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कोकीन से प्रेरित व्यवहार संवेदीकरण और चूहे में वातानुकूलित प्लेस पसंद का आकलन

Published: February 18, 2016 doi: 10.3791/53107
Automatic Translation
*1, *1, 1, 1
1Department of Psychiatry, Harvard Medical School, McLean Hospital
* These authors contributed equally

Protocol

सभी प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं मैकलीन अस्पताल संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया है। नोट: निम्न प्रोटोकॉल सीपीपी और हरकत संवेदीकरण, जिनमें से कई विवरण के अन्य सफल प्रोटोकॉल (जैसे, प्रकाश बनाम अंधेरे चरण के परीक्षण, लगातार रुक-रुक कर बनाम खुराक, आदि) से अलग करने के लिए एक ही दृष्टिकोण का वर्णन है। शुरुआती इन प्रोटोकॉल के साथ शुरू करने के लिए, या बस उन्हें गाइड के रूप में उपयोग करते हैं, साहित्य के हाथ में प्रयोगात्मक प्रश्न (ओं) पर आधारित परिवर्तन आदत डाल सकते हैं। स्वचालित माप तरीकों वर्णित हैं; हालांकि, यह प्रत्येक परख (यानी, वीडियो रिकॉर्डिंग, हाथ-स्कोरिंग) के लिए गैर-स्वचालित साधनों का उपयोग करना संभव है।

1. वातानुकूलित प्लेस पसंद

  1. उपकरण और रूम सेट-अप:
    1. 1-3 मिनट प्रत्येक दिन के लिए प्रयोगात्मक चूहों संभाल, कम से कम 3-5 दिनों के परीक्षण से पहले।
      नोट: कभी नहीं संभाला चूहों चैम्बर stre से हटाने के लिए मिल सकता हैssful, के साथ हस्तक्षेप या कंडीशनिंग बदल सकता है।
    2. चार या अधिक तीन संभाग सीपीपी apparatuses, अधिमानतः स्वचालित डेटा संग्रह के लिए 18 photobeams के साथ सुसज्जित प्राप्त करते हैं। सुनिश्चित करें कि प्रत्येक कक्ष के दरवाजे कि उठाया जा सकता है के माध्यम से एक छोटे, तटस्थ चैम्बर को जोड़ने के दो बड़े, visually- और tactilely-अलग कक्षों है / प्रवेश पर नियंत्रण करने के लिए उतारा। प्रत्येक कक्ष पर lids चूहों की प्रविष्टि / हटाने के लिए खुला होना चाहिए और छोटे, व्यक्तिगत रूप से चलाया हुआ (dimmable) रोशनी (चैम्बर प्रति एक) के साथ रखा जा।
      ध्यान दें: सीपीपी चैम्बर डिजाइन भिन्न है और व्यावसायिक रूप से खरीदा या शोधकर्ताओं द्वारा निर्माण किया जा सकता है। "संतुलित" डिजाइन के लिए, एक सिफारिश की योजना और सफेद दीवारों और फर्श के साथ तार ग्रिड एक बड़ा काला कक्ष की दीवारों और फर्श के साथ बार अन्य है। बीच चैम्बर ग्रे दीवारों और फर्श ठोस ग्रे Plexiglass होनी चाहिए। स्पष्टीकरण प्रयोजनों के लिए, इन कक्षों के रूप में ", सफेद" "ब्लैक" और "बीच करने के लिए भेजा जाएगा।"पलकों स्पष्ट plexiglass होना चाहिए। वैकल्पिक डिब्बे विन्यास (एक या दो कक्ष) भी संभव और चर्चा कर रहे अन्यत्र (चर्चा देखने के लिए)।
    3. सेटअप कमरे के रूप में यह परीक्षण के दौरान किया जाएगा: बंद कर देते हैं या dimmest स्थापित करने के लिए भूमि के ऊपर रोशनी सेट और दरवाजा बंद करो। प्रत्येक कक्ष के अंदर एक प्रकाश मीटर का प्रयोग करें और ढक्कन रोशनी इतना तय है कि मध्यम कक्षों थोड़ा उज्जवल (15-20 लक्स) के क्रम में वहां समय बिताने से चूहों को हतोत्साहित करने में काले और सफेद कक्षों (6-10 लक्स) की तुलना में कर रहे हैं।
      नोट: यदि औसत समय बीच में खर्च के रूप में ज्यादा है या काला या सफेद कक्षों की तुलना में अधिक है, आगे प्रकाश विपरीत चरण 1.1.3 में वर्णित वृद्धि हुई है। वैकल्पिक रूप से, बीच के लिए कम आकर्षक फर्श का उपयोग करें। , लेकिन यह सुनिश्चित करने के लिए कि मध्य समय में कम हो जाती है इस कक्ष प्रतिकूल। किसी भी परिवर्तन करने से बचने के पायलट की कुल अन्वेषणों में कम हो जाती है की वजह से नहीं कर रहे हैं (क्रॉसिंग) (जैसे, ~ 220 0.5 सेमी व्यास छेद, समान रूप से 6 x 3.5 x ¼ "Plexiglass में स्थान दिया गया है) ।
    4. पीस्वचालित डेटा संग्रह ( "प्रक्रिया है," चित्रा 1 ए) rogram या मैन्युअल निम्नलिखित मानकों के अनुसार डेटा इकट्ठा। सेट परीक्षणों या तो कंडीशनिंग चैम्बर में पहली किरण को तोड़ने पर शुरू करने के लिए। "परीक्षण" सत्र सेट लंबाई में 20 मिनट हो सकता है और प्रत्येक कक्ष में समय बिताया और किरण टूटता नज़र रखने के लिए। "कंडीशनिंग" सत्र सेट 30 मिनट लंबा और (वैकल्पिक) प्रत्येक कक्ष में बीम टूट जाता है को मापने के लिए किया जाना है। सुनवाई के दौरान रोशन करने के लिए सभी चैम्बर रोशनी सेट करें।
    5. कोकीन समाधान के हाथ में प्रयोग के लिए आवश्यक की पूरी मात्रा तैयार करें। कोकीन एचसीएल, 0.9% सोडियम क्लोराइड (खारा) में भंग 0.1 मिलीग्राम / 10 ग्राम शरीर के वजन का एक इंजेक्शन की मात्रा पर आधारित अंतिम एकाग्रता (5 मिलीग्राम / किग्रा की एक खुराक के लिए, उदाहरण के लिए, समाधान एकाग्रता 0.5 मिलीग्राम / एमएल) है। आरटी पर 30-45 सेकंड के लिए भंवर मिश्रण, बाँझ फिल्टर (0.2 माइक्रोन सिरिंज फिल्टर) और दुकान।
  2. परिक्षण:
    नोट: सीपीपी के लिए सामान्य समय है पूर्व परीक्षण, कंडीशनिंग, औरतब के बाद परीक्षण। पूर्व परीक्षण 1-3 दिनों से कंडीशनिंग से अलग किया जा सकता है; हालांकि, कंडीशनिंग और बाद के परीक्षण के दिन लगातार दिन (2A चित्रा) पर जगह ले जाना चाहिए। इस समय एक ही प्रयोग में सभी साथियों के लिए एक ही रखा जाना चाहिए।
    1. 'जानवरों प्रकाश चरण दिन भर में प्रत्येक जानवर के लिए एक ही उपकरण का उपयोग कर के दौरान टेस्ट।
    2. प्रत्येक परीक्षण दिन (यानी, परीक्षण और कंडीशनिंग दिन), व्यवहार प्रतीक्षालय के लिए चूहों को ले जाने और उन्हें परीक्षण से पहले 1-1.5 घंटे के लिए उनके घर पिंजरों में अबाधित बैठने के लिए अनुमति देते हैं। एक स्थान है जहाँ चूहों तंत्र के लिए अपने पिंजरे से तेजी से ले जाया जा सकता है, न्यूनतम विघटन के साथ, जब परीक्षण शुरू होता है चुनें। सभी उपकरण चालू करें ताकि परीक्षा (जैसे, उपकरण प्रशंसकों) के साथ जुड़े किसी भी शोर मौजूद हैं।
    3. अच्छी तरह से प्रत्येक तंत्र (भीतरी दीवारों, फर्श और ट्रे) हल्के से साफ, शराब, ग्लाइकोल-ether- या अमोनिया आधारित disinfecting के पहले और बाद पोंछे प्रत्येक माउस (सैम का उपयोगप्रयोग के दौरान क्लीनर की ई प्रकार)। उपेक्षा फर्श undersides मत करो।
    4. जाँच करें कि कमरे में रोशनी प्रत्येक दिन की शुरुआत में (बंद या मंद) उचित रूप से स्थापित कर रहे हैं।
    5. साथ आगे बढ़ें कि क्या यह एक "परीक्षण" या "कंडीशनिंग" दिन के अनुसार निम्नलिखित है:
      1. पर परीक्षण दिन 1 और 6 (यानी, पूर्व और बाद के परीक्षण), अंतर-कक्ष के दरवाजे खुले स्थान (चित्रा 2 बी) में जगह है।
      2. "परीक्षण" कंप्यूटर प्रोग्राम लोड और पशु आईडी (चित्रा 1 ए) दर्ज करें, यदि लागू हो, कमांड शुरू (चित्रा 1 बी) तब जारी करते हैं।
      3. धीरे कम अपने सौंपा तंत्र के बीच चैम्बर, पीछे की दीवार का सामना करना पड़ में प्रत्येक माउस, और धीरे से ढक्कन बंद कर दें। एक बार सभी कक्षों लोड कर रहे हैं, परीक्षण के कमरे छोड़ने के लिए और शोर को कम।
      4. प्रत्येक तंत्र के अंदर चूहों छोड़ दें जब तक सभी चूहों के लिए परीक्षण बंद कर दिया है / समाप्त हो गया (चित्रा 1 सी)। निर्यात परीक्षण डेटा।
      6. <li> बस से पहले या पूर्व परीक्षण के बाद, जानवरों तौलना। कंडीशनिंग के दौरान खुराक की गणना के लिए इन वजन का प्रयोग करें।
    6. आदेश कंडीशनिंग परीक्षण के लिए तैयार करने के लिए, दूसरे से इनमें से प्रत्येक में खर्च (यानी, "काली घटा सफेद" और "सफेद शून्य से काला" समय को घटाकर प्रत्येक माउस के पूर्व परीक्षण काले और सफेद कक्षों के लिए "पसंद" की गणना में, देखो चित्रा 3, कॉलम 9 और 10)।
    7. चूंकि मजबूत प्रारंभिक वरीयताओं के साथ चूहों कठिन संतुलन बनाना, (जैसे, <कुल परीक्षण के समय का 33%) वरीयता स्कोर के लिए एक स्वीकार्य सीमा से स्थापित करने और चूहों कि यह गणना से अधिक हो बाहर। (बंद लक्ष्य शल्य जोड़तोड़ के कारण जैसे,) शामिल किए जाने को अधिकतम करने के लिए जब उदासीनता की संभावना है परीक्षण पूरा हो गया है के बाद एक उदार सीमा (<कुल परीक्षण के समय का 66%) का प्रयोग करें।
      नोट: सीमा से अधिक चूहों को अभी भी अपने पूर्व परीक्षण वरीयताओं को संतुलित रखने के प्रयास के साथ परीक्षण किया जा सकता है। बाद में, टीhese चूहों पूर्व टेस्ट स्कोर को संतुलित करने, विश्लेषण से बाहर रखा जा सकता है यदि आवश्यक हो, तो। चरम पूर्व परीक्षण पूर्वाग्रहों (यानी,> 800 सेकंड) अधिकतर एक समूह को प्रभावित करते हैं, तो कंडीशनिंग वातावरण में फेरबदल और / या अन्य assays के उपयोग पर विचार करें।
    8. प्रत्येक माउस के लिए दवा बाँधना कक्ष के रूप में काला या सफेद कक्ष चुनें, इस बीच मन में निम्नलिखित प्राथमिकताओं के साथ प्रत्येक समूह के भीतर इसी पूर्व परीक्षण वरीयता स्कोर संक्षेप:
      नोट: प्रत्येक पलटन के भीतर के साथ ही किसी भी पिछले साथियों भर में समूहों के बीच संतुलन के लिए स्कोर ख्याल रखना।
      1. संभव के रूप में बराबर के रूप में सभी समूहों के लिए रकम बना।
      2. के रूप में शून्य के रूप में संभव है (यानी, कुछ चूहों और दूसरों के लिए गैर-वरीय पक्ष के लिए पसंदीदा पक्ष का चयन) के करीब रकम बना। तो एक के पास शून्य राशि किसी भी समूह, के लिए असंभव है बारीकी से सीमित समूह के लिए सबसे अच्छा प्राप्य स्कोर के मैच के लिए सभी दूसरों को फिर से समायोजित, के पक्ष में थोड़ा नकारात्मक समूह पर रकमसकारात्मक।
      3. जितना संभव, सफेद और बनाम भी प्रत्येक समूह के भीतर दवा pairings के लिए गैर-वरीय कक्षों को प्राथमिकता बनाम काले रंग का कार्य रखने के लिए।
      4. यह ऊपर के लक्ष्यों को पूरा करने के लिए हमेशा संभव नहीं है के रूप में, बाद में साथियों के विरोध में संतुलन विचार करने से किसी भी विचलन को सही; हालांकि, बेतहाशा अलग औसत पूर्व परीक्षण वरीयताओं के साथ साथियों के उत्पादन से बचने के लिए प्रयास करें।
    9. कंडीशनिंग दिन 2-5 पर, बंद की स्थिति (चित्रा -2) में अंतर-कक्ष के दरवाजे जगह है।
    10. कोकीन के साथ अलग-अलग सीरिंज तैयार (दिन 2 और 4) या खारा (3 दिन और 5) समाधान, चरण 1.1.5 में वर्णित है और पूर्व परीक्षण पर मापा शरीर के वजन के आधार पर के रूप में।
      नोट: खुराक प्रयोगात्मक उम्मीदों के संबंध में विचार परिचय में उल्लेख किया है, और संभावित फर्श और छत प्रभाव के साथ चुना जाना चाहिए। यह अक्सर कम से कम दो अलग अलग मात्रा का उपयोग करते हुए स्वतंत्र प्रयोगों का संचालन करने के लिए सबसे अच्छा है।
    11. लोड "गonditioning "कंप्यूटर प्रोग्राम और दर्ज पशु आईडी (चित्रा 1 ए), तो, कमांड शुरू (चित्रा 1 बी) जारी यदि लागू हो।
    12. कूड़ा और प्रत्येक माउस (आईपी) इंजेक्षन, तुरंत उन्हें अपने नियत तंत्र पीछे की दीवार का सामना करना पड़ उचित काला या सफेद कक्ष में कम है, तो धीरे से ढक्कन बंद करें। एक बार सभी कक्षों लोड कर रहे हैं, परीक्षण के कमरे छोड़ने के लिए और शोर को कम।
    13. उनकी कक्ष से चूहों के रूप में संभव के रूप में ठीक 30 मिनट (यानी, पहले चूहों को अपने कक्षों से हटा दिया जाता है, जबकि अन्य चूहों अभी भी कंडीशनिंग कर रहे हैं) के करीब निकालें। जानवरों हटाये रूप में चुपचाप संभव के रूप में, शोर शुरू करने के बिना।
  3. सांख्यिकीय विश्लेषण:
    1. विश्लेषण का एक तरीका चुनें। या तो घटाना समय-समय पर पोस्ट-परीक्षण के दौरान खारा बनती पक्ष पर खर्च के बाद टेस्ट (कोकीन - खारा, एसईसी) के दौरान कोकीन बनती पक्ष पर खर्च या समय के बाद परीक्षण दवा बनती चैम्बर में खर्च का उपयोगशून्य से पूर्व परीक्षा का समय दवा बनती चैम्बर पर खर्च किया।
      नोट: पहली विधि का उपयोग करते हैं, तो भी औसत समय की साजिश लाइन रेखांकन प्रत्येक समूह के लिए पूर्व और बाद के परीक्षण के दौरान मध्य, saline- और दवा बनती कक्षों में बिताया। पूर्व परीक्षण की तुलना में, के बाद परीक्षण दवा बनती पक्ष में बढ़ समय दिखाने के लिए और खारा बनती पक्ष (चित्रा 6, नीचे, और चर्चा स्पष्टीकरण के लिए देखें) में बिताए समय की कमी आई चाहिए।
    2. प्रकृति और समूहों की संख्या पर निर्भर करता है की तुलना में किया जा रहा है, एक टी परीक्षण का उपयोग करें, एक या दो तरह से एनोवा, उचित संभवतः पद अस्थायी विश्लेषण के साथ, ऊपर-घटाव प्रस्तुत स्कोर का विश्लेषण करने के लिए या तो के रूप में।
      नोट: कोकीन वरीयता स्कोर चर हो जाते हैं, और इसके अलावा, नकारात्मक हो सकता है (यानी, दवा बनती पक्ष को घृणा से संकेत मिलता है)। चूहों कि घृणा दिखाने नहीं हटाया जाना चाहिए (जब तक वे सांख्यिकीय outliers) कर रहे हैं, क्योंकि इस परिणाम को सामान्य और जीआर के बीच मतभेद का निर्धारण करने की संभावना महत्वपूर्ण हैoups। उपचार के प्रभाव आकार पर निर्भर करता प्रति समूह 12 से 30 जानवरों का नमूना आकार की जरूरत है, उम्मीद है।

2. लोकोमोटर संवेदीकरण

  1. उपकरण और रूम सेट-अप
    1. एक 4 x 8 (एक्स एक्स वाई) photobeam सरणी (बाहर आयाम 11.5 "x 20") प्राप्त करते हैं। काले Plexiglas से बना एक खुले में सबसे ऊपर चैम्बर का निर्माण (आंतरिक आयाम 22 1/6 "x 13 ¾" एक्स 9 3/8 ") सरणी (चित्रा 4 ए) घर के लिए।
    2. इतना है कि एक लाल बत्ती (ceiling- या दीवार पर चढ़कर) परीक्षण के दौरान इस्तेमाल किया जा सकता परीक्षण के कमरे तैयार करें।
    3. दैनिक आदी होना और इंजेक्शन परीक्षण के लिए अलग कार्यक्रम सत्र तैयार करें।
      1. आदी होना परीक्षणों सेट 30-60 मिनट और इंजेक्शन परीक्षणों के बीच 60-120 मिनट (चित्रा 5 ब) के बीच होना करने के लिए। प्रत्येक के लिए सिफारिश की लंबाई 60 मिनट है। परीक्षण लंबाई ही प्रयोग के भीतर कई साथियों भर में लगातार रखें।
      2. सेट परीक्षणों शुरू करने के लिए सिफारिशपहली किरण ब्रेक के बाद शुरू संकेत (चित्रा 5 ब) शुरू किया गया है कि तब होता है पर rding। इंजेक्शन परीक्षण के लिए, शुरू संकेत तो यह है कि व्यक्तिगत रूप से शुरू किया जा सकता बक्से (सुर में) नहीं है, यदि संभव हो तो निर्धारित किया है।
      3. सेट किरण टूटता उपयोगकर्ता परिभाषित में दर्ज होने की "डिब्बे," अधिमानतः 5 मिनट प्रत्येक (चित्रा 5 ब)।
    4. कोकीन समाधान के हाथ में प्रयोग के लिए आवश्यक की पूरी मात्रा तैयार करें। कोकीन एचसीएल, 0.9% सोडियम क्लोराइड (खारा) में भंग 0.1 मिलीग्राम / 10 ग्राम शरीर के वजन का एक इंजेक्शन की मात्रा पर आधारित अंतिम एकाग्रता (5 मिलीग्राम / किग्रा की एक खुराक के लिए, उदाहरण के लिए, समाधान एकाग्रता 0.5 मिलीग्राम / एमएल) है। आरटी पर 30-45 सेकंड के लिए भंवर मिश्रण, बाँझ फिल्टर (0.2 माइक्रोन सिरिंज फिल्टर) और दुकान।
  2. परिक्षण
    नोट: परीक्षण के प्रारंभिक चरण में लगातार 10-11 दिनों के लिए चलाता है। आदी होना (इंजेक्शन मुक्त) और इंजेक्शन: चूहे दो दैनिक परीक्षणों प्राप्त करते हैं। पहले तीन एफ के लिए खारा प्रशासनहमारे दिन (खारा आदी होना करने के महत्व पर चर्चा के लिए देखें), और कोकीन अगले सात के लिए एक ही खुराक (जैसे।, 15 मिलीग्राम / किग्रा / दिन) का उपयोग कर।
    1. प्रत्येक दिन, 1 घंटा 30 मिनट के लिए प्रतीक्षा कक्ष में व्यवहार करने के लिए उनके घर पिंजरों में चूहों acclimate।
    2. ताजा बिस्तर (जैसे, पाइन चिप्स) की एक अत्यंत पतली परत के साथ स्वच्छ मानक माउस के आकार स्पष्ट एक्रिलिक आवास पिंजरों तैयार करें, ताकि के रूप में नहीं अस्पष्ट photobeams, यदि लागू हो (चित्रा 4C एंड डी)।
    3. एक छोर के पास photobeam सरणी के वाई अक्ष के खिलाफ जगह पिंजरों, इतना है कि पांच मुस्कराते हुए इसकी लंबाई के साथ समान रूप से स्थान दिया गया है। एक्स अक्ष मुस्कराते हुए इस परीक्षण (चित्रा 4C एंड डी) में इस्तेमाल नहीं कर रहे हैं।
    4. यादृच्छिक क्रम, कूड़ा में उनके घर के पिंजरे से चूहों को ले लो, और उन्हें तौलना। सीधे अपने नियत हरकत पिंजरे में उनके पूंछ (समर्थन के साथ) और जगह के आधार से तौलना नाव से प्रत्येक माउस निकालें। एक मानक फिल्टर ऊपर ढक्कन के साथ प्रत्येक पिंजरे कवर।
    5. अलग-अलग सीरिंज डब्ल्यू तैयारith खारा या कोकीन समाधान, चरण 2.1.7 में वर्णित है, वर्तमान दिन के शरीर के वजन के आधार पर के रूप में। 15 या 20 मिलीग्राम / किग्रा की एक खुराक के साथ शुरू, और एक उच्च या कम खुराक का उपयोग कर एक दूसरे प्रयोग पर विचार (प्रासंगिक कारकों के लिए चर्चा देखें)।
    6. एक बार आदी होना परीक्षणों सभी पिंजरों के लिए खत्म हो गया है, इंजेक्शन प्रोग्राम लोड।
    7. एक समय में एक, उनके परीक्षण पिंजरे, कूड़ा से चूहों को निकालने और उनके इंजेक्शन (आईपी) दे। इसके परीक्षण पिंजरे के लिए माउस लौटने से पहले, जल्दी है कि पिंजरे (चित्रा 5C, नीचे) के लिए शुरू संकेत आरंभ करें।
    8. इंजेक्शन के बाद सभी परीक्षणों के समाप्त हो गया है, उनके घर पिंजरों और उनके आवास के कमरे में चूहों वापसी।
    9. मूल, आधा खुराक, डबल खुराक, तो खारा के रूप में एक ही खुराक, सात दिनों में एक ही खुराक चुनौती पहले और 3-7 की इजाजत दी: अगर वांछित, चूहों में इस तरह के रूप में निम्नलिखित वापसी उस समय और दवा चुनौतियों की एक श्रृंखला से गुजरना करने की अनुमति प्रत्येक अतिरिक्त चुनौती पहले दिन। जो भी चुनौतियों का चुनाव, maintaiएक प्रयोग के भीतर साथियों भर n समान अवधि वापसी।
      नोट: मूल खुराक उच्च (जैसे, 30 मिलीग्राम / किलो या अधिक) है, तो डबल खुराक को छोड़ दिया या एक कम खुराक के साथ प्रतिस्थापित किया जाना चाहिए। खारा चुनौती अकेले कोकीन बनती पर्यावरण से किसी भी वातानुकूलित हरकत सक्रियण का पता चलता है, और इस प्रक्रिया में अवगत हरकत की राशि है कि कोकीन निर्भर है (चर्चा देखने के लिए)।
  3. सांख्यिकीय विश्लेषण
    1. कि विश्लेषण के लिए इस्तेमाल किया जाएगा प्रत्येक परीक्षण के भाग (ओं) का चयन करें। मूषक में अधिकांश कोकीन प्रेरित हरकत पहली ~ 15-30 मिनट के बाद दवा इंजेक्शन के भीतर होता है। शामिल चर पर निर्भर करता है, पर विचार कई बार Windows (जैसे, पहले 15, 30, 60 और / या 120 मिनट) के लिए संचयी हरकत का विश्लेषण या परीक्षण के स्वतंत्र क्षेत्रों पर ध्यान केंद्रित।
    2. समय सीमा के चुने का उपयोग करना, अलग से और फिर एक आदी होना और इंजेक्शन परीक्षण के लिए दिन के द्वारा प्रत्येक जानवर के लिए बीम टूट जाता है योगप्रत्येक समूह के लिए रकम verage। प्लॉट का मतलब है और सभी दिनों में एक लाइन ग्राफ में मतलब (SEM) के मानक त्रुटियों। उपचार कैसे चूहों जल्दी और / या देर से प्रत्येक दैनिक परीक्षण में दवा का जवाब है, बदल सकता है के रूप में भी एक दैनिक परीक्षण के पाठ्यक्रम पर 5 मिनट बिन द्वारा औसत समूह किरण टूटता साजिश है।
      नोट: आदी होना और इंजेक्शन परीक्षण के लिए दैनिक गतिविधि का औसत (जैसे, पहले 15 मिनट) की साजिश रचने यह कृत्रिम रूप से दिखाई देते हैं कि हरकत खारा इंजेक्शन से घटा है, लेकिन याद रखें कि गतिविधि है (सबसे अधिक संभावना) आदी होना के अंत में प्रत्येक दिन से इस स्तर तक गिरावट आई है बनाता है ।
    3. लगातार खारा और नशीली दवाओं के उपचार के दिन का उपयोग कर अलग से दोहराया उपायों (आरएम) ANOVAs, दिन / समय के भीतर-विषयों के कारक होने और उचित रूप में डिजाइन में किसी के बीच-विषयों कारकों सहित विश्लेषण। कोकीन (तीव्र जोखिम) के दिन 1 पर समूह मतभेद, और चुनौतियों के लिए एक बहुभिन्नरूपी एनोवा जांच के लिए एक टी परीक्षण या एक तरह से एनोवा का प्रयोग करें। जब उचित हो, significanc का पालन करेंपोस्ट अस्थायी परीक्षण या Univariate ANOVAs के साथ ई।

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Representative Results

सीपीपी परख से प्रतिनिधि के परिणाम पर लगभग उम्र के नौ हफ्तों जंगली प्रकार C57BL / 6N चूहों का उपयोग 6 चित्र में दिखाया गया है। अध्ययन डिजाइन टेस्ट (पहले और बाद) के एक के भीतर विषयों चर के साथ एक 2 एक्स 3 मिश्रित भाज्य था, और एक उपचार (खारा और कोकीन 5 और 10 मिलीग्राम / किग्रा) के चर के बीच-विषयों। एक आर एम एनोवा टेस्ट और उपचार (एफ 2,20 = 3.68, पी <0.05) है, जो महत्वपूर्ण मुख्य दोनों टेस्ट के लिए मनाया प्रभाव के एवज में व्याख्या की गई थी के बीच एक महत्वपूर्ण बातचीत से पता चला है (एफ 1,20 = 9.86, पी <0.01) और उपचार (एफ 1,20 = 4.37, पी <0.05)। पोस्ट अस्थायी तुलना से पता चला कि समूहों में से कोई भी पूर्व परीक्षण के दौरान एक दूसरे से भिन्न है। बाद परीक्षण में 5 मिलीग्राम / किग्रा और 10 मिलीग्राम / किग्रा काफी एक दूसरे से अलग नहीं किया था; 10 मिलीग्राम / किलो, पी एंड; 5 मिलीग्राम / किलो, पी <0.5: हालांकि, दोनों समूहों खारा केवल नियंत्रण समूह की तुलना में कोकीन बनती कक्ष के लिए काफी अधिक वरीयता (Tukey का पता चला# 60; 0.01)। इसके अलावा, Bonferroni पोस्ट अस्थायी परीक्षणों से पता चला है कि दोनों 5 (पी <0.05) और 10 (पी <0.05) मिलीग्राम / किग्रा समूहों, पूर्व परीक्षण की तुलना में बाद के परीक्षण पर कोकीन बनती पक्ष के लिए अधिक से अधिक वरीयता दिखाया जबकि खारा -saline समूह पूर्व से बाद के परीक्षण करने के लिए कोई परिवर्तन नहीं दिखाया।

हरकत परख से प्रतिनिधि परिणाम अलग प्रयोगों है कि पहले प्रकाशित किया गया 18 की एक श्रृंखला से जंगली प्रकार C57BL / 6N littermate नियंत्रण चूहों का उपयोग चित्रा 7A & B में दिखाया जाता है। 3-4 दिनों के लिए खारा इंजेक्शन के लिए दशानुकूलन के बाद, चूहों सात दिनों के लिए 5, 10, 15 या 30 मिलीग्राम / किग्रा प्रति दिन से कम एक कोकीन इंजेक्शन (आईपी) प्राप्त किया। एक सात या 14 दिन की अवधि के बाद वापसी, प्रत्येक समूह के मूल खुराक पर एक कोकीन चुनौती मिली, तो आगे (चर) वापसी की अवधि के बाद, कुछ दिखाया गया है, अन्य मात्रा में कोकीन अतिरिक्त चुनौतियों प्राप्त किया। locom पर कोकीन की खुराक प्रभाव का प्रदर्शन करने के उद्देश्य के लिएotor वर्तमान प्रकाशन में संवेदीकरण, चार अलग अलग खुराक समूहों के साथ एक 4 x 7 मिश्रित भाज्य डिजाइन में संयुक्त थे, एक के भीतर विषयों दिवस (पहले 7 कोकीन इंजेक्शन) के चर और खुराक की एक के बीच-विषयों के कारक। एक आर एम एनोवा खुराक और दिन के बीच एक महत्वपूर्ण बातचीत (एफ 18276 = 12.53, पी <0.0001), जो बजाय महत्वपूर्ण मुख्य प्रभाव भी है कि दोनों दिन के लिए मनाया गया की व्याख्या की गई थी दिखाया (एफ 6276 = 18.25, पी <0.0001) और खुराक ( एफ 3,46 = 22.63, पी <0.0001)। Tukey के पोस्ट अस्थायी विश्लेषण के 5 और 15 मिलीग्राम / किग्रा (पी <0.0001), 5 और 30 मिलीग्राम / किग्रा (पी <0.0001), और 10 और 15 मिलीग्राम / किग्रा (पी <0.01) के बीच महत्वपूर्ण अंतर दिखाया समग्र। जब समूहों को एक दिन की तुलना में थे महत्वपूर्ण मतभेद की एक संख्या मनाया गया। यहां यह ध्यान दिया दिवस 1 कोकीन (5 बनाम 30 मिलीग्राम / किलो, पी <0.01, 10 बनाम 30 मिलीग्राम / किलो, पी <0.05, 15 बनाम 30 मिलीग्राम / किलो, पी <0.01) के लिए मतभेद हैं और 7 दिन कोकीन ( 5 बनाम 10 मिलीग्राम / किलो, पी <0.05, 5 बनाम 15 मिलीग्राम / किलो, पी <0.0001, 10 बनाम। 15 मिलीग्राम / किलो, पी <0.01; 15 बनाम 30 मिलीग्राम / किलो, पी <0.0001)। चित्रा 7C हरकत संवेदीकरण है कि राशि के उपचार समूहों के अलग हो सकता है के प्रमुख पहलुओं को दर्शाता हुआ नकली आंकड़ों से पता चलता है। इन सुविधाओं के लिए स्वतंत्र रूप से यहाँ सचित्र कर रहे हैं, यह भी उसके संयोजन में मतभेद का निरीक्षण करने के लिए संभव है।

आकृति 1
चित्रा 1. मेड पीसी सीपीपी बुनियादी सत्र नियंत्रण। (ए) मूलभूत प्रदर्शन, खुले सत्र आइकन (लाल बॉक्स), और खुले सत्र संवाद बॉक्स (इनसेट)। "कस्टम फ़ाइल नाम" का चयन करें और डेटा फ़ोल्डर में नेविगेट और सत्र के नाम करने के लिए फ़ोल्डर खिड़की का उपयोग करें। "प्रक्रिया" ड्रॉप डाउन सूची में से उपयुक्त प्रोग्राम का चयन करें। उपयोग में प्रत्येक बॉक्स के लिए, बॉक्स नंबर की जांच और इस विषय, प्रयोग, और समूह के बक्से में उचित जानकारी दर्ज करें। (बी) लोड चैम्बर प्रदर्शन, संकेत चिह्न (नीले बॉक्स) शुरू, और हस्ताक्षर भेजनेअल संवाद बॉक्स (इनसेट)। एक बार सभी चैम्बर डेटा दर्ज किया गया है, का चयन कक्षों लोड करने के लिए और इस मुद्दे को शुरू संकेत। मंडलों अब किरण-तोड़ से शुरू हो जाएगा सत्र टाइमर शुरू और डेटा इकट्ठा करने के लिए। (सी) को समाप्त सत्र प्रदर्शन। प्रत्येक कक्ष नामित कार्यक्रम पूरा के रूप में, डेटा संग्रह क्षेत्र (हरे बॉक्स) स्थिर हो जाएगा और चैम्बर जानकारी क्षेत्र (नारंगी बॉक्स) कक्षों दिखाएगा 'के रूप में बंद कर दिया। " यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्र 2
चित्रा 2 सीपीपी चैम्बर विन्यास। (ए) नमूना प्रयोगात्मक समय लाइन। पूर्व परीक्षण दैनिक बारी कोकीन (ग्रे) और खारा (सफेद) कंडीशनिंग सत्र के बाद है। बाद परीक्षण पिछले कंडीशनिंग सत्र के बाद 24 घंटे का आयोजन किया जाता है। ( बी) के पूर्व और बाद के परीक्षण सत्र में उपयोग के लिए चैम्बर विन्यास खोलें। ध्यान दें कि अंतर-कक्ष के दरवाजे उठाया / खुला स्थिति में हैं। (सी) कंडीशनिंग सत्र में प्रयोग के लिए बंद कक्ष विन्यास। ध्यान दें कि मैनुअल दरवाजे कक्षों के बीच कोई उपयोग के साथ, कम कर रहे हैं। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्र तीन
चित्रा 3. के लिए सीपीपी। उदाहरण गणना और लक्ष्यों को जब सीपीपी में पूर्व टेस्ट स्कोर संतुलन दिखा बैलेंस्ड डिजाइन गणना। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

ig4.jpg "/>
चित्रा 4. लोकोमोटर चैंबर विन्यास। (ए) बाहरी कक्ष काला अपारदर्शी बॉक्स जो अंदर फिट बैठता किरण सरणी (बी) के होते हैं। आवास / जूता बॉक्स आकार बिस्तर कक्षों की एक पतली परत (सी) के साथ भरा जाना चाहिए और गठबंधन इतना है कि समान रूप से मुस्कराते हुए (डी) लंबी अक्ष के साथ वितरित कर रहे हैं। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 5
चित्रा 5. लोकोमोटर चैंबर कंप्यूटर ऑपरेशन। (ए) डिफ़ॉल्ट कंप्यूटर प्रोग्राम। नए सत्र डेटाबेस (नीले बॉक्स और इनसेट) की शुरुआत करें। एक प्रयोग (नीला उप इनसेट) के लिए फाइल और निर्देशिका का नाम बदलें। अद्वितीय पहचानकर्ता के साथ नए सत्र (लाल बॉक्स और इनसेट) बनाएँ। सत्र संपादित करें (लाल इनसेट) और एनचैम्बर टैब में आतंकवाद पशु पहचानकर्ता जानकारी (हरे बॉक्स और इनसेट) और शुरू की स्थापना / प्रत्येक सत्र प्रकार (नारंगी बॉक्स) के लिए नियंत्रण करना बंद करो। (ख) प्रत्येक सत्र के प्रकार के लिए उचित शुरू रोक नियंत्रण का चयन करें। 300 सेकंड के अंतराल लंबाई निर्धारित करें और प्रति चरण (1 घंटा सत्र के लिए) 12 अंतराल (5 मिनट के बिन के लिए)। आदी होना सत्र (बाएं) के लिए, कक्षों सुर में शुरू करने के लिए (मैन्युअल चरण ... एक सुर में सभी सक्षम करें) शुरू हो जाएगा और पहली किरण ब्रेक के बाद तुरंत गतिविधि के लिए निगरानी शुरू हो जाएगा। इंजेक्शन सत्र (दाएं) के लिए, अलग-अलग कक्षों से शुरू हो जाएगा (मैन्युअल चरण सक्षम करें ... व्यक्तिगत रूप से परदे पर बटन) और तुरंत पहली किरण ब्रेक के बाद गतिविधि के लिए निगरानी शुरू हो जाएगा। जब कुल चरण समय व्यक्तिगत रूप से प्रत्येक कक्ष के लिए समाप्त हो गया है दोनों प्रकार के सत्र खत्म हो जाएगा। (सी) एक बार सत्र शुरू कर दिया गया है, आदी होना सत्र "सब शुरू" बटन (ऊपर) का चयन करके शुरू किया जा सकता है। ध्यान दें कि Trigg के बादering, सभी कक्षों सत्र शुरू करने के लिए पहली किरण को तोड़ने के लिए इंतजार कर रहे होंगे। इंजेक्शन सत्र के लिए, प्रत्येक कक्ष शुरू किया जा सकता स्वतंत्र रूप से (नीचे)। ध्यान दें कि अलग-अलग कक्षों ट्रिगर करने के बाद (जबकि पशु इंजेक्शन के लिए चैम्बर से बाहर है), कक्षों सत्र शुरू करने के लिए पहली किरण को तोड़ने के लिए इंतज़ार कर रहा होगा। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 6
चित्रा 6. प्रतिनिधि सीपीपी का परिणाम है। (ऊपर) सीपीपी में, चूहों, एक कक्ष में पहले से कोकीन (या तो 5 या 10 मिलीग्राम / किग्रा) के साथ रखा के लिए महत्वपूर्ण वरीयता दिखाया जबकि चूहों कि दोनों कक्षों में खारा pairings प्राप्त किसी भी वरीयता विकसित नहीं किया। कॉलम संक्षिप्त ही परीक्षण ती पर संतोष व्यक्त किया समूह की तुलना में लेबल बार से महत्वपूर्ण के बीच-समूह मतभेद निरूपितमुझसे बात। (नीचे) पूर्व और बाद के परीक्षण के दौरान बनाम खारा बनती कक्षों cocaine- में बिताए समय की साजिश रचने के द्वारा, कोकीन बनती पक्ष में बढ़ जाती है 5 और 10 मिलीग्राम / किग्रा समूहों है कि समय की कीमत पर कर रहे हैं में देखा जा सकता है दोनों खारा बनती और मध्य कक्षों में बिताया। इसके विपरीत, वहाँ खारा नियंत्रण समूह में पूर्व और बाद के परीक्षण के बीच किसी भी कक्ष में बिताए समय में कोई हड़ताली मतभेद थे। के रूप में प्रस्तुत डाटा ± SEM मतलब है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 7
चित्रा 7. प्रतिनिधि हरकत संवेदीकरण परिणाम (ए) के पहले 20 चार अलग-अलग खुराक के लिए प्रत्येक दैनिक परीक्षण के मिनट के लिए संचयी बीम टूट जाता है। 5, 10, 15 और 30 मिलीग्राम / किग्रा प्रकार के जंगली चूहों में same-, आधा द्वारा पीछा किया , डबल खुराक एकडी खारा चुनौतियों, (18) से संशोधित किया। सभी समूह अंतिम कोकीन प्रदर्शन के बाद एक ही खुराक चुनौतियों या तो एक (10, 15, 30 मिलीग्राम / किग्रा) या दो (5 मिलीग्राम / किग्रा) सप्ताह प्राप्त किया। कुछ समूहों आगे की चुनौतियों, जो चर वापसी समय पर प्रदर्शन किया गया प्राप्त किया। (बी) हरकत डेटा (बीम टूट जाता है) 15 मिलीग्राम / किलो कोकीन संवेदीकरण प्रयोग के दौरान दैनिक परीक्षण के लिए 5 मिनट बिन द्वारा अभिव्यक्त का प्लॉट। (ग) दो उपचार समूहों है कि मुख्य रूप से (बाएं) तीव्र प्रतिक्रिया कोकीन मतभेद, (मध्य) एक संवेदीकरण दर अंतर या (दाएं) अधिक से अधिक संवेदनशील बनाने में मतभेद द्वारा संचालित कर रहे हैं के लिए संवेदीकरण हरकत में मतभेद दिखा रेखांकन। के रूप में प्रस्तुत डाटा ± SEM मतलब है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

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Discussion

इस प्रोटोकॉल वातानुकूलित जगह वरीयता और हरकत संवेदीकरण, जिनमें से प्रत्येक औसत लैब द्वारा इस्तेमाल किया जा सकता दवा प्रेरित व्यवहार प्लास्टिसिटी के पहलुओं का आकलन करने के लिए तरीके को दर्शाता है। सबसे व्यवहार परीक्षण के साथ के रूप में, वहाँ बुनियादी प्रोटोकॉल से परे अतिरिक्त योग्य विचार कर रहे हैं। सबसे पहले, इन तकनीकों में से प्रत्येक को दो चरणों, प्रेरण और अभिव्यक्ति के रूप में होने की कल्पना की जा सकती है। "प्रेरण" व्यवहार के लिए सीपीपी यह कंडीशनिंग के दौरान होता है के विकास को शामिल किया गया है, और संवेदनशील बनाने के लिए यह (आमतौर पर लगातार) दवा जोखिम की प्रारंभिक अवधि है। जबकि संवेदनशील बनाने के लिए यह या तो वापसी के बाद या बस पिछले लगातार जोखिम के रूप में दी गई एक दवा चुनौती के रूप में परिभाषित किया जा सकता सीपीपी के लिए "अभिव्यक्ति", पोस्ट-परीक्षण है।

यह अन्य बनाम इन चरणों बेहतर उनके संभावित प्रभाव पार्स करने से एक के लिए सीमित जोड़तोड़ विचार करने के लिए सार्थक है। अस्थायी सीमित प्रभाव के साथ वाइरस (जैसे, एचएसवी) या नशीली दवाओं के सह-प्रशासन / pretreatments (जैसे, एगोनिस्ट / विरोधी) इस तरह के प्रयासों में उपयोगी होते हैं। जब इस दृष्टिकोण ले रही है, यह इतना है कि एक विशेष चरण बेहतर वायरल अभिव्यक्ति के साथ मेल खाना होगा आगे संकुचित प्रोटोकॉल का उपयोग करने के लिए आवश्यक हो सकता है। सीपीपी के लिए, यह दो दिवसीय कंडीशनिंग विधि का संचालन करने के रूप में हम पहले 37 वर्णन किया है संभव है। विशेष रूप से हरकत संवेदनशील बनाने के लिए, प्रेरण और इन तरीकों के साथ संयुक्त अभिव्यक्ति के बीच वापसी की अवधि में परिवर्तन, रखरखाव या व्यवहार की स्थिरता में शामिल प्रक्रियाओं को उजागर कर सकता है। इसके अलावा, इस तरह के दृष्टिकोण पार संवेदीकरण, जहां एक अवगत व्यवहार एक दवा का उपयोग प्रेरित है, लेकिन एक अलग दवा के लिए जोखिम से व्यक्त किया जा सकता है की घटना का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। चूंकि पार संवेदीकरण दुरुपयोग के सभी संवेदनशील दवाओं के बीच उत्पन्न नहीं होती है, एक अवगत व्यवहार है कि मूल से कुछ हद तक अलग है बटोर सकता है, और जरूरी के लिए द्वि-दिशा नहीं हैदवाओं के किसी भी सेट दिया, इसकी परीक्षा समझने के लिए कहाँ और कैसे विभिन्न दवाओं मस्तिष्क plasticity और कार्य प्रभावित अद्वितीय अवसर प्रदान कर सकता है।

सीपीपी की उचित व्याख्या, विशेष रूप से, निष्कर्षों के वैकल्पिक स्पष्टीकरण बाहर सत्तारूढ़ पर निर्भर करता है। एक तीन संभाग तंत्र में उत्पन्न डेटा आगे, वरीयता के रूप में पद-परीक्षण में कोकीन बनती तरफ से खारा बनती पक्ष में बिताए समय के घटाव को परिभाषित करने से पहले जाँच की जाना चाहिए दवा बनती पक्ष के लिए एक प्राथमिकता में वृद्धि के बाद से उस खारा बनती कक्ष में बिताए समय में कमी से पूरी तरह से परिणाम की संभावना ऐसी व्याख्या के लिए अयोग्य है। बीच चैम्बर के बाद से माउस समय बदल सकता है वहाँ दवा बनती चैम्बर के बजाय खर्च इस परिणाम के लिए अनुमति देता है। यह भी बढ़ समय खारा बनती पक्ष के बजाय बीच चैम्बर की कीमत पर दवा बनती पक्ष में खर्च किया निरीक्षण करने के लिए संभव है; यकीनन, इस परिणाम अभी भी स्वीकार्य interpre हो सकता हैदवा वरीयता में वृद्धि के रूप में टेड। तीसरे डिब्बे के शामिल किए जाने के लिए एक तटस्थ कक्ष है कि पूर्व और बाद के परीक्षण सत्र के दौरान 41 पशु की निष्पक्ष नियुक्ति की अनुमति देता है। हालांकि परीक्षा दिन के स्कोर में योगदान दे प्रारंभिक नियुक्ति पूर्वाग्रहों को संबोधित करने के लिए उपयोगी है, तीसरे चैम्बर कंडीशनिंग के लिए आवश्यक नहीं है। वैकल्पिक सीपीपी डिजाइन है कि दो अलग-अलग डिब्बों या विभिन्न प्रोत्साहन विन्यास के साथ एक ही डिब्बे में शामिल कहीं और 41-42 चर्चा कर रहे हैं।

एक दवा के लिए जगह वरीयता में कोई घाटा भी प्रासंगिक संघों और सामान्य इनाम समारोह में जानने के लिए दोनों की क्षमता के आकलन के साथ किया जाना चाहिए। समायोजन की एक संख्या है कि सीपीपी प्रतिमान करने के लिए किया जा सकता है कि कर सकते हैं बढ़ रही है (या कम) pairings की संख्या या अधिक या कम दवा का उपयोग करके यूसीएस (दवा) की प्रमुखता को संशोधित करने सहित बदल वरीयता, की व्याख्या में सहयोगी खुराक। सीपीपी स्वादिष्ट के लिए उपयोग किया जा सकताआयुध डिपो (जैसे, उच्च वसा, सूक्रोज) या सामाजिक संबंधों का आकलन है कि मनाया परिवर्तन दवा के लिए विशिष्ट है या प्राकृतिक पुरस्कार के लिए प्रासंगिक है; गैर-सीपीपी इस उद्देश्य के लिए उपयोगी शामिल intracranial आत्म उत्तेजना, सूक्रोज वरीयता, और / या भूख बढ़ाने वाला दृष्टिकोण कार्यों दृष्टिकोण। हालांकि, इन विकल्पों में से सभी के लिए पर्याप्त रूप से वांछित सवाल का पता करने के लिए अपनी क्षमता में भिन्नता है। के बाद से सामान्य प्रतिक्रियाएं एक प्राकृतिक इनाम के साथ सीखते हैं और उचित प्रासंगिक संघों के रूप में करने की क्षमता प्रदर्शित खाद्य आधारित सीपीपी विशेष रूप से लाभप्रद हो सकता है। सीखने की क्षमता का आकलन करने के लिए अतिरिक्त नियंत्रण कार्य है कि प्रासंगिक सीखने / स्मृति (प्रासंगिक डर कंडीशनिंग और सीपीए) पर भरोसा शामिल हैं। सीपीए एक प्रतिकूल अनुभव (जैसे, लिथियम क्लोराइड इंजेक्शन) के साथ भूख बढ़ाने वाला दवा की जगह है, अक्सर एक ही कक्ष में सीपीपी को इसी तरह से चलाया जा रहा है, का लाभ दिया है। पशु कि सीपीपी में घाटा, लेकिन सामान्य सीपीए दिखाने के लिए, उचित प्रासंगिक एसोसिएशन फार्म करने की क्षमता प्रदर्शितएस, जो इंगित करता है कि दवा सीपीपी में दोष सबसे अधिक संभावना पुरस्कृत करने के लिए (दवा-विशिष्ट या अन्यथा) से संबंधित हैं। सीपीए लिथियम क्लोराइड का उपयोग पर विचार करने के लिए एक चेतावनी है कि क्या इस दवा के किसी भी शर्त है कि प्रायोगिक पशुओं से मॉडलिंग की जा सकती है के लिए एक ज्ञात इलाज है। उदाहरण के लिए, लिथियम उपचार नाजुक एक्स 43 के माउस मॉडल है, जो इस पर नियंत्रण विधि उलझाना होगा सीखने में घाटे प्रतिक्रिया करने के लिए दिखाया गया है।

क्लासिक सीपीपी प्रतिमान के अलावा, वहाँ संभावित एक्सटेंशन, ऐसे सीखा दवा संदर्भ एसोसिएशन के परीक्षण के विलुप्त होने और सीपीपी के बाद अपनी बहाली के रूप में उपयोगकर्ताओं उपयोगी पा सकते हैं। वातानुकूलित प्रतिक्रियाओं (सीआरएस), एक बार स्थापित, विस्तारित अवधि के लिए बनाए रखा जा सकता है जब जानवरों 19,20 अबाधित छोड़ दिया जाता है। सीआर के रिश्तेदार हठ के बावजूद, इसे प्रभावी ढंग से सीएस (संदर्भ) यूसीएस (दवा) के अभाव में बार-बार प्रस्तुतियों से बुझा जा सकता है। दो सीपीपी विलुप्त होने के तरीकों लिट में दिखाई देते हैंerature: इंजेक्शन 21 या 22 वाहन के साथ पहले दवा बनती पक्ष की फिर से pairings बिना दोहराया परीक्षण जोखिम। विलुप्त होने की प्रक्रिया, नया सीखने को प्रतिबिंबित मूल कंडीशनिंग, एक विचार प्रभावी ढंग के माध्यम से प्रदर्शन की "unlearning" के लिए विरोध के रूप में "बहाली।" बहाली प्रतिष्ठित यूसीएस, जो सीआर की वसूली का उत्पादन करने के लिए फिर से जोखिम से शुरू हो रहा है। सीपीपी के संदर्भ में, प्रशिक्षण दवा का एक इंजेक्शन जानवरों जगह वरीयता को दिखाने के लिए कारण होगा। दिलचस्प बात यह है कई गैर प्रशिक्षण दवा संकेतों ने भी सीपीपी की बहाली, वैकल्पिक दवाओं के साथ 22 भड़काना और तनाव 23-26 की एक किस्म सहित उत्पादन कर सकते हैं। विलुप्त होने और बहाली प्रयोगों नशीली दवाओं के उपचार और पतन के मॉडल के रूप में मादक पदार्थों की लत क्षेत्र के लिए विशेष रुचि के हैं। हस्तक्षेप कि विलुप्त होने की दर में सुधार और / या बहाली की भयावहता को कम करने के लिए मानव pharmacotherapies के लिए बहुमूल्य लक्ष्य हो सकता है।

(जैसे, 27-29)। उल्लेखनीय है कि हालांकि, संदर्भ स्वतंत्र संवेदीकरण स्पष्ट रूप से अन्य अध्ययन (जैसे, 30-32) में प्रदर्शित किया गया है। प्रायोगिक जानकारी है कि करने के लिए है कि क्या संवेदीकरण में एक संदर्भ पर निर्भर वृद्धि दिखाई है योगदान कर सकते हैं, दवा की खुराक, जोखिम की लंबाई में शामिल है कि क्या किसी भी समूह परीक्षण ओ के लिए ले जाया जाना चाहिएएफ संवेदीकरण और परीक्षण के चैम्बर के पूर्व जोखिम के कुछ पहलुओं; हालांकि, इन विवरणों को कुछ हद तक स्पष्ट नहीं हैं। प्रासंगिक संवेदीकरण के योगदान का निर्धारण करने का एक तरीका यह दवा संवेदीकरण 33 के बाद एक खारा चुनौती दे रहा है। वर्णित प्रतिमान के उपयोग के रूप में खारा चुनौती पर पिछले अध्ययनों में बहुत कम हरकत सक्रियण इसका सबूत संदर्भ पर निर्भर संवेदीकरण के योगदान को कम करता है। संवेदीकरण के लिए प्रासंगिक योगदान कागजात की संख्या में समीक्षा की गई है, अक्सर हरकत गतिविधि 34 के अलावा अन्य व्यवहार की चर्चा भी शामिल है।

दवा प्रेरित सक्रियण और हरकत एक उपन्यास के माहौल से प्रेरित प्रभाव उत्तेजक साथ संवेदीकरण के प्रदूषण को सीमित करने के लिए, चूहों प्रत्येक प्रयोग की शुरुआत में तीन से चार दिन के लिए खारा इंजेक्शन को आदत रहे हैं। चित्रा 7 में देखा जा सकता है, चूहे आम तौर पर पहले और बीच कम हरकत दिखानेपिछले खारा दशानुकूलन दिन। इसके अलावा, चूहों काफ़ी शांत और आसान पिछले खारा जोखिम से संभाल और इंजेक्षन करने के लिए कर रहे हैं। पिछले कार्यों कई उपभेदों और चूहों के जीनोटाइप इस प्रतिमान का उपयोग कर परीक्षण किया है और उन्हें भर में खारा दशानुकूलन गतिविधि में ज्यादा विचरण नहीं देख पा रहे हैं; हालांकि, यह कभी कभी बहुत मजबूत सक्रियता विशेष जीनोटाइप कि इस पद्धति का उपयोग नहीं कर रहे हैं पर काबू पाने के साथ जुड़े phenotypes निरीक्षण करने के लिए संभव है। इन मामलों में, यह कई खारा दशानुकूलन दिन (अति सक्रिय समूह में हरकत पठारों तक) करते हैं, और फिर पिछले खारा इंजेक्शन दिन डेटा का उपयोग कर नियंत्रण समूह की अति सक्रिय समूह को सामान्य करने के लिए वांछनीय हो सकता है। जबकि आदर्श नहीं है, यह इन समूहों के बीच हरकत पर एक दवा के प्रभाव की एक अधिक उचित तुलना के लिए अनुमति देता है। अन्य विकल्प है कि चरम सक्रियता को दूर कर सकते हैं प्रत्येक दिन 5 घंटा करने के लिए एक एक करके आदी होना परीक्षण इंजेक्शन से पहले लंबाई बढ़ाने के लिए कर रहे हैं, और / या उससे अधिक समय इंजेक्शन परीक्षणों का उपयोग करें (2 - 4 घंटा) ईACH दिन।

वहाँ अतिरिक्त विचार है कि हरकत व्यवहार की व्याख्या करने के लिए महत्वपूर्ण हैं। जैसा कि चित्र में सचित्र 7C, मनाया समूह मतभेद तीव्र हरकत जवाब में असमानताओं द्वारा मुख्य रूप से संचालित किया जा सकता है, दिनों में संवेदीकरण की दर, संवेदीकरण के लिए अधिक से अधिक सीमा, या इन कारकों में से कुछ संयोजन। इन कारकों के योगदान को पार्स व्यक्तिगत रूप से सहायक हो सकता है। इस प्रयोजन के लिए, तीव्र प्रतिक्रिया हरकत सांख्यिकीय रूप से अकेले विश्लेषण किया जा सकता है। तब संवेदीकरण की दर एक कार्यक्रम वक्र ढाले और एक दर सामान्य बनाने की प्रक्रिया है कि किसी भी तीव्र हरकत मतभेद छूट के सक्षम उपयोग मूल्यांकन किया जा सकता है। बदल अधिक से अधिक संवेदनशील बनाने आमतौर पर लगातार दवा जोखिम दिनों, जहां अनुवर्ती दिन-ब-दिन के बाद तदर्थ तुलना दिनों पर महत्वपूर्ण हैं के बाद समूह की प्रतिक्रियाएं plateaued है पर एक आरएम एनोवा में पता चला है। एक यह है कि अधिक से अधिक संवेदनशील बनाने निर्धारित नहीं किया जा सकता है के बारे में पता होना चाहिए(; ब्लू लाइन मध्य) कि इस तरह के चित्र के रूप में चित्रित किया 7C दवा जोखिम दिनों, पर एक रेखीय हरकत प्रतिक्रिया का कहना है किसी भी समूह के लिए। ऐसे एक मामले में, दवा जोखिम कोशिश करते हैं और अधिक से अधिक संवेदनशील बनाने का निर्धारण करने के लिए बढ़ाया जा सकता है।

अंत में, यह आम तौर पर जानवरों के अलग-अलग साथियों में प्रदर्शन में कम से कम दो प्राथमिक दवा खुराक का उपयोग समूहों के बीच तुलना करने के लिए संवेदीकरण सबसे अच्छा है। हरकत सक्रियण के ऊपर पहलुओं में से किसी में मतभेद, एक खुराक या दोनों पर, stereotypy के विकास में परिवर्तन सहित अन्य स्पष्टीकरण, बाहर शासन करने के लिए आगे की जांच के लिए गाइड करने के लिए इस्तेमाल किया जाना चाहिए। ऐसे कोकीन और एम्फ़ैटेमिन के रूप में कुछ दवाओं, के लिए जोखिम को दोहराया है, न केवल एक खुराक पर निर्भर ढंग से अवगत हरकत पैदा करता है, लेकिन यह भी टकसाली व्यवहार प्रतिस्पर्धा sensitizes। ये stereotypies उच्च खुराक, कि इस तरह की हरकत संवेदीकरण अक्सर आंशिक रूप से या पूरी तरह से अस्पष्ट है पर विशेष रूप से प्रकट हो जाते हैं, लेकिन प्रशासन की पर फिर पता चलाएक कम खुराक। इस कारण से, एक प्रयोगात्मक समूह में एक "कमी" हरकत संवेदीकरण में वास्तव में stereotypies की दवा प्रेरित विकास के लिए बढ़ संवेदनशीलता को प्रतिबिंबित कर सकते। Stereotypy के आकलन के लिए चुनौतीपूर्ण हो सकता है, लेकिन प्रकाशित तराजू 35 और अन्य तरीकों 36 के एक नंबर रहे हैं। दोनों एक सामान्य stereotypy पैमाने पर और विशिष्ट व्यवहार के एक आकलन का उपयोग की सिफारिश की है, जैसा कि पहले 18 प्रकाशित किया।

अंत में, व्यवहार परीक्षण के एक नंबर के मानव की लत की जटिलता को पार्स करने की कोशिश में पशु मॉडल में विकसित किया गया है। वातानुकूलित जगह वरीयता और हरकत संवेदीकरण दो बुनियादी परीक्षण व्यापक रूप में प्रयोग किया जाता मूषक और क्रमशः, वे जल्दी दवा जुड़े इनाम के आकलन और लगातार प्लास्टिसिटी दोहराया उपयोग से प्रेरित में विशेष रूप से उपयोगी हो सकता है। , डिजाइन और अध्ययन के प्रत्येक प्रकार की व्याख्या के लिए कारणों में से एक नंबर रहे हैं यह wor बनानेजब ये आकलन की योजना बना ध्यान से प्रयोगात्मक लक्ष्यों और पिछले साहित्य पर विचार करने के thwhile।

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Disclosures

लेखकों घोषणा की कि वे कोई प्रतिस्पर्धा वित्तीय हितों की है कि।

Acknowledgments

लेखकों व्यवहार परीक्षण के साथ मदद के लिए डिजाइन संबंधी व्यवहार पर पिछले इनपुट के लिए करेन Dietz और शारी Birnbaum और लॉरेन Peca धन्यवाद। लेखकों को भी सिमंस फाउंडेशन (सीडब्ल्यूसी को सिमंस फाउंडेशन आत्मकेंद्रित अनुसंधान पहल अनुदान), NIDA (DA008277, DA027664, और DA030590 सीडब्ल्यूसी, आरडीपी को LNS को F32DA027265 और F32DA036319 के लिए), FRAXA रिसर्च फाउंडेशन और एलेनोर और मीलों की उदार सहायता स्वीकार करते हैं शोर फैलोशिप प्रोग्राम (LNS करने के लिए फेलोशिप समर्थन), और जॉन Kaneb फैलोशिप प्रोग्राम (मीट्रिक टन करने के लिए फेलोशिप समर्थन)।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Cocaine Hydrochloride USP Mallinckrodt Pharmaceuticals 0406-1520 Purchase and use (Schedule II controlled substance) for research purposes requires compliance and licensure according to state and federal law. 
Conditioned Place Preference,  Three Compartment Apparatus with Manual Doors and Lights for Mouse Med-Associates Inc. MED-CPP-MS & MED-CPP-3013 Our laboratory has used these boxes; however, many alternative boxes are available & acceptable.
PAS-Home Cage Activity Monitoring Photobeam Arrays San Diego Instruments 2325-0223 & 7500-0221 Our lab houses these arrays inside of custom built chambers, as described in the text.  There are alternatives available.
Disposable Sani-Cloth disenfecting wipes PDI 13872

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References

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व्यवहार अंक 108 कोकीन हरकत संवेदीकरण वातानुकूलित जगह वरीयता चूहों psychostimulant
कोकीन से प्रेरित व्यवहार संवेदीकरण और चूहे में वातानुकूलित प्लेस पसंद का आकलन
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Smith, L. N., Penrod, R. D.,… More

Smith, L. N., Penrod, R. D., Taniguchi, M., Cowan, C. W. Assessment of Cocaine-induced Behavioral Sensitization and Conditioned Place Preference in Mice. J. Vis. Exp. (108), e53107, doi:10.3791/53107 (2016).

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