Protocol
Tüm deney prosedürleri McLean Hastanesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanmıştır. NOT: Aşağıdaki protokol başka başarılı protokoller (örneğin, ışık vs koyu faz test ardışık vs aralıklı doz, vs.) farklı birçok ayrıntı olan CPP ve lokomotor duyarlılık, tek bir yaklaşım açıklanmaktadır. Acemiler eldeki deneysel soru (lar) dayalı literatürden değişiklikleri adapte bu protokoller ile başlayan, ya da sadece kılavuz olarak kullanmak isteyebilirsiniz. Otomatik ölçüm yöntemleri anlatılmıştır; Bununla birlikte, her bir deneyde (örneğin, video kayıt, elle derecelendirme) için otomatik olmayan araçları kullanmak mümkün olmaktadır.
1. Koúullanmıú Yeri Tercihi
- Ekipman ve Odası Takımı-up:
- Test öncesinde, en azından 3-5 gün boyunca, 1-3 dakika, her gün için deneysel fare tutun.
NOT:-ele Asla fareler odası stre kaldırılmasını bulabilirsinizssful, müdahale ya da klima değiştirebilir hangi. - Tercihen otomatik veri toplama 18 için photobeams ile donatılmış dört veya daha fazla üç odacıklı CPP cihazları, elde. Emin olun her odası yükseltilebilir kapı ile daha küçük, nötr odasına bağlayan iki büyük, visually- ve dokunsal-ayrı odaları vardır / erişimi kontrol etmek için indirdi. Her odasının Kapaklar farelerin ekleme / kaldırma için açmalı ve küçük, ayrı ayrı kontrol (kısılabilir) ışıkları (odasının başına bir) ile monte edilebilir.
NOT: CPP odası tasarımları değişir ve piyasadan satın alınabilen veya araştırmacılar tarafından inşa edilebilir. "Dengeli" bir tasarım için önerilen bir şema daha büyük bir beyaz duvarlar ve tel ızgara döşeme ile bölme ve siyah duvarlar ve bar döşeme ile başka bir şeydir. orta bölme gri duvarlar ve katı gri Pleksiglas döşeme olmalıdır. Açıklama amacıyla, bu odalar "," beyaz "siyah" ve "orta şu şekilde de ifade edilecektir."Kapaklar açık Pleksiglas olmalıdır. Alternatif bölme yapılandırmaları (tek veya iki odalı) (Tartışma) başka bir yerde de mümkündür ve tartışılmaktadır. - Kur test sırasında olacak gibi oda: kapatmayın veya dimmest ayara havai ışıkları ayarlamak ve kapıyı kapatın. orta odaları orada vakit fareler vazgeçirmek amacıyla siyah ve beyaz odaları (6-10 lux) daha (15-20 lux) biraz daha parlak olacak şekilde her odanın içinde bir ışık metre kullanın ve kapak ışıklarını ayarlayın.
NOT: Ortada harcanan ortalama süre kadar ya da siyah ya da beyaz odalarında fazla ise, daha Adım 1.1.3 açıklanan aydınlatma kontrastı artırmak. Alternatif olarak, orta için daha az çekici döşeme kullanın. Ama o orta zamanla azalır sağlamak için bu odayı herhangi bir değişiklik caydırıcı. Pilot yapmamak toplam keşifler azalır nedeniyle değil (geçişleri) (örneğin, ~ 220 0.5 cm çapında delik, eşit 6 x 3.5 x ¼ "Pleksiglas aralıklı) . - POtomatik veri toplama ( "prosedür" Şekil 1A) rogram veya manuel aşağıdaki parametrelere göre veri toplamak. Set denemeler ya iklimlendirme odasında ilk ışın Kopma başlatın. Set "test" oturumları uzunluğu 20 dakika olmak ve her odasında harcanan zaman ve kiriş sonları izlemek için. Set "koşullandırma" oturumları her odasında kiriş sonları ölçmek için (isteğe bağlı) 30 dakika uzunluğunda ve olmak. duruşma sırasında aydınlatmak için tüm bölme ışıkları ayarlayın.
- eldeki deney için gerekli olan kokain solüsyonu tam hacmini hazırlayın. 0.1 ml / 10 g vücut ağırlığına sahip bir enjeksiyon hacmi nihai konsantrasyon dayanarak,% 0.9 NaCI (tuzlu su) kokain HCI çözündürülür (5 mg / kg arasında bir doz için, örneğin, çözelti konsantrasyonu 0.5 mg / ml). Oda sıcaklığında vorteks 30-45 saniye süreyle karışım, steril filtre (0.2 mikron şırınga filtreler) ve mağaza.
- Test öncesinde, en azından 3-5 gün boyunca, 1-3 dakika, her gün için deneysel fare tutun.
- Test:
NOT: CPP için genel zaman çizelgesi olan ÖN-TEST, KLİMA, veDaha sonra POST-TEST. Ön test 1-3 gün klima ayrılabilir; Ancak, klima ve post-test günü gün üst üste (Şekil 2A) yer almalıdır. Bu zamanlama aynı deneyde tüm kohortların aynı tutulmalıdır.- gün boyunca her hayvan için aynı cihazı kullanan hayvanların ışık aşamasında test edin.
- Her deneme gün (yani testleri ve iklimlendirme gün), davranışsal Hol fareler taşımak ve onları yargılama öncesi 1-1.5 saat boyunca evlerinde kafeslerde rahatsız oturup bekleyin. Deneme başladığında fareler, en az bozulma ile, aparat onların kafes hızla hareket ettirilebilen bir yer seçin. Testi (örneğin, ekipman fanlar) ile ilgili herhangi bir sesler mevcut olduğunu, böylece tüm ekipmanın açın.
- İyice her cihazı (iç duvarlar, zemin ve tepsiler) hafif ile temizleyin, alkol, glikol-eter- ya da amonyak bazlı dezenfekte öncesinde ve sonrasında mendil her bir fare (sam kullanınDeney boyunca süpürge e tipi). ihmal döşeme undersides yok.
- Kontrol edin oda ışıkları her gün başında (kapalı veya soluk görünür) uygun ayarlanır.
- ile devam aşağıdaki bir "test" ya da "klima" gün oluşuna göre:
- Deneme Günleri 1 ve 6 (yani, öncesi ve sonrası testler), açık pozisyon (Şekil 2B) arası bölme kapıları yerleştirin.
- Varsa o zaman, (Şekil 1B) komutu başlatmak sorunu, "test" bilgisayar programını yükleyin ve hayvan kimlikleri (Şekil 1A) girin.
- arka duvara dönük olarak atanan aygıtının orta bölmesine, her bir fare yavaşça alt ve yumuşak kapağı kapatın. Tüm odaları yüklendikten sonra, test odayı terk ve gürültüyü en aza indirmek.
- Her aparatın içinde fareler bırakın tüm fareler için denemeler (Şekil 1C) sona erdi / kapalı kadar. İhracat deneme verileri.
<li> Sadece öncesinde veya ön testini takiben, hayvanlar tartın. Klima sırasında doz hesaplamaları için bu ağırlıkları kullanın.
- (Yani, "siyah eksi beyaz" ve "beyaz eksi siyah" öteki bu her harcanan zamanı çıkarılarak siyah ve beyaz odaları için her farenin ön test "tercih" hesaplamak, klima denemeleri için hazırlamak için; bkz Şekil 3, Sütun 9 & 10).
- Güçlü ilk tercihleri ile fareler zor dengeleme yapmak beri (örn <toplam deneme süresinin% 33) tercih puanları için kabul edilebilir bir sınır oluşturmak ve hesaplamalar onu aşan fareler hariç. Yıpratma muhtemel olduğunda test tamamlandıktan sonra (nedeniyle hedef dışı cerrahi manipülasyonlar, gibi) eklenmesi maksimize etmek için liberal sınırı (<toplam deneme süresinin% 66) kullanın.
NOT: sınırını aşan Fareler hala dengeli onların ön test tercihlerini tutmak için bir girişim ile, test edilebilir. Daha sonra, tGerekirse hese fareler ön test puanları dengelemek için, analize dahil edilebilir. Aşırı test öncesi önyargıların (yani> 800 sn) orantısız bir grup etkiliyorsa, klima ortamları değiştirerek ve / veya diğer deneyleri kullanmayı düşünün. - Her fare için uyuşturucu eşleştirme odası olarak siyah ya da beyaz odasını seçin, bu arada akılda aşağıdaki önceliklere her bir grup içinde ilgili ön-test tercihi puanları toplayarak:
NOT: Her kohort içinde yanı sıra herhangi bir önceki kuşakları arasında gruplar arasında puan dengelemek için özen gösterin.- mümkün olduğunca eşdeğer olarak tüm gruplar için toplamları yapın.
- Mümkün olduğunca sıfıra (yani, bazı fareler ve diğerleri için tercih edilmeyen tarafı için tercih edilen tarafı seçmek) yakın miktarda yapın. yakın bir sıfır toplamlı herhangi bir grup için mümkün değilse biraz negatif grup üzerinde özetliyor lehine yakından sınırlayıcı grup için en iyi elde skoru maç tüm diğerleri yeniden ayarlayınPozitif.
- Gibi çok uygun, beyaz ve hatta her grup içinde uyuşturucu eşleşmeleri için tercih edilmeyen odaları karşı tercih karşı siyah atamaları tutmak.
- yukarıdaki hedeflerine ulaşmak her zaman mümkün olmadığı gibi, daha sonra gruplar halinde karşı dengeleme hususlar yaparak sapmaları düzeltmek; Ancak, son derece farklı ortalama ön test tercihleri ile kohortlarını üreten kaçınıyorum.
- Tertibatı Günler 2-5, kapalı pozisyonda (Şekil 2C), ara bölme kapıları yerleştirmek.
- kokain ile bireysel şırınga hazırlayın (Günlük 2 & 4) ya da tuzlu Adım 1.1.5 açıklanan ve ön test ölçülen vücut ağırlıkları dayalı olarak (Gün 3 & 5) çözüm.
NOT: Doz deneysel beklentiler konusunda, Giriş bölümünde belirtilen hususlar ve potansiyel taban ve tavan etkileri ile seçilmelidir. En az iki farklı dozlar kullanılarak bağımsız deneyler genellikle en iyisidir. - Yük "cVarsa onditioning "bilgisayar programı ve butonu hayvan kimlikleri (Şekil 1A), daha sonra, (Şekil 1B) komutu başlatmak sorunu.
- Scruff sonra usulca kapağı kapatın, hemen geri duvara dönük kendilerine verilen aparat uygun siyah ya da beyaz odasına onları düşürücü, her fare (ip) enjekte ve. Tüm odaları yüklendikten sonra, test odayı terk ve gürültüyü en aza indirmek.
- (Diğer fareler hala makinesi ise, yani, önce fareler odaları kaldırılır) ve uygun tam 30 dakika için kendi odasından Fareler kapatın. gürültü tanıtan olmadan, mümkün olduğunca sessiz hayvanları kaldırın.
- analiz yöntemini seçin. Ya zaman post-test sırasında tuzlu-eşleştirilmiş tarafta harcanan çıkarma zamanı son test (kokain - tuz, sn) sırasında kokain-eşleştirilmiş tarafında harcanan ya da post-test ilacı eşleştirilmiş odasında harcanan zaman kullanabilirsinizeksi ön test süresi uyuşturucu eşleştirilmiş odasına geçirdi.
NOT: İlk yöntem kullanılarak eğer, ortalama süre de arsa çizgi grafikleri her bir grup için öncesi ve sonrası testler sırasında orta saline- ve ilaç-eşleştirilmiş odalarında geçirdi. Ön test ile karşılaştırıldığında, son test ilaç eşleştirilmiş tarafında artan zaman gösterecek ve tuzlu-eşleştirilmiş tarafı (açıklama için Şekil 6, dip ve Tartışma) harcanan zaman azalmış olmalıdır. - doğa ve grup sayısına bağlı karşılaştırılan, bir t-testi kullanmak, Tek veya İki Yönlü Varyans Analizi, yukarıda sunulan çıkarma puanları birini analiz etmek, belki post-hoc analizi ile, uygun şekilde.
Not: Kokain tercih puanları değişken olma eğilimindedir ve ayrıca, (örneğin, ilaç-eşleştirilmiş tarafına kaçınma gösterir) negatif olabilir. Bu sonuç gr arasındaki farklılıkları belirlemede normal ve büyük olasılıkla önemli olduğundan nefret göstermek fareler, (onlar istatistiksel aykırı olmadığı sürece) çıkarılmamalıdıroups. Tedavinin etkisi boyutuna bağlı olarak, grup başına 12 ila 30 hayvan örneklem büyüklüğünün ihtiyaç bekliyoruz.
2. Hareket Hassasiyet
- Ekipman ve Odası Takımı-up
- 4 x 8 (X x Y) photobeam dizisi (dış boyutlar 11.5 "x 20") edinin. Siyah pleksiglas yapılmış üstü açık bir odasını Construct (iç boyutlar 22 1/6 "x 13 ¾" x 9 3/8 ") dizi (Şekil 4A) ev.
- bir kırmızı ışık (tavana veya duvara monte) test sırasında kullanılan böylece test odası hazırlayın.
- Günlük alışkanlık ve enjeksiyon denemeleri için ayrı bir program oturumları hazırlayın.
- Set alışkanlık çalışma 60-120 dakika boyunca (Şekil 5B) arasında olduğu 30-60 dakika ve enjeksiyon çalışmalar arasında olması. her biri için önerilen uzunluk 60 dk. Aynı deney içinde birden çok kohortlarda tutarlı deneme süresini tutun.
- Takım çalışma Recó başlamakStart sinyali (Şekil 5B) başlatılmıştır sonra oluşan ilk ışın mola sırasında rding. Enjeksiyon deneme için, eğer mümkünse kutuları, (değil hep birlikte) ayrı başlatılabilir, böylece başlangıç sinyalini ayarlayın.
- Set ışın kırılır ", kutuları" kullanıcı tanımlı kaydedilecek tercihen her biri 5 dakika (Şekil 5B).
- eldeki deney için gerekli olan kokain solüsyonu tam hacmini hazırlayın. 0.1 ml / 10 g vücut ağırlığına sahip bir enjeksiyon hacmi nihai konsantrasyon dayanarak,% 0.9 NaCI (tuzlu su) kokain HCI çözündürülür (5 mg / kg arasında bir doz için, örneğin, çözelti konsantrasyonu 0.5 mg / ml). Oda sıcaklığında vorteks 30-45 saniye süreyle karışım, steril filtre (0.2 mikron şırınga filtreler) ve mağaza.
- Test
NOT: Test ilk aşaması 10-11 gün boyunca çalışır. alışkanlık (enjeksiyon-ücretsiz) ve enjeksiyon: Fareler iki günlük denemeler alırsınız. f ilk üç tuzlu su yönetinAynı doz (örn., 15 mg / kg / gün) kullanarak bir sonraki yedi bizim gün (tuzlu alışma önemi Tartışma) ve kokain.- Her gün, 1 saat 30 dakika boyunca davranış Hol kendi kafeslerine fareler alıştırıldı.
- , Taze yatak (örneğin, çam çipleri) son derece ince bir tabaka ile temiz standart fare büyüklüğünde şeffaf akrilik konut kafesleri hazırlamak değil karanlık photobeams şekilde, eğer uygulanabilir (Şekil 4C-GE).
- Beş kiriş uzunluğu boyunca eşit bir şekilde aralıklıdır, böylece bir ucuna yakın photobeam dizisi Y-eksenine karşı yer kafesleri,. X ekseni kirişler bu testte (Şekil 4C ve D) kullanılmaz.
- rasgele sırayla, berduş olarak, kendi ev kafes fareler alın ve bunları tartın. doğrudan atanan lokomotor kafes içine onların (desteği ile) kuyruk ve yerin tabanı tarafından tartmak tekne her fareyi çıkarın. Standart filtre üstü kapaklı her kafes örtün.
- w bireysel şırınga hazırlayınMevcut gün vücut ağırlıklarına göre, Aşama 2.1.7'de tarif edildiği gibi i tuzlu su ya da kokain çözeltisi. 15 veya 20 mg / kg'lık bir doz ile başlayın ve daha yüksek ya da daha düşük doz kullanılarak ikinci bir deney düşünün (ilgili faktörleri bölümüne bakınız).
- alışkanlık denemeleri tüm kafesleri sona sonra, enjeksiyon programı yükleyin.
- Bir kerede bir, onların sınav kafes, ense gelen fareler kaldırmak ve onların enjeksiyon (ip) vermek. Onun Test kafesine fareyi dönmeden önce, hızlı bir şekilde bu kafeste (Şekil 5C, alt) için başlangıç sinyali başlatır.
- Tüm enjeksiyon denemeleri sona erdi sonra, evlerinde kafeslerde ve konut odasına fareler dönün.
- yedi gün aynı doz hücumdan önce ve üç yedi sağlayan, tuzlu özgün, yarı doz, çift doz, aynı dozda: İstenirse, fareler aşağıdaki gibi yoksunluk dönemleri ve ilaç zorluklar, bir dizi geçmesi için izin her ek meydan günler önce. Ne olursa olsun zorlukların bir seçim, maintaiBir deney içinde kuşakları arasında n benzer çekilme dönemleri.
NOT: Orijinal doz yüksek (yukarıdaki örneğin, 30 mg / kg veya) ise, çift doz atlanması ya da daha düşük bir doz ile değiştirilmesi gerekir. tuzlu meydan yalnız kokain eşleştirilmiş bir ortamda herhangi bir şartına lokomotor aktivasyonunu ortaya çıkarır ve bu süreç içinde, kokain bağlıdır hassaslaşmış hareketin miktarı (Tartışma).
- İstatistiksel analiz
- analiz için kullanılacak her deneme bölümünü (ler) seçin. kemirgenlerde en kokain kaynaklı lokomosyon ilk ~ 15-30 dk sonra uyuşturucu enjekte içinde gerçekleşir. Birden çok zaman pencere (örneğin, ilk 15, 30, 60 ve / veya 120 dakika) için toplu lokomosyon analiz, ilgili değişkenler düşünün bağlı veya araştırmanın bağımsız kesimleri odaklanın.
- Çerçeve seçilen zaman kullanarak, ayrı ayrı ve daha sonra bir alışkanlık ve enjeksiyon denemeleri için günün her hayvan için ışın sonlarını ÖzetleHer bir grup için toplamlar verage. Arsa demektir ve tüm gün boyunca bir çizgi grafikte ortalama (SEM) standart hataları. tedaviler fareler, erken ve / veya geç her günlük deneme ilaç nasıl tepki değiştirebilir aynı zamanda her gün deneme boyunca 5 dakikalık bin ortalama grup ışın sonları arsa.
NOT: alışkanlık ve enjeksiyon denemeleri için günlük aktivite ortalamaları (örneğin, ilk 15 dk) basılıyor yapay o hareket tuzlu enjeksiyon yoluyla nemlendirilmiş bir görünür, ancak (büyük olasılıkla) bu etkinliği vardır unutmayın alışkanlık sonunda her gün bu seviyeye gerilemiştir yapar . - ayrı ayrı tekrarlı ölçümler (RM) ANOVA uygun olarak, tasarımda herhangi arası konular faktörler de dahil olmak üzere gün / zaman içinde-konular faktörüne sahip ve kullanma ardışık tuzlu ve ilaç tedavisi günleri analiz edin. kokain (akut maruz kalma) 1. Gününde grup farklılıklarını ve zorluklar için bir değişkenli ANOVA araştırmak için bir t-testi veya Tek Yönlü ANOVA kullanın. Uygun olduğunda, significanc izleyinpost-hoc testleri veya Tek değişkenli ANOVA e.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
CPP testte Örnek sonuçlar yaklaşık yaşı dokuz hafta doğal tipte C57BL / 6N fareleri kullanılarak, Şekil 6'da gösterilmiştir. Çalışma tasarımı Testi (öncesi ve sonrası) bir-içi konular değişken, 2 x 3 karışık faktörlü ve bir Tedavisi (tuzlu ve kokain 5 ve 10 mg / kg) değişken arası konular. Bir RM ANOVA hem Testi için gözlemlenen önemli ana etkilerin yerine yorumlanmıştır Testi ve Tedavi (F 2,20 = 3.68, p <0.05) arasında anlamlı bir etkileşim göstermiştir (F 1,20 = 9.86, p <0.01) ve tedavi (F 1,20 = 4.37, p <0.05). Post hoc karşılaştırmaları grupların yok ön test sırasında birbirinden farklı olduğunu göstermiştir. sonrası testte, 5 mg / kg ve 10 mg / kg, birbirinden önemli ölçüde farklı değildi; 10 mg / kg, p, 5 mg / kg, p <0.5: bununla birlikte, her iki grupta tuz sadece, kontrol grubuna göre kokainle eşleşen bölmesi için önemli ölçüde daha fazla tercih (Tukey gösterdi60. 0.01). Buna ek olarak, Bonferroni post hoc testleri göstermiştir ki hem 5 (p <0.05) ve tuzlu ise 10 (p <0.05) mg / kg grupları ön test ile karşılaştırıldığında sonrası testte kokain eşleştirilmiş tarafı için büyük tercihi gösterdi -tuz grup öncesi post-test herhangi bir değişiklik gösterdi.
Lokomotor tahlilinden Örnek sonuçlar, daha önce 18 yayınlanmış ayrı deneyin bir dizi doğal tipte C57BL / 6N yavru kontrol fareleri ile Şekil 7A'da ve B'de gösterilmektedir. 3-4 gün tuzlu su enjeksiyonları aklimasyonundan sonra fareler yedi gün süreyle günde 5, 10, 15 ya da 30 mg / kg bir kokain enjeksiyon (ip) uygulandı. Bir yedi veya 14 günlük çekme periyodunun ardından, her bir grup gösterildiği gibi daha sonra (değişken) atım süresinin ardından, bazı diğer dozlarda ek kokain zorlukları alınan orijinal dozda kokain meydan aldı. locom Kokain dozunun etkisini göstermek amacıylaotor geçerli yayında hassasiyeti, dört farklı doz grupları ile, 4 x 7 karma faktörlü tasarım içine kombine edilmiştir, bir içi konular Günü (ilk 7 kokain enjeksiyonları) değişkeni ve Doz bir arası konular faktör. Bir RM ANOVA yerine her iki günü için gözlendi önemli ana etkilerin yorumlanmıştır Doz ve Gün arasında anlamlı bir etkileşim (F 18276 = 12.53, p <0.0001), gösterdi (F 6276 = 18.25, p <0.0001) ve Doz ( F 3,46 = 22,63, p <0.0001). Tukey analizleri 5 ve 15 mg / kg (p <0.0001), 5 ve 30 mg / kg (p <0.0001), 10 ve 15 mg / kg (p <0.01) arasında anlamlı bir genel farklılık göstermiştir. grupları, her gün karşılaştırıldığında, önemli farklılıklar bir dizi gözlenmiştir. ve Gün 7 kokain (Gün 1 kokain (çözeltisinden 10 genel 30 mg / kg, p <0.05 15 genel 30 mg / kg, p <0.01 ila 5 genel 30 mg / kg, p <0.01) farklılıkların burada belirtildiği 5 vs 10 mg / kg, p <0.05, 5 karşı 15 mg / kg, p <0.0001; 10 v. 15 mg / kg, p <0.01; 15 vs 30 mg / kg, p <0.0001). Şekil 7C miktar tedavi grupları farklılık gösterebilir lokomotor duyarlılaşma önemli yönlerini gösteren sahte rakamlar göstermektedir. Bu özellikler, bağımsız bir şekilde burada tasvir edilir olsa da, bunların kombinasyonları farklılıkları gözlemlemek mümkündür.
Şekil 1. Med PC CPP temel oturum kontrolü. (A) Varsayılan ekran, açık oturum simgesi (kırmızı kutu), ve açık oturum iletişim kutusu (ek). "Özel bir dosya adı" seçin ve veri klasörüne gidin ve oturumu isim klasör penceresini kullanın. "Prosedür" açılır listesinden uygun programı seçin. Kullanılan her kutu için kutu numarasını kontrol ve konu, deney ve grup kutularına ilgili bilgileri girin. (B) Yük bölmesi ekran, sinyal simgesine (mavi kutu) başlatın ve işaret göndermekal iletişim kutusu (ilave). Bir kez tüm bölme verileri girildikten seçin odaları yüklenir ve sorun sinyali başlamak üzere. Chambers şimdi oturum sayacını başlatmak ve veri toplamak için kiriş-break ile tetiklenir. (C) Uçlu oturum ekranı. Her bölme belirlenen programı tamamlar gibi, veri toplama alanı (yeşil kutu) statik olacak gibi odacık bilgi alanı (turuncu kutu) odaları gösterecektir "kapalı." Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
2. CPP odası yapılandırmasını rakam. (A) Örnek deneysel zaman çizgisi. Ön-test günlük değişen kokain (gri) ve serum fizyolojik (beyaz) Klima oturumları takip ediyor. Post-testi geçen klima seansından sonra 24hrs yapılır. ( Öncesi ve sonrası test oturumlarında kullanılmak üzere B) Açık hazne yapılandırması. ara bölme kapılar yükseltilmiş / açık pozisyonda olduğunu unutmayın. (C), koşullandırma süreci kullanıma kapalı hazne yapılandırması. Manuel kapılar odaları arasında erişimi olmayan, alçaltılmış unutmayın. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
CPP. Örnek hesaplamalar ve hedefleri CPP öncesi test puanları dengelemek gösteren Şekil 3. Dengeli tasarım hesaplamaları. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
ig4.jpg "/>
Şekil 4. Hareket Odası Yapılandırma. (A) Dış odası ışın dizisi rahatça sığar (B) hangi içinde siyah opak kutudan oluşmaktadır. Kirişler eşit uzun ekseni (D) boyunca dağıtılır böylece Konut / ayakkabı kutusu büyüklüğünde odaları yatak ince bir tabaka (C) ile doldurulur ve aynı hizada olmalıdır. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Şekil 5. Hareket Odası Bilgisayar Operasyonu. (A) Varsayılan Bilgisayar Programı. Yeni oturum veritabanı (mavi kutu ve içerlek) başlatın. Her deneyde (mavi alt-ek) için dosya ve dizin yeniden adlandırın. benzersiz bir tanımlayıcı ile yeni bir oturum (kırmızı kutu ve inset) oluşturun. Düzenleme Oturumu (kırmızı içerlek) ve enter hayvan tanımlayıcı odası sekmesinde bilgiler (yeşil kutu ve içerlek) ve her oturum türü (turuncu kutu) için kontrol başlatma / durdurma kurmak. (B) her oturum türü için uygun start stop denetimi seçin. 300 saniye aralık uzunluğunu ayarlayın ve 12 aralıklarla faz başına (1 saat oturumu için) (5 dakika bin için). alışkanlık oturumları (solda), odalar (El Fazı ... Unison Tüm Etkin) hep bir ağızdan başlamak için tetiklenir edilecek ve ilk ışın aradan sonra hemen etkinlik için izleme başlayacaktır. Enjeksiyon oturumları (sağ) için, odaları tek tek tetiklenir (El ... Bireysel Ekran Düğmeleri Faz Etkin) ve hemen ilk ışın aradan sonra etkinlik için izleme başlayacaktır. toplam faz süresi her bir bölme için dolduğunda Hem oturum türü sona erecek. Oturumu başlatıldıktan sonra (C), alışkanlık oturumları "Tüm start" düğmesine (üstte) seçerek başlatılabilir. Trigg sonra unutmayınering, tüm odaları oturumunu başlatmak için ilk ışın mola için bekliyor olacak. Enjeksiyon oturumları için, her bölme bağımsız (alt) başlatılabilir. (Hayvan enjeksiyon için odasının dışında ise) bireysel odaları tetikleme sonra, odalar oturumunu başlatmak için ilk ışın mola için bekliyor olacak unutmayın. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Her iki bölmedeki salin eşleşmeleri alınan fareler herhangi bir tercih gelişmediğini ise Şekil 6. Örnek CPP sonuçlanır. (Üst) CPP fareler, daha önce kokain (5 ya da 10 mg / kg) ile eşleştirilmiş bir bölme için önemli bir tercih gösterdi. Sütun kısaltmalar aynı test ti kaydetti grubuna göre etiketli bardan önemli gruplar arası farklılıkları ifadeBeni etmektedir. öncesi ve sonrası test sırasında salin eşleştirilmiş odaları karşı kokaine harcanan zaman grafiğinin çizilmesi vasıtasıyla (Alt), kokain ile eşleştirilmiş yan artış zaman pahasına 5 ve 10 mg / kg gruplarında görüldüğü hem tuzlu-eşleştirilmiş ve orta odalarında geçirdi. Bunun aksine, tuz kontrol grubunda öncesi ve sonrası test arasında bir bölmede harcanan zaman çok belirgin bir fark yoktur. Olarak sunulan veriler ortalama ± SEM. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Şekil 7. Örnek lokomotor sensitizasyon sonuçları (a) dört ayrı doz her gün deneme ilk 20 dakika için toplu ışını keser. Aynı-, yarı takiben, vahşi tip farelerde 5, 10, 15 ve 30 mg / kg çift doz bir(18) modifiye d tuzlu zorluklar. Tüm gruplar, son kokainin takiben aynı doz zorlukları da (10, 15, 30 mg / kg) ya da iki (5 mg / kg) haftalık aldı. Bazı gruplar değişken çekilme dönemlerinde gerçekleştirildi yeni zorluklar aldı. (B) 15 mg / kg kokain sensitizasyon deney sırasında günlük çalışmalar için 5 dakikalık bin ile özetlenebilir lokomotor verileri (ışın sonları) çizimi. (C) öncelikle (solda), akut kokain tepki farklılıkları, (orta) bir sensitizasyon kur farkı veya maksimal hassasiyete (sağ) farkları ile tahrik edilmektedir iki tedavi grubu için lokomotor duyarlılaşma farklılıklar gösteren illüstrasyonlar. Olarak sunulan veriler ortalama ± SEM. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Bu protokol ilaca bağlı davranışsal plastisite yönlerini değerlendirmek için ortalama laboratuvar tarafından kullanılabilecek her biri şartlı yer tercihi ve lokomotor duyarlılaşma için yöntem gösterilmektedir. En davranış testleri gibi, temel protokolü ötesinde ek layık hususlar vardır. İlk olarak, bu tekniklerin her biri iki faz, vurumuna sahip olarak tasavvur edilebilir. "İndüksiyon" davranış-için klima sırasında meydana CPP gelişimini kapsar ve hassasiyete için (genellikle ardışık) ilaç maruziyetin ilk dönemidir. duyarlılık için çekilmesinden sonra ya da sadece son ardışık maruz kalma gibi ya verilen ilaç meydan okuma olarak tanımlanabilir ise CPP için "İfade", post-test.
Daha iyi potansiyel etkilerini ayrıştırmak için diğer karşı Bu aşamalardan biri sınırlayıcı manipülasyonları dikkate değer. zamansal sınırlı etkinliği ile Virüsler (örneğin, HSV) ya da ilaç yardımcı idareleri / ön işlemler (örneğin, agonistleri / antagonistleri) bu çabaların yararlıdırlar. Bu yaklaşımı çekerken, belirli bir faz daha iyi viral ifade denk olacak şekilde, bu sıkıştırılmış protokolleri kullanmak daha gerekli olabilir. CPP için, daha önce, 37 tarif edilen gibi, iki günlük bir Tertibatı yöntemi yürütmek mümkündür. Özellikle lokomotor duyarlılaşma için, indüksiyon ve bu yöntemlerle birlikte ifade arasındaki çekme dönemi değişiklikleri, davranış bakım ya da istikrar içinde ilgili işlemleri ortaya çıkarabilir. Buna ek olarak, bu yaklaşımların bir duyarlı davranış, bir ilaç ile uyarılan, ancak farklı bir ilaca maruz ile ifade edilebilir çapraz hassasiyet, fenomenini incelemek için kullanılabilir. Çapraz sensitizasyon kötüye tüm hassaslaştırıcı ilaçlar arasında oluşmaz, çünkü orijinalinden biraz farklı bir duyarlı davranış ortaya çıkarabilir ve mutlaka için iki yönlü olarak değililaçların herhangi bir set, kendi muayene nerede ve beyin plastisite ve fonksiyonlarını nasıl etkilediğini farklı ilaçlar anlamak için eşsiz fırsatlar sunabilir.
CPP doğru yorumlanması, özellikle, bulguların alternatif açıklamalar iktidar bağlıdır. Üç odacıklı aparatı oluşturulan veriler ayrıca uyuşturucu eşleştirilmiş tarafı için bir tercih bir artış beri, tercihi sonrası testte kokain eşleştirilmiş taraftan tuzlu-eşleştirilmiş tarafında harcanan zamanın çıkarma tanımlamadan önce incelenip gerektiğini tuzlu-eşleştirilmiş odasında harcanan zaman bir azalma yalnızca sonuçları böyle bir yorumun olasılıkla uygun değildir. zaman değiştirebilir fare ilaç eşleştirilmiş odasının yerine orada geçirdi çünkü orta bölme bu sonucu verir. Bunun yerine salin eşleştirilmiş tarafında orta bölmesinin pahasına ilaç eşleştirilmiş tarafta harcanan zaman artan gözlemlemek mümkündür; belki, bu sonucun yine de kabul edilebilir tefsiratını olabilirİlaç tercihi bir artış olarak ted. Üçüncü bölümünün eklenmesi öncesi ve sonrası test oturumları 41 sırasında hayvanın tarafsız yerleştirilmesini sağlar nötr odasını sağlar. Test günlük puanlar katkıda başlangıç yerleşim sapmaları ele için yararlı olmakla birlikte, üçüncü oda iklimlendirme için gerekli değildir. Iki ayrı bölmeleri veya çeşitli uyarıcı yapılandırmaları ile tek bir bölme özelliği alternatif CPP tasarımları başka yerde 41-42 tartışılmıştır.
Bir ilaç için yer tercihi herhangi bir açığı da bağlamsal dernek ve genel ödül işlevini öğrenmek için her iki yeteneği değerlendirmeler eşlik etmelidir. CPP paradigmaya yapılabilir ayarlamaları bir dizi vardır ki can artırarak (veya azaltarak) eşleşmeleri sayısı veya daha yüksek ya da daha düşük ilaç kullanarak UCS (ilaç) çıkıntı değiştirerek de dahil olmak üzere değişmiş tercihi, yorumlanmasında aide doz. CPP kabul edilebilir fo kullanılarak gerçekleştirilebilirod (örneğin, yüksek yağlı, sakaroz) ya da sosyal etkileşimler gözlenen değişim ilaca özgü veya doğal ödüller alakalı olup olmadığını değerlendirmek için; olmayan CPP bu amaç için yararlı intrakranial kendini stimülasyon, sakaroz tercih ve / veya iştah yaklaşım görevleri içerir yaklaşır. Ancak, bu seçeneklerin tümü yeterli istenen soruya cevap kabiliyetleri değişir. Normal tepkiler doğal ödül ile ilgili bağlamsal dernek öğrenmek ve oluşturmak için bir yeteneğini göstermek beri gıda bazlı CPP özellikle yararlı olabilir. öğrenme yeteneğini değerlendirmek için ek kontroller bağlamsal öğrenme / bellek (bağlamsal korku klima ve CPA) dayanan görevleri arasındadır. EBM caydırıcı bir deneyim (örneğin, lityum klorür enjeksiyonu) ile iştah ilacı yerine, sık sık aynı odalarında, benzer CPP çalıştırmak olma avantajına sahiptir. CPP eksiklikler, ancak normal EBM göstermek Hayvanlar, uygun bağlamsal dernek kurma becerisi göstermekİlaç KPA'da bozuklukları büyük olasılıkla ödül (ilaca özgü veya başka türlü) ilgili olduğunu belirtir s. EBM dikkate lityum klorür kullanmak için bir uyarı bu ilacın deney hayvanlarında ile modellenen edilebilir herhangi bir durum için bilinen bir tedavi olup olmadığıdır. Örneğin, lityum tedavisi Bu kontrol metodu bulandırabilir olur Frajil x 43 fare modelinde, öğrenme kusurlarına karşı gösterilmiştir.
Klasik CPP paradigma ek olarak, bu tür testler öğrenilen uyuşturucu bağlam dernek nesli ve CPP sonra iadesi gibi kullanıcıların yararlı bulabilirsiniz potansiyel uzantıları vardır. Hayvanlar rahatsız bırakıldığında koşullu yanıt (CR), bir kez kuruldu uzun süreler 19,20 için muhafaza edilebilir. CR göreli kalıcılığı rağmen, etkili bir UCS (ilaç) yokluğunda CS (bağlam) tekrarlanan sunumlar ile söndürülebilir. İki CPP tükenme yöntemleri yaktı görünürkısa süreli olarak: enjeksiyon 21 veya araç 22 ile önceden ilaç eşleştirilmiş tarafında yeniden eşleşmelerde olmadan tekrarlanan deneme maruz kalma. Orijinal klima etkili aracılığıyla ortaya bir fikir "öğrenilmemesini" karşıt olarak Extinction süreçleri, yeni öğrenme yansıtan "iadesi." Yürürlüğe Girmesi klasik CR kurtarma üreten UCS, yeniden maruz tarafından tetiklenir. CPP bağlamında, eğitim ilaç tek bir enjeksiyon hayvanlar yer tercihi göstermeye neden olur. İlginç olmayan birçok eğitim ilaç kuyrukları da alternatif ilaçlar 22 ile astarlama ve stres 23-26 dahil olmak üzere çeşitli CPP iade üretebilir. Extinction ve eski haline döndürme deneyleri, ilaç tedavisi ve nüks modelleri olarak uyuşturucu bağımlılığı alanında özel bir öneme sahiptir. tükenme hızını artırmak ve / veya geri iadesi büyüklüğünü azaltmak Müdahaleler insan farmakote- değerli hedefler olabilir.
(örneğin, 27-29). Özellikle, ancak içerik bağımsız sensitizasyon anlaşılır (örneğin; 30-32) ile ortaya konmuştur. sensitizasyonun bir bağlam-bağımlı bir artış gözlemlenebilir olup olmadığı katkıda bulunabilir deneysel ayrıntıları herhangi bir grup testi için o taşınmalıdır olsun, ilaç dozu, maruz kalma süresini içerirf sensitizasyon ve test odasına öncesi maruz kalma bazı yönleri; Ancak, bu ayrıntıları biraz belirsizdir. Bağlamsal sensitizasyon katkısını belirleyen bir yöntem ilaç duyarlılık 33 aşağıdaki tuzlu meydan vermektir. açıklanan paradigmanın kullanımı tuzlu meydan üzerine önceki çalışmalarda çok az lokomotor aktivasyonu ile kanıtlandığı gibi bağlam-bağımlı duyarlılık katkısını en aza indirir. Duyarlılık bağlamsal katkı genellikle lokomotor aktivite 34 dışındaki davranışları tartışmalar da dahil olmak üzere, kağıtları bir dizi gözden geçirilmiştir.
yeni bir ortam ile indüklenen uyarıcı etkilerinin lokomotor olan ilaca bağlı aktivasyonu ve sensitizasyon kirlenme için, fare her bir deneyin başlangıcında, üç ila dört gün boyunca salin enjeksiyonları ortama alıştırılır. Şekil 7'de görüldüğü gibi, fareler, tipik olarak birinci ve arasındaki düşürülmüş lokomosyon göstermektedirSon tuzlu aklimasyonundan günü. Buna ek olarak, fareler son tuzlu maruz kalma işlemek ve enjekte etmek belirgin sakin ve kolaydır. Önceki çalışmalar bu paradigmayı kullanarak birden fazla suşları ve farelerin genotip test ettik ve onları genelinde tuzlu aklimasyonundan aktivitesinde çok varyans görmüyorum; Bununla birlikte, zaman zaman, bu yöntem kullanılarak üstesinden değildir, özellikle genotipler ile bağlantılı çok güçlü hiperaktivite fenotipleri görmek mümkündür. Bu gibi durumlarda, bu (hiperaktif grubunda lokomosyon düzleşene kadar) birçok fizyolojik alıştırma gün gerçekleştirmek ve daha sonra, son tuz püskürtme günlük veriler kullanılarak kontrol grubuna hiperaktif grubu normalize etmek arzu edilebilir. ideal birlikte, bu iki grup arasında hareket yeteneği üzerindeki ilaç etkileri daha makul bir karşılaştırma sağlar. Aşırı hiperaktivite yatıştırmaya diğer seçenekler 5 saat teker her gün enjeksiyon öncesinde alışkanlık deneme uzatmak için, ve / veya daha uzun enjeksiyon denemeleri kullanın (2-4 saat) each gün.
lokomotor davranış yorumlanması için önemli olan ek hususlar vardır. Şekil 7C'de gösterildiği gibi, gözlenen grup farklılıkları akut lokomotor yanıt eşitsizlikler öncelikle tahrik olabilir, gün içinde duyarlılık oranı, duyarlılık maksimum limiti veya bu faktörlerin bir bileşimi. Bu faktörlerin katkıları Ayrıştırma ayrı ayrı yararlı olabilir. Bu amaç için, akut lokomotor tepkisi istatistiksel başına analiz edilebilir. Sonra duyarlılık oranı eğrisi uydurma ve herhangi bir akut lokomotor farklılıkları indirgeyen orandır normalleşme sürecinin yapabilen bir program kullanılarak değerlendirilebilir. Değişmiş maksimal hassaslaşması genellikle grup tepkiler plato sonra takip gün-by-günlük post-hoc karşılaştırmalar günlerde önemli olan ardışık ilaca maruz kalma gün boyunca bir RM ANOVA ortaya çıkar. Bir maksimal hassaslaşması tespit edilemeyen bilmelidir(; mavi çizgi orta) gibi Şekil 7C tasvir olarak ilaca maruz kalma günler, üzerinde doğrusal bir lokomotor yanıt almanızı sağlar herhangi bir grup için. Böyle bir durumda, ilaç maruz denemek ve maksimum duyarlılığın belirlemek için uzatılabilir.
Son olarak, hayvanların ayrı kohortlarda yapılan en az iki birincil ilaç dozlarını kullanarak gruplar arasındaki hassasiyet karşılaştırmak için genellikle en iyisidir. bir doz ya da her ikisi de lokomotor aktivasyonunun yukarıdaki yönlerin herhangi birini farklılıklar, stereotipi gelişiminde değişiklikler de dahil olmak üzere diğer açıklamaları ekarte etmek için daha fazla test yol kullanılmalıdır. Kokain ve amfetamin gibi bazı ilaçlar, ışınlarına defaten maruz kalma, sadece doza bağlı bir şekilde hassaslaştırılmış lokomosyon üretir, ama aynı zamanda stereotip davranışları rekabet duyarlı hale getirmektedir. Bu Steryotipiler lokomotor sensitizasyonu genellikle kısmen veya tamamen gizlenmiş olduğu şekilde yüksek dozlarda, özellikle belirgin hale gelmiştir, ancak uygulanması üzerine daha ortayadaha düşük bir doz. Bu nedenle, tek bir deney grubunda lokomotor duyarlılaşma bir "açık" aslında sterotiplerin ilaca bağlı gelişimine artan duyarlılığı yansıtabilir. Stereotipi değerlendirilmesi zor olabilir, ancak yayımlanmış ölçekler 35 ve diğer yaklaşımlar 36 bir dizi bulunmaktadır. Daha önce 18 yayımlanmış genel Stereotipi ölçek ve belirli davranışların değerlendirmesini her ikisini birden kullanarak, tavsiye edilir.
Sonuç olarak, davranış testleri bir dizi, insan bağımlılığı karmaşıklığını ayrıştırmak amacıyla hayvan modellerinde geliştirilmiştir. Şartlı yer tercihi ve lokomotor hassaslaşması iki temel testler yaygın olarak sırasıyla, erken ilaç ilişkili ödül değerlendirilmesi ve sürekli kullanım ile oluşturulan kalıcı plastisite özellikle yararlı olabilir, kemirgenlerde kullanılan ve bulunmaktadır. Orada tasarım ve çalışmanın her tür yorumlanması için düşünceler bir dizi vardır o kel yapmaBu değerlendirmeler planlarken dikkatli deneysel hedefleri ve önceki literatür dikkate thwhile.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Yazarlar hiçbir rakip mali çıkarları olduğunu beyan ederim.
Acknowledgments
Yazarlar davranış testi ile yardım için Karen Dietz ve Shari Birnbaum davranış tasarım konuları önceki girişi ve Lauren Peca teşekkür ederiz. Yazarlar ayrıca Simons Vakfı (cwc için Simons Vakfı Otizm Araştırma Girişimi hibe), NIDA (DA008277, DA027664 ve DA030590 cwc, RDP için LNS F32DA027265 ve F32DA036319 kadar), FRAXA Araştırma Vakfı ve Eleanor ve Miles cömert destek kabul kıyı Burs Programı (LNS için burs desteği), ve John Kaneb Burs Programı (MT burs desteği).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Cocaine Hydrochloride USP | Mallinckrodt Pharmaceuticals | 0406-1520 | Purchase and use (Schedule II controlled substance) for research purposes requires compliance and licensure according to state and federal law. |
| Conditioned Place Preference, Three Compartment Apparatus with Manual Doors and Lights for Mouse | Med-Associates Inc. | MED-CPP-MS & MED-CPP-3013 | Our laboratory has used these boxes; however, many alternative boxes are available & acceptable. |
| PAS-Home Cage Activity Monitoring Photobeam Arrays | San Diego Instruments | 2325-0223 & 7500-0221 | Our lab houses these arrays inside of custom built chambers, as described in the text. There are alternatives available. |
| Disposable Sani-Cloth disenfecting wipes | PDI | 13872 |
References
- National Institute on Drug Abuse. Drug Facts: Understanding Drug Abuse and Addiction. www.drugabuse.gov. , Available from: http://www.drugabuse.gov/publications/drugfacts/understanding-drug-abuse-addiction (2012).
- Kasanetz, F., et al. Transition to addiction is associated with a persistent impairment in synaptic plasticity. Science. 328 (5986), 1709-1712 (2010).
- Beach, H. D.
- van der Kooy, D. Chapter 13, Place Conditioning: A simple and effective method for assessing the motivational properties of drugs. Methods of Assessing the Reinforcing Properties of Abused Drugs. Bozarth, M. A. , 229-240 (2012).
- Carlezon, W. A. Place conditioning to study drug reward and aversion. Methods Mol Med. 84, 243-249 (2003).
- Prus, A. J., James, J. R., Rosecrans, J. A. Chapter 4, Conditioned Place Preference. Methods of Behavior Analysis in Neuroscience. Buccafusco, J. J. , (2009).
- Tzschentke, T. M. Measuring reward with the conditioned place preference (CPP) paradigm: update of the last decade. Addict Biol. 12 (3-4), 227-462 (2007).
- Aguilar, M. A., Rodrìguez-Arias, M., Miñarro, J. Neurobiological mechanisms of the reinstatement of drug-conditioned place preference. Brain Res Rev. 59 (2), 253-277 (2009).
- Feduccia, A. A., Duvauchelle, C. L. Novel apparatus and method for drug reinforcement. JoVE. (42), (2010).
- Brabant, C., Quertemont, E., Tirelli, E. Influence of the dose and the number of drug-context pairings on the magnitude and the long-lasting retention of cocaine-induced conditioned place preference in C57BL/6J mice. Psychopharmacology. 180 (1), 33-40 (2005).
- Pliakas, A. M., Carlson, R. R., Neve, R. L., Konradi, C., Nestler, E. J., Carlezon, W. A. Altered responsiveness to cocaine and increased immobility in the forced swim test associated with elevated cAMP response element-binding protein expression in nucleus accumbens. J Neurosci. 21 (18), 7397-7403 (2001).
- Knackstedt, L. A., Samimi, M. M., Ettenberg, A. Evidence for opponent-process actions of intravenous cocaine and cocaethylene. Pharmacol Biochem Behav. 72 (4), 931-936 (2002).
- Post, R. M., Rose, H. Increasing effects of repetitive cocaine administration in the rat. Nature. 260 (5553), 731-732 (1976).
- Marin, M. T., Cruz, F. C., Planeta, C. S. Cocaine-induced behavioral sensitization in adolescent rats endures until adulthood: lack of association with GluR1 and NR1 glutamate receptor subunits and tyrosine hydroxylase. Pharmacol Biochem Behav. 91 (1), 109-114 (2008).
- Henry, D. J., White, F. J. The persistence of behavioral sensitization to cocaine parallels enhanced inhibition of nucleus accumbens neurons. J Neurosci. 15 (9), 6287-6299 (1995).
- Hope, B. T., Simmons, D. E., Mitchell, T. B., Kreuter, J. D., Mattson, B. J. Cocaine-induced locomotor activity and Fos expression in nucleus accumbens are sensitized for 6 after repeated cocaine administration outside the home cage. Eur J Neurosci. 24 (3), 867-875 (2006).
- Shuster, L., Yu, G., Bates, A. Sensitization to cocaine stimulation in mice. Psychopharmacology. 52 (2), 185-190 (1977).
- Smith, L. N., Jedynak, J. P., Fontenot, M. R., Hale, C. R., Dietz, K. C., Taniguchi, M., Thomas, F. S., Zirlin, B. C., Birnbaum, S. G., Huber, K. M., Thomas, M. J., Cowan, C. W. Fragile X mental retardation protein regulates synaptic and behavioral plasticity to repeated cocaine administration. Neuron. 82 (3), 645-658 (2014).
- Mueller, D., Stewart, J. Cocaine-induced conditioned place preference: reinstatement by priming injections of cocaine after extinction. Behav Brain Res. 115 (1), 39-47 (2000).
- Sakoori, K., Murphy, N. P. Maintenance of conditioned place preferences and aversion in C57BL6 mice: effects of repeated and drug state testing. Behav Brain Res. 160 (1), 34-43 (2005).
- Bardo, M. T., Neisewander, J. L., Miller, J. S. Repeated testing attenuates conditioned place preference with cocaine. Psychopharmacologia. 89 (2), 239-243 (1986).
- Itzhak, Y., Martin, J. L. Cocaine-induced conditioned place preference in mice: induction, extinction and reinstatement by related psychostimulants. Neuropsychopharmacology. 26 (1), 130-134 (2002).
- Kreibich, A. S., Blendy, J. A. cAMP response element-binding protein is required for stress but not cocaine-induced reinstatement. J Neurosci. 24 (30), 6686-6692 (2004).
- Briand, L. A., Blendy, J. A. Not all stress is equal: CREB is not necessary for restraint stress reinstatement of cocaine-conditioned reward. Behav Brain Res. 246, 63-68 (2013).
- Redila, V. A., Chavkin, C. Stress-induced reinstatement of cocaine seeking is mediated by the kappa opioid system. Psychopharmacology. 200 (1), 59-70 (2008).
- Do Couto, R. ibeiro, Aguilar, B., A, M., Manzanedo, C., Rodriguez-Arias, M., Armario, A., Minarro, J. Social stress is as effective as physical stress in reinstating morphine-induced place preference in mice. Psychopharmacology. 185 (4), 459-470 (2006).
- Post, R. M., Lockfeld, A., Squillace, K. M., Contel, N. R. Drug-environment interaction: context dependency of cocaine-induced behavioral sensitization. Life sciences. 28 (7), 755-760 (1981).
- Badiani, A., Browman, K. E., Robinson, T. E. Influence of novel versus home environments on sensitization to the psychomotor stimulant effects of cocaine and amphetamine. Brain Res. 674 (2), 291-298 (1995).
- Li, Y., Acerbo, M. J., Robinson, T. E. The induction of behavioural sensitization is associated with cocaine-induced structural plasticity in the core (but not shell) of the nucleus accumbens. Eur J Neurosci. 20 (6), 1647-1654 (2004).
- Partridge, B., Schenk, S. Context-independent sensitization to the locomotor-activating effects of cocaine. Pharmacol Biochem Behav. 63 (4), 543-548 (1999).
- Le Foll, B., Diaz, J., Sokoloff, P. Increased dopamine D3 receptor expression accompanying behavioral sensitization to nicotine in rats. Synapse. 47 (3), 176-183 (2003).
- Heidbreder, C. A., Babovic-Vuksanovic, D., Shoaib, M., Shippenberg, T. S. Development of behavioral sensitization to cocaine: influence of kappa opioid receptor agonists. J Pharmacol Exp Ther. 275 (1), 150-163 (1995).
- Tirelli, E., Michel, A., Brabant, C. Cocaine-conditioned activity persists for a longer time than cocaine-sensitized activity in mice: implications for the theories using Pavlovian excitatory conditioning to explain the context-specificity of sensitization. Behav Brain Res. 165 (1), 18-25 (2005).
- Anagnostaras, S. G., Schallert, T., Robinson, T. E. Memory processes governing amphetamine-induced psychomotor sensitization. Neuropsychopharmacology. 26 (6), 703-715 (2002).
- Spangler, R., Zhou, Y., Schlussman, S. D., Ho, A., Kreek, M. J. Behavioral stereotypies induced by 'binge' cocaine administration are independent of drug-induced increases in corticosterone levels. Behav Brain Res. 86 (2), 201-204 (1997).
- Kelley, A. E. Measurement of rodent stereotyped behavior. Curr Protoc Neurosci. Chapter 8, Unit 8.8 (2001).
- Taniguchi, M., Carreira, M. B., Smith, L. N., Zirlin, B. C., Neve, R. L., Cowan, C. W. Histone deacetylase 5 limits cocaine reward through cAMP-induced nuclear import. Neuron. 73 (1), 108-120 (2012).
- Zangen, A., Solinas, M., Ikemoto, S., Goldberg, S. R., Wise, R. A. Two brain sites for cannabinoid reward. J Neurosci. 26 (18), 4901-4907 (2006).
- Huston, J. P., de Souza Silva, M. A., Topic, B., Müller, C. P. What's conditioned in conditioned place preference. Trends Pharmacol Sci. 34 (3), 162-166 (2013).
- Schechter, M. D., Calcagnetti, D. J. Trends in place preference conditioning with a cross-indexed bibliography; 1957-1991. Neurosci Biobehav Rev. 17, 21-41 (1993).
- Bevins, R. A., Cunningham, C. L. Chapter 9, Place Conditioning: A Methodological Analysis. Tasks and Techiniques: A sampling of methodologies for the investigation of animal learning, behavior, and cognition. Anderson, M. , 99-110 (2006).
- Hitchcock, L. N., Cunningham, C. L., Lattal, K. M. Cue configuration effects in the acquisition of a cocaine-induced place preference. Behav Neurosci. 128 (2), 217-227 (2014).
- Liu, Z. -H., Chuang, D. M., Smith, C. B. Lithium amerliorates phenotypic deficits in a mouse model of fragile X syndrome. Int J Neuropscyhopharmacol. 14 (5), 618-630 (2011).
- Bardo, M. T., Rowlett, J. K., Harris, M. J. Conditioned place preference using opiate and stimulant drugs: A meta-analysis. Neurosci Biobehav Rev. 19 (1), 39-51 (1995).
