miljø blir mus aklimatisert til saltvannsinjeksjoner i tre til fire dager i begynnelsen av hvert forsøk. Som det kan ses på figur 7, mus viser typisk redusert bevegelse mellom den første ogsiste saltvann akklimatisering dag. I tillegg, ble musene er merkbart roligere og enklere å håndtere og injisere av den siste saltvann eksponering. Tidligere arbeider har testet flere stammer og genotyper av mus ved hjelp av dette paradigmet, og ser ikke mye variasjon i saltvann akklimatisering aktivitet på tvers av dem; imidlertid, er det mulig å observere noen ganger meget sterke hyperaktivitets fenotypene assosiert med bestemte genotyper som ikke overvinnes ved hjelp av denne metoden. I slike tilfeller kan det være ønskelig å utføre flere saltvann akklimatiseringen dager (inntil locomotion platåer i den hyperaktiv gruppe), og deretter normalisering av den hyperaktiv gruppe med kontrollgruppen ved hjelp av de siste saltvann injeksjon dagersperioden. Mens det er ikke ideell, gir det mulighet for en mer rimelig sammenligning av virkningene av et medikament for bevegelse mellom disse gruppene. Andre alternativer som kan dempe ekstrem hyperaktivitet er å forlenge tilvenning rettssaken lengde før injeksjon hver dag etter en til fem timer, og / eller bruke lengre injeksjon forsøk (2-4 timer) each dag.

Det er flere hensyn som er viktige for tolkningen av bevegelsesatferd. Som illustrert i figur 7C, kan observerte gruppeforskjeller bli drevet primært av ulikheter i den akutte muskel respons, frekvensen av allergi over dager, den maksimale grensen for allergi, eller en kombinasjon av disse faktorene. Parsing bidrag fra disse faktorene enkeltvis kan være nyttig. For dette formål kan den akutte lokomotoriske respons være statistisk analysert alene. Så frekvensen av allergi kan vurderes å bruke et program som kan kurvetilpasning og en hastighet normaliseringsprosessen som neddiskonterer eventuelle akutte locomotor forskjeller. Altered maksimal allergi er vanligvis avslørt i en RM ANOVA de påfølgende narkotika eksponeringsdagene, der oppfølgings dag-for-dag post-hoc sammenligninger er vesentlige på dager etter gruppe svar har plateaued. Man bør være oppmerksom på at maksimal allergi ikke kan bestemmesfor en gruppe som opprettholder en lineær bevegelses respons over narkotika eksponeringsdager, slik som beskrevet i figur 7C (midten, blå linje). I et slikt tilfelle kan medikamenteksponering bli utvidet for å forsøke og bestemme maksimal sensibilisering.

Endelig er det vanligvis best å sammenligne allergi mellom grupper som bruker minst to primære legemiddeldoser utført i separate årskull av dyr. Forskjeller i noen av de ovennevnte aspektene av lokomotorisk aktivering, ved en dose eller begge deler, brukes til å lede ytterligere tester for å utelukke andre forklaringer, inkludert forandringer i utviklingen av stereotypi. Gjentatt eksponering for noen stoffer, slik som kokain og amfetamin, ikke bare produserer lysfølsomt bevegelse på en doseavhengig måte, men også sensitizes konkurrerende stereotypiske atferd. Disse stereotypier blitt særlig åpenbar ved høye doser, slik at muskel allergi er ofte helt eller delvis skjult, men avslørte igjen ved administrering aven lavere dose. Av denne grunn kan et "underskudd" på lokomotorisk sensibilisering i en forsøksgruppe faktisk gjenspeiler økt følsomhet for legemiddel-indusert utvikling av stereotypier. Vurderingen av stereotypi kan være utfordrende, men det finnes et antall publiserte skalaer 35 og andre tilnærminger 36. Ved hjelp av både en generell stereotypi skala og en vurdering av spesiell oppførsel er anbefalt, som publisert tidligere 18.

I konklusjonen, har en rekke atferdstester er utviklet i dyremodeller i et forsøk på å analysere kompleksiteten av menneskelig avhengighet. Betinget sted preferanse og lokomotorisk allergi er to grunnleggende tester er mye brukt i gnagere og, henholdsvis, kan de være spesielt nyttige for vurdering av tidlig legemiddel-assosiert belønning og den vedvarende plastisitet indusert ved gjentatt bruk. Det finnes en rekke hensyn til utforming og tolkning av hver type studie, noe som gjør det worthwhile å nøye vurdere de eksperimentelle mål og tidligere litteratur ved planlegging av disse vurderingene.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne hevder at de ikke har noen konkurrerende økonomiske interesser.

Acknowledgments

Forfatterne takker Karen Dietz og Shari Birnbaum for tidligere innspill på atferdsmessige beregninger og Lauren Peca for hjelp med atferds testing. Forfatterne erkjenner også sjenerøs støtte fra Simons Foundation (Simons Foundation Autisme Forskningsinitiativet tilskudd til CWC), NIDA (DA008277, DA027664, og DA030590 til CWC, F32DA027265 til LNS og F32DA036319 til RDP), den FRAXA Research Foundation og Eleanor og Miles Shore Fellowship Program (stipendstøtte til LNS), og John Kaneb Fellowship Program (stipendstøtte til MT).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Cocaine Hydrochloride USP Mallinckrodt Pharmaceuticals 0406-1520 Purchase and use (Schedule II controlled substance) for research purposes requires compliance and licensure according to state and federal law. 
Conditioned Place Preference,  Three Compartment Apparatus with Manual Doors and Lights for Mouse Med-Associates Inc. MED-CPP-MS & MED-CPP-3013 Our laboratory has used these boxes; however, many alternative boxes are available & acceptable.
PAS-Home Cage Activity Monitoring Photobeam Arrays San Diego Instruments 2325-0223 & 7500-0221 Our lab houses these arrays inside of custom built chambers, as described in the text.  There are alternatives available.
Disposable Sani-Cloth disenfecting wipes PDI 13872

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. National Institute on Drug Abuse. Drug Facts: Understanding Drug Abuse and Addiction. www.drugabuse.gov. , Available from: http://www.drugabuse.gov/publications/drugfacts/understanding-drug-abuse-addiction (2012).
  2. Kasanetz, F., et al. Transition to addiction is associated with a persistent impairment in synaptic plasticity. Science. 328 (5986), 1709-1712 (2010).
  3. Beach, H. D. Morphine addiction in rats. Can J Psychol. 11 (2), 104-112 (1957).
  4. van der Kooy, D. Chapter 13, Place Conditioning: A simple and effective method for assessing the motivational properties of drugs. Methods of Assessing the Reinforcing Properties of Abused Drugs. Bozarth, M. A. , 229-240 (2012).
  5. Carlezon, W. A. Place conditioning to study drug reward and aversion. Methods Mol Med. 84, 243-249 (2003).
  6. Prus, A. J., James, J. R., Rosecrans, J. A. Chapter 4, Conditioned Place Preference. Methods of Behavior Analysis in Neuroscience. Buccafusco, J. J. , (2009).
  7. Tzschentke, T. M. Measuring reward with the conditioned place preference (CPP) paradigm: update of the last decade. Addict Biol. 12 (3-4), 227-462 (2007).
  8. Aguilar, M. A., Rodrìguez-Arias, M., Miñarro, J. Neurobiological mechanisms of the reinstatement of drug-conditioned place preference. Brain Res Rev. 59 (2), 253-277 (2009).
  9. Feduccia, A. A., Duvauchelle, C. L. Novel apparatus and method for drug reinforcement. JoVE. (42), (2010).
  10. Brabant, C., Quertemont, E., Tirelli, E. Influence of the dose and the number of drug-context pairings on the magnitude and the long-lasting retention of cocaine-induced conditioned place preference in C57BL/6J mice. Psychopharmacology. 180 (1), 33-40 (2005).
  11. Pliakas, A. M., Carlson, R. R., Neve, R. L., Konradi, C., Nestler, E. J., Carlezon, W. A. Altered responsiveness to cocaine and increased immobility in the forced swim test associated with elevated cAMP response element-binding protein expression in nucleus accumbens. J Neurosci. 21 (18), 7397-7403 (2001).
  12. Knackstedt, L. A., Samimi, M. M., Ettenberg, A. Evidence for opponent-process actions of intravenous cocaine and cocaethylene. Pharmacol Biochem Behav. 72 (4), 931-936 (2002).
  13. Post, R. M., Rose, H. Increasing effects of repetitive cocaine administration in the rat. Nature. 260 (5553), 731-732 (1976).
  14. Marin, M. T., Cruz, F. C., Planeta, C. S. Cocaine-induced behavioral sensitization in adolescent rats endures until adulthood: lack of association with GluR1 and NR1 glutamate receptor subunits and tyrosine hydroxylase. Pharmacol Biochem Behav. 91 (1), 109-114 (2008).
  15. Henry, D. J., White, F. J. The persistence of behavioral sensitization to cocaine parallels enhanced inhibition of nucleus accumbens neurons. J Neurosci. 15 (9), 6287-6299 (1995).
  16. Hope, B. T., Simmons, D. E., Mitchell, T. B., Kreuter, J. D., Mattson, B. J. Cocaine-induced locomotor activity and Fos expression in nucleus accumbens are sensitized for 6 after repeated cocaine administration outside the home cage. Eur J Neurosci. 24 (3), 867-875 (2006).
  17. Shuster, L., Yu, G., Bates, A. Sensitization to cocaine stimulation in mice. Psychopharmacology. 52 (2), 185-190 (1977).
  18. Smith, L. N., Jedynak, J. P., Fontenot, M. R., Hale, C. R., Dietz, K. C., Taniguchi, M., Thomas, F. S., Zirlin, B. C., Birnbaum, S. G., Huber, K. M., Thomas, M. J., Cowan, C. W. Fragile X mental retardation protein regulates synaptic and behavioral plasticity to repeated cocaine administration. Neuron. 82 (3), 645-658 (2014).
  19. Mueller, D., Stewart, J. Cocaine-induced conditioned place preference: reinstatement by priming injections of cocaine after extinction. Behav Brain Res. 115 (1), 39-47 (2000).
  20. Sakoori, K., Murphy, N. P. Maintenance of conditioned place preferences and aversion in C57BL6 mice: effects of repeated and drug state testing. Behav Brain Res. 160 (1), 34-43 (2005).
  21. Bardo, M. T., Neisewander, J. L., Miller, J. S. Repeated testing attenuates conditioned place preference with cocaine. Psychopharmacologia. 89 (2), 239-243 (1986).
  22. Itzhak, Y., Martin, J. L. Cocaine-induced conditioned place preference in mice: induction, extinction and reinstatement by related psychostimulants. Neuropsychopharmacology. 26 (1), 130-134 (2002).
  23. Kreibich, A. S., Blendy, J. A. cAMP response element-binding protein is required for stress but not cocaine-induced reinstatement. J Neurosci. 24 (30), 6686-6692 (2004).
  24. Briand, L. A., Blendy, J. A. Not all stress is equal: CREB is not necessary for restraint stress reinstatement of cocaine-conditioned reward. Behav Brain Res. 246, 63-68 (2013).
  25. Redila, V. A., Chavkin, C. Stress-induced reinstatement of cocaine seeking is mediated by the kappa opioid system. Psychopharmacology. 200 (1), 59-70 (2008).
  26. Do Couto, R. ibeiro, Aguilar, B., A, M., Manzanedo, C., Rodriguez-Arias, M., Armario, A., Minarro, J. Social stress is as effective as physical stress in reinstating morphine-induced place preference in mice. Psychopharmacology. 185 (4), 459-470 (2006).
  27. Post, R. M., Lockfeld, A., Squillace, K. M., Contel, N. R. Drug-environment interaction: context dependency of cocaine-induced behavioral sensitization. Life sciences. 28 (7), 755-760 (1981).
  28. Badiani, A., Browman, K. E., Robinson, T. E. Influence of novel versus home environments on sensitization to the psychomotor stimulant effects of cocaine and amphetamine. Brain Res. 674 (2), 291-298 (1995).
  29. Li, Y., Acerbo, M. J., Robinson, T. E. The induction of behavioural sensitization is associated with cocaine-induced structural plasticity in the core (but not shell) of the nucleus accumbens. Eur J Neurosci. 20 (6), 1647-1654 (2004).
  30. Partridge, B., Schenk, S. Context-independent sensitization to the locomotor-activating effects of cocaine. Pharmacol Biochem Behav. 63 (4), 543-548 (1999).
  31. Le Foll, B., Diaz, J., Sokoloff, P. Increased dopamine D3 receptor expression accompanying behavioral sensitization to nicotine in rats. Synapse. 47 (3), 176-183 (2003).
  32. Heidbreder, C. A., Babovic-Vuksanovic, D., Shoaib, M., Shippenberg, T. S. Development of behavioral sensitization to cocaine: influence of kappa opioid receptor agonists. J Pharmacol Exp Ther. 275 (1), 150-163 (1995).
  33. Tirelli, E., Michel, A., Brabant, C. Cocaine-conditioned activity persists for a longer time than cocaine-sensitized activity in mice: implications for the theories using Pavlovian excitatory conditioning to explain the context-specificity of sensitization. Behav Brain Res. 165 (1), 18-25 (2005).
  34. Anagnostaras, S. G., Schallert, T., Robinson, T. E. Memory processes governing amphetamine-induced psychomotor sensitization. Neuropsychopharmacology. 26 (6), 703-715 (2002).
  35. Spangler, R., Zhou, Y., Schlussman, S. D., Ho, A., Kreek, M. J. Behavioral stereotypies induced by 'binge' cocaine administration are independent of drug-induced increases in corticosterone levels. Behav Brain Res. 86 (2), 201-204 (1997).
  36. Kelley, A. E. Measurement of rodent stereotyped behavior. Curr Protoc Neurosci. Chapter 8, Unit 8.8 (2001).
  37. Taniguchi, M., Carreira, M. B., Smith, L. N., Zirlin, B. C., Neve, R. L., Cowan, C. W. Histone deacetylase 5 limits cocaine reward through cAMP-induced nuclear import. Neuron. 73 (1), 108-120 (2012).
  38. Zangen, A., Solinas, M., Ikemoto, S., Goldberg, S. R., Wise, R. A. Two brain sites for cannabinoid reward. J Neurosci. 26 (18), 4901-4907 (2006).
  39. Huston, J. P., de Souza Silva, M. A., Topic, B., Müller, C. P. What's conditioned in conditioned place preference. Trends Pharmacol Sci. 34 (3), 162-166 (2013).
  40. Schechter, M. D., Calcagnetti, D. J. Trends in place preference conditioning with a cross-indexed bibliography; 1957-1991. Neurosci Biobehav Rev. 17, 21-41 (1993).
  41. Bevins, R. A., Cunningham, C. L. Chapter 9, Place Conditioning: A Methodological Analysis. Tasks and Techiniques: A sampling of methodologies for the investigation of animal learning, behavior, and cognition. Anderson, M. , 99-110 (2006).
  42. Hitchcock, L. N., Cunningham, C. L., Lattal, K. M. Cue configuration effects in the acquisition of a cocaine-induced place preference. Behav Neurosci. 128 (2), 217-227 (2014).
  43. Liu, Z. -H., Chuang, D. M., Smith, C. B. Lithium amerliorates phenotypic deficits in a mouse model of fragile X syndrome. Int J Neuropscyhopharmacol. 14 (5), 618-630 (2011).
  44. Bardo, M. T., Rowlett, J. K., Harris, M. J. Conditioned place preference using opiate and stimulant drugs: A meta-analysis. Neurosci Biobehav Rev. 19 (1), 39-51 (1995).

Tags

Behavior kokain muskel allergi betinget sted preferanse mus psyko
Vurdering av kokain-indusert Behavioral sensibilisering og kondisjonerte sted Preference i Mus
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Smith, L. N., Penrod, R. D.,… More

Smith, L. N., Penrod, R. D., Taniguchi, M., Cowan, C. W. Assessment of Cocaine-induced Behavioral Sensitization and Conditioned Place Preference in Mice. J. Vis. Exp. (108), e53107, doi:10.3791/53107 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter