Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Behavior
Click here for the English version

Behavior

Vurdering af kokain-induceret Behavioral Sensibilisering og konditioneret Place Preference i mus

Published: February 18, 2016 doi: 10.3791/53107
Automatic Translation
*1, *1, 1, 1
1Department of Psychiatry, Harvard Medical School, McLean Hospital
* These authors contributed equally

Protocol

Alle eksperimentelle procedurer er blevet godkendt af McLean Hospital Institutional Animal Care og brug Udvalg. BEMÆRK: Følgende protokol beskriver en enkelt tilgang til CPP og bevægeapparatet sensibilisering, mange detaljer som adskiller sig fra andre succesfulde protokoller (f.eks lys- vs. mørke fase test, træk vs. intermitterende dosering, etc.). Novicer kan ønske at begynde med disse protokoller, eller blot bruge dem som guider, tilpasse ændringer fra litteraturen baseret på den eksperimentelle (e) spørgsmål ved hånden. beskrives automatiserede målemetoder; det er dog muligt at anvende ikke-automatiserede organer til hvert assay (dvs. videooptagelse, hånd-scoring).

1. Konditioneret Place præference

  1. Udstyr og Room Set-Up:
    1. Håndtag eksperimentelle mus i 1-3 minutter hver dag, i mindst 3-5 dage før testning.
      BEMÆRK: Aldrig-håndteres mus kan finde fjernelse fra kammeret stressful, som kan forstyrre eller ændre condition.
    2. Opnå fire eller flere tre-kamre CPP apparater, helst udstyret med photobeams til automatiseret dataindsamling 18. Sørg for, at hvert kammer har to større, visually- og taktilt-adskilte kamre forbinder til en mindre, neutral kammeret via døre, der kan hæves / sænkes til at kontrollere adgangen. Låg på hvert kammer skal åbne for indsættelse / fjernelse af mus og monteres med små, individuelt kontrollerbar (dæmpes) lyser (en pr kammer).
      BEMÆRK: CPP kammer designs varierer og kan købes kommercielt eller konstrueret af forskere. For "afbalanceret" design, en anbefalet ordning er en større kammer med hvide vægge og trådgitter gulve og den anden med sorte vægge og bar gulvbelægning. Den midterste kammer skal have grå vægge og solid grå plexiglas gulvbelægning. For som forklaring, vil disse kamre blive omtalt som "hvide", "sort" og "midten".Låg skal være klar plexiglas. Alternative rum konfigurationer (en- eller to-kammer) er også muligt, og omtalt andetsteds (se Diskussion).
    3. Opsætning plads, som det vil være under testen: slukke eller indstille loftslampe til dimmest indstilling og lukke døren. Brug en lysmåler inde hvert kammer og sæt låget lys, så midterste kamre er lidt lysere (15-20 lux) end sorte og hvide kamre (6-10 lux) for at afskrække mus fra at tilbringe tid der.
      BEMÆRK: Hvis den gennemsnitlige tid i midten er så meget eller mere end i de sorte eller hvide kamre, yderligere øge belysningen kontrasten beskrevet i trin 1.1.3. Alternativt kan du bruge mindre tiltrækkende gulv til midten. (Fx ~ 220 diameter huller 0,5 cm, jævnt fordelt i 6 x 3,5 x ¼ "plexiglas), men undgå at gøre dette kammer afskrækningsmiddel. Pilot eventuelle ændringer for at sikre, falder i midten tid skyldes ikke falder i alt udforskninger (krydsninger) .
    4. Program automatiseret dataindsamling ( "procedure", figur 1A) eller manuelt indsamle data i henhold til følgende parametre. Set forsøg at starte på den første stråle pause i enten condition kammer. Indstil "test" sessioner til at være 20 min i længden og til at spore tidsforbrug og stråle pauser i hvert kammer. Indstil "conditioning" sessioner til at være 30 min lang og (valgfrit) til at måle beam pauser i hvert kammer. Indstil alle kammer lys til at belyse under retssagen.
    5. Forbered fuld volumen af ​​kokain løsning nødvendig for eksperimentet ved hånden. Opløs kokain HCI i 0,9% NaCl (saltvand), basere slutkoncentration på et injektionsvolumen på 0,1 ml / 10 g legemsvægt (fx til en dosis på 5 mg / kg, opløsningens koncentration er 0,5 mg / ml). Vortex blanding i 30-45 sek, sterilt filter (0,2 um sprøjtefiltre) og opbevares ved stuetemperatur.
  2. Test:
    BEMÆRK: Den generelle tidsplan for CPP er PRE-TEST, CONDITIONING, ogderefter POST-TEST. Forprøven kan separeres fra konditionering ved 1-3 dage; dog bør konditionering og post-test dag finder sted på hinanden følgende dage (figur 2A). Denne timing bør holdes den samme for alle årgange i det samme eksperiment.
    1. Test under dyrenes lette fase med samme apparatur for hvert dyr på tværs dage.
    2. Hver retssag dag (dvs., tests og konditionering dage), flyt mus til den adfærdsmæssige forrum og give dem mulighed for at sidde uforstyrret i deres bure i 1-1,5 timer inden forsøget. Vælg en placering, hvor mus kan hurtigt flyttes fra deres bur til apparatet, med minimal afbrydelse, når retssagen begynder. Tænd alt udstyr, så nogen lyde forbundet med testen (f.eks, udstyr fans) er til stede.
    3. Rengør hver apparat (indvendige vægge, gulve og bakker) med mild, alkohol-, glycol-ether- eller ammoniak-baserede desinfektion klude før og efter hver mus (brug same type renere hele eksperimentet). Må ikke forsømme gulve undersider.
    4. Tjek at værelsespriser lys er indstillet korrekt (off eller nedtonet) i begyndelsen af ​​hver dag.
    5. Fortsæt med følgende alt efter om det er en "test" eller "condition" dag:
      1. På Trial dag 1 og 6 (dvs. den præ- og post-test), placere inter-kammer døre i åben stilling (figur 2B).
      2. Læg "test" computerprogram og indtast dyr id'er (figur 1A), derefter udstede startkommando (figur 1B), hvis relevant.
      3. Forsigtigt lavere hver mus i midten kammer sin tildelte apparat, står bagvæggen, og sagte lukker låget. Når alle kamre er indlæst, skal du lade test værelse og minimere støj.
      4. Lad mus inde i hver apparat indtil forsøg for alle mus har lukket / afsluttet (figur 1C). Eksport forsøgsdata.
      6. <li> Lige før eller efter den præ-test, vejer dyrene. Brug disse vægte for dosisberegninger under condition.
    6. For at forberede sig til konditionering forsøg beregne hver mus pre-test "præference" for de sorte og hvide kamre ved at trække tid tilbragt i hver af disse fra den anden (dvs. "sorte minus hvide" & "hvide minus sort", se Figur 3, Kolonner 9 & 10).
    7. Da mus med stærke indledende præferencer gør balancering vanskelig, etablere en acceptabel grænse for præference scoringer (fx <33% af den samlede forsøg tid) og omfatter mus, der overskrider det fra beregninger. Brug en liberal grænse (<66% af den samlede forsøg tid) for at maksimere optagelsen når nedslidning er sandsynligt efter testen er gennemført (f.eks, på grund af off-target kirurgiske manipulationer).
      BEMÆRK: Mus over grænseværdien kan stadig testes, med et forsøg på at holde deres pre-test præferencer afbalanceret. Senere, tisse mus kan udelukkes fra analysen, hvis det er nødvendigt, for at balancere pre-prøveresultater. Hvis ekstreme pre-test bias (dvs.> 800 sek) uforholdsmæssigt påvirke en gruppe, overveje om ændring conditioning miljøer og / eller ved hjælp af andre analyser.
    8. Vælg sort eller hvid kammer som lægemiddel-parring kammer for hver mus, i mellemtiden summen af ​​tilsvarende pre-test præference scores inden for hver gruppe med følgende prioriteringer:
      BEMÆRK: Sørg for at afbalancere scores mellem grupper inden for hver kohorte samt på tværs eventuelle tidligere årgange.
      1. Foretag de beløb for alle grupper som svarer som muligt.
      2. Foretag de beløb så tæt på nul som muligt (dvs. vælge den foretrukne side for nogle mus og den ikke-foretrukne side for andre). Hvis en nær-nul sum er umuligt for en given gruppe, re-justere alle andre til nøje matche den bedst opnåelige score for den begrænsende gruppe, begunstige en smule negativ gruppe opsummerer løbetpositiv.
      3. Så meget som muligt, holder tildelinger af sort versus hvid og foretrak versus ikke-foretrukne kamre til narkotika bindinger selv inden for hver gruppe.
      4. Da det ikke altid er muligt at opfylde ovennævnte mål, rette eventuelle afvigelser ved at gøre modsatrettede balancering overvejelser i senere kohorter; dog forsøge at undgå at producere kohorter med vildt forskellige gennemsnitlige pre-test præferencer.
    9. På Condition Days 2-5, placere inter-kammer døre i den lukkede position (figur 2C).
    10. Forbered individuelle sprøjter med kokain (Dage 2 & 4) eller saltvand (Dage 3 & 5) løsning, som beskrevet i trin 1.1.5 og er baseret på legemsvægt målt til pre-test.
      BEMÆRK: Dosis bør vælges med hensyn til eksperimentelle forventninger, overvejelser nævnt i indledningen, og potentielle gulv og loft effekter. Det er ofte bedst at foretage uafhængige forsøg med mindst to forskellige doser.
    11. Load "conditioning "computer program og indtast dyr id'er (figur 1A), så udsteder startkommando (figur 1B), hvis relevant.
    12. Scruff og injicere hver mus (ip), umiddelbart sænke dem ind i den relevante sort eller hvid kammer deres tildelte apparat mod bagvæggen, så sagte luk låget. Når alle kamre er indlæst, skal du lade test værelse og minimere støj.
    13. Fjern mus fra deres kammer så tæt på præcis 30 minutter som muligt (dvs. at den første mus fjernet fra deres kamre, mens andre mus er stadig condition). Fjern dyr så stille som muligt, uden at indføre støj.
  3. Statistisk analyse:
    1. Vælg en analysemetode. Enten subtrahere tid brugt på saltvand-parrede side under post-test fra tid brugt på kokain-parrede side under post-test (kokain - saltvand, sek) eller bruge den tid i post-test lægemiddel-parrede kammerminus forprøven tid brugt på narkotika-parrede kammer.
      BEMÆRK: hvis du bruger den første metode, også plot line grafer over gennemsnitlige tid tilbragt i midten, saline- og narkotikarelaterede parrede kamre i løbet af de præ- og post-test for hver gruppe. I forhold til præ-testen, skal post-test viser øget tid i lægemiddel-parrede side og nedsat tid i saltvand-parrede side (se figur 6, bund, og diskussion for forklaring).
    2. Afhængig af arten og antallet af grupper, der sammenlignes, skal du bruge en t-test, en-eller to-vejs ANOVA, som er relevant, eventuelt med post-hoc analyse, til at analysere en af ​​de ovenfor præsenterede subtraktion scoringer.
      BEMÆRK: Kokain præference scoringer tendens til at være variabel, og desuden kan være negativ (dvs. angiver aversion mod lægemiddel-parrede side). Mus, der viser modvilje bør ikke fjernes (medmindre de er statistiske outliers), da dette resultat er normalt og sandsynligvis vigtigt at bestemme forskelle mellem groups. Forvente at brug af stikprøver på 12 til 30 dyr pr gruppe, afhængig af hvilken virkning størrelse af behandlingen.

2. Locomotor Sensibilisering

  1. Udstyr og Room Set-Up
    1. Anskaf en 4 x 8 (X x Y) fotostrålerækker array (udvendige dimensioner 11,5 "x 20"). Konstruere en åben top kammer lavet af sort plexiglas (indre dimensioner 22 1/6 "x 13 ¾" x 9 3/8 ") til at huse array (figur 4A).
    2. Forbered test rum, så der kan bruges et rødt lys (lofts- eller vægmonteret) under testen.
    3. Forbered separate program sessioner til daglige tilvænnings- og injektion forsøg.
      1. Indstil tilvænnings- forsøg til at være mellem 30-60 min og injektion forsøg at være mellem 60-120 min (figur 5B). Den anbefalede længde for hver er 60 min. Hold retssag længde konsistent på tværs af flere årgange i samme eksperiment.
      2. Sæt forsøg at starte recording på den første stråle pause, der opstår efter startsignalet er igangsat (figur 5B). Til indsprøjtning forsøget indstille start- signal, således at kasserne kan startes individuelt (ikke i kor), hvis det er muligt.
      3. Set beam pauser skal registreres i brugerdefinerede "siloer," helst 5 min hver (figur 5B).
    4. Forbered fuld volumen af ​​kokain løsning nødvendig for eksperimentet ved hånden. Opløs kokain HCI i 0,9% NaCl (saltvand), basere slutkoncentration på et injektionsvolumen på 0,1 ml / 10 g legemsvægt (fx til en dosis på 5 mg / kg, opløsningens koncentration er 0,5 mg / ml). Vortex blanding i 30-45 sek, sterilt filter (0,2 um sprøjtefiltre) og opbevares ved stuetemperatur.
  2. Test
    BEMÆRK: Den indledende fase af test løber i 10-11 dage i træk. Mus modtage to daglige forsøg: tilvænning (injektion-fri) og injektion. Indgiv saltvand for første tre til fvores dage (se Diskussion for betydningen af saltvand tilvænning) og kokain for de næste syv anvender samme dosis (f.eks., 15 mg / kg / dag).
    1. Hver dag, akklimatisere mus i deres bure til den adfærdsmæssige forrum i 30 minutter til 1 time.
    2. Forbered ren standard mus-sized klare akryl boliger bure med et ekstremt tyndt lag frisk strøelse (f.eks fyr chips), således at ikke obskure photobeams, hvis relevant (figur 4C & D).
    3. Placer bure mod Y-aksen i fotostrålerækker arrayet nær den ene ende, således at fem bjælker jævnt fordelt langs dens længde. X-akse bjælker anvendes ikke i denne test (figur 4C & D).
    4. Tag mus fra deres hjem bur, i vilkårlig rækkefølge, harmoniske og vejes. Fjern hver mus fra vejebåd ved bunden af ​​halen (med støtte) og anbringes direkte i deres tildelte lokomotorisk bur. Dæk hvert bur med et standard filter-top låg.
    5. Forbered individuelle sprøjter wed saltvand eller kokain løsning, som beskrevet i trin 2.1.7, baseret på den aktuelle dags kropsvægt. Begynd med en dosis på 15 eller 20 mg / kg, og overveje et andet eksperiment under anvendelse af en højere eller lavere dosis (se Diskussion for relevante faktorer).
    6. Når tilvænnings- forsøg har afsluttet for alle bure, indlæse injektion programmet.
    7. Én ad gangen, fjerne mus fra deres test bur, harmoniske og give deres injektion (ip). Inden returnering af musen til sin test bur, hurtigt indlede startsignalet for det bur (figur 5C, nederst).
    8. Efter alle injektion forsøg er afsluttet, returnere mus til deres hjem bure og deres bolig værelse.
    9. Hvis det ønskes, give mus til at gennemgå en række tilbageholdelsestider og narkotika udfordringer såsom følgende: samme dosis som original, halv dosis, dobbelt dosis, så saltvand, så syv dage før udfordring den samme dosis og 06:57 dage før hver ekstra udfordring. Uanset valget af udfordringer, maintain lignende tilbageholdelsestider tværs kohorter inden et eksperiment.
      BEMÆRK: Hvis den oprindelige dosis er høj (f.eks 30 mg / kg eller derover), bør den dobbelte dosis springes over eller erstattes med en lavere dosis. Saltvandet udfordring afslører nogen konditionerede lokomotorisk aktivering af kokain-parrede miljø alene, og i processen, mængden af ​​sensibiliserede bevægelse, der er kokain-afhængig (se Diskussion).
  3. Statistisk analyse
    1. Vælg den del (e) af hvert forsøg, der vil blive anvendt til analyse. Mest kokain-induceret bevægelse i gnavere sker inden den første ~ 15-30 min efter lægemiddeladministration injektion. Afhængigt involverede variable, overveje analysere kumulative bevægelse til flere tidsvinduer (f.eks den første 15, 30, 60 og / eller 120 min) eller fokusere på uafhængige segmenter af forsøget.
    2. Brug den tidsramme valgt, opsummere strålen pauser for hvert dyr ved dag for tilvænnings- og injektion forsøg separat og derefter enGennemsnitligt de beløb for hver gruppe. Plot betyder og standardfejl af middelværdien (SEM) i en linje graf frem for alle dage. Som behandlinger kan ændre hvordan mus reagerer på lægemidlet tidligt og / eller sent i hver daglig forsøg, også plotte gennemsnitlige gruppe beam pauser med 5-min bin i løbet af hver daglig forsøg.
      BEMÆRK: Plotning daglige aktivitet gennemsnit for tilvænnings- og injektion forsøg (f.eks første 15 min) gør det kunstigt ud til, at bevægelse dæmpes af saltvand injektion, men husk, at aktiviteten har (sandsynligvis) faldt til dette niveau ved udgangen af tilvænning hver dag .
    3. Analyser hinanden følgende saltvand og narkotikabehandling dage hver bruger gentagne målinger (RM) ANOVA'er have den inden-fag faktor dag / tid og herunder eventuelle mellem-fag faktorer i designet, som er relevant. Brug en t-test eller One-Way ANOVA til at undersøge gruppe forskelle på dag 1 af kokain (akut eksponering), og en Multivariate ANOVA for udfordringerne. Når det er relevant, følger significance med post-hoc test eller univariat ANOVA'erne.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Repræsentative resultater fra CPP assay er vist i figur 6 under anvendelse vildtype C57BL / 6N mus ved ca. ni uger gamle. Undersøgelsens design var en 2 x 3 blandet faktoriel, med en inden-underkaster variabel i Test (før og efter) og en mellem-underkaster variabel i behandling (saltvand og kokain 5 og 10 mg / kg). En RM ANOVA viste en signifikant interaktion mellem Test og behandling (F 2,20 = 3,68, p <0,05), der blev fortolket i stedet for betydelige vigtigste virkninger observeret for både test (F 1,20 = 9,86, p <0,01) og Behandling (F 1,20 = 4,37, p <0,05). Post hoc sammenligninger viste, at ingen af ​​grupperne afveg fra hinanden i før-testen. Ved post-test, 5 mg / kg og 10 mg / kg ikke adskiller sig væsentligt fra hinanden; imidlertid viste begge grupper signifikant større præference for kokain-parrede kammer end saltvand kun kontrolgruppe (Tukeys: 5 mg / kg, p <0,5; 10 mg / kg, s &# 60; 0,01). Desuden viste Bonferroni post-hoc test, at både 5 (p <0,05) og 10 (p <0,05) mg / kg grupper viste større præference for kokain-parrede side på post-test i forhold til pre-test, mens saltvand -saline gruppe viste ingen ændring fra præ- til post-test.

Repræsentative resultater fra bevægeapparatet assay er vist i figur 7A & B ved anvendelse af vildtype C57BL / 6N kuldsøster kontrolmus fra en serie af adskilte forsøg, der tidligere er blevet offentliggjort 18. Efter akklimatisering til saltvandsinjektioner i 3-4 dage, modtog musene en kokain injektion (ip) ved 5, 10, 15 eller 30 mg / kg per dag i syv dage. Efter en syv- eller 14-dages fortrydelsesfrist, hver gruppe fik en kokain udfordring på den oprindelige dosis, så efter yderligere (variable) tilbageholdelsestider, nogle fik yderligere kokain udfordringer på andre doser, som vist. Med henblik på at demonstrere effekten af ​​kokain dosis på locomOTOR overfølsomhed i den aktuelle publikation blev de fire forskellige dosisgrupper kombineres i en 4 x 7 blandet faktordesign, med en inden-emner variabel af Day (første 7 kokain injektioner) og en mellem-fag faktor Dose. En RM ANOVA viste en signifikant interaktion mellem dosis og Day (F 18.276 = 12,53, p <0,0001), som blev fortolket i stedet for signifikante hovedvirkninger, der også observeret for både dag (F 6276 = 18,25, p <0,0001) og dosis ( F 3,46 = 22,63, p <0,0001). Tukey post hoc analyser viste signifikante samlede forskelle mellem 5 og 15 mg / kg (p <0,0001), 5 og 30 mg / kg (p <0,0001), og 10 og 15 mg / kg (p <0,01). Der blev observeret en række væsentlige forskelle, når grupper blev sammenlignet hver dag. Bemærkes her er forskelle for dag 1 Kokain (5 vs. 30 mg / kg, p <0,01; 10 vs. 30 mg / kg, p <0,05; 15 vs. 30 mg / kg, p <0,01) og Dag 7 Kokain ( 5 vs. 10 mg / kg, p <0,05; 5 vs. 15 mg / kg, p <0,0001; 10 vs. 15 mg / kg, p <0,01; 15 vs. 30 mg / kg, p <0,0001). Figur 7C viser mock tal illustrerer de vigtigste aspekter af bevægeapparatet overfølsomhed, der kan være forskellige beløb behandlingsgrupper. Mens disse funktioner er illustreret uafhængigt her, er det også muligt at observere forskelle i kombinationer deraf.

Figur 1
Figur 1. Med PC CPP grundlæggende session kontrol. (A) Standard display, åben session ikon (rød boks), og åben session dialogboksen (indsat). Vælg "custom filename" og bruge vinduet mappe til at navigere til mappen data og navngive sessionen. Vælg passende program fra "procedure" drop down listen. For hver kasse i brug, afkrydsningsfeltet nummer og indtaste relevante oplysninger i emnet, eksperiment, og gruppe bokse. (B) Load kammer display, start signal ikon (blå boks), og sende tegnal dialogboksen (indsat). Når alle kammer data er blevet indtastet, skal du vælge kamre til at blive lastet og udstede starte signal. Chambers vil nu blive udløst af stråle-break at starte sessionen timeren og indsamle data. (C) Ended session display. Som hvert kammer fuldender udpegede program, vil dataindsamlingen område (grøn boks) bliver statisk og kammeret informationsområde (orange boks) vil vise kamre som "lukket". Klik her for at se en større version af dette tal.

Figur 2
Figur 2. CPP kammer konfiguration. (A) Prøve eksperimentel tidslinje. Pre-test efterfølges af daglige skiftende kokain (grå) og saltvand (hvid) conditioning sessioner. Post-test udføres 24 timer efter den sidste condition session. ( B) Åbn kammer konfiguration til brug i præ- og post-test sessioner. Bemærk, at inter-kammer døre er i hævet / åben stilling. (C) lukket kammer konfiguration til brug i conditioning sessioner. Bemærk, at manuelle døre er sænket, uden adgang mellem kamrene. Klik her for at se en større version af dette tal.

Figur 3
Figur 3. Balancerede konstruktionsberegninger for CPP. Eksemplet viser beregninger og mål, når balancering pre-prøveresultater i CPP. Klik her for at se en større version af dette tal.

ig4.jpg "/>
Figur 4. Lokomotorisk kammerkonfiguration. (A) ydre kammer består af sort uigennemsigtig boks inden i hvilken strålen arrayet passer stramt (B). Boliger / skotøjsæske mellemstore kamre skal fyldes med et tyndt lag strøelse (C) og rettet ind, så bjælker er jævnt fordelt langs den lange akse (D). Klik her for at se en større version af dette tal.

Figur 5
Figur 5. Bevægelsesaktivitet Chamber Computer Operation. (A) Standard Computer Program. Start ny session database (blå kasse og indsat). Omdøb fil og mappe for hvert forsøg (blå sub-indsat). Opret ny session (rød boks og indsat) med entydig identifikator. Edit Session (rød indsat) og enter dyr identifier oplysninger i fanen kammer (grøn kasse og indsat) og oprette start / stop kontrol for hver session type (orange felt). (B) Vælg passende starte stoppe kontrol for hver session type. Indstil interval længde til 300 sekunder (i 5 min bin) og 12 intervaller per fase (i 1 time session). For tilvænnings- sessioner (til venstre), vil kamre blive udløst til at starte i kor (manuelt Aktiver fase ... Alt i Unison) og vil begynde at overvåge for aktivitet umiddelbart efter den første stråle pause. Til injektion sessioner (til højre), vil kamre udløses individuelt (manuelt Aktiver fase ... Individuelt Screen knapper) og vil begynde at overvåge for aktivitet umiddelbart efter den første stråle pause. Begge typer session slutter, når det samlede fase er udløbet for hvert kammer individuelt. (C) Når sessionen er startet, kan tilvænnings- sessioner startes ved at vælge knappen "starte alle" (øverst). Bemærk, at efter TriggEring, vil alle kamre venter på første stråle pause for at starte sessionen. Til injektion sessioner, kan hvert kammer startes uafhængigt (nederst). Bemærk, at efter udløsning enkelte kamre (mens dyret er ude af kammeret til injektion), vil kamre venter på den første stråle pause for at starte sessionen. Klik her for at se en større version af dette tal.

Figur 6
Figur 6. Repræsentative CPP resultater. (Top) I CPP, viste mus signifikant præference for et kammer tidligere har været forbundet med kokain (enten 5 eller 10 mg / kg), mens mus, der modtog saltvand bindinger i begge kamre ikke udviklede nogen præference. Kolonne forkortelser angiver signifikante mellem-gruppe forskelle fra det mærkede bar i forhold til den noterede gruppe på samme test timig påpege. (Nederst) Ved at plotte tid tilbragt i kokain- versus saltvand-parrede kamre under præ- og post-test, kan stigninger i kokain-parrede side ses i de 5 og 10 mg / kg grupper, der er på bekostning af tid brugt i både saltvand parrede og midterste kamre. I modsætning hertil var der ingen slående forskelle i tid tilbragt i ethvert kammer mellem præ- og post-test i saltvand kontrolgruppen. Data præsenteret som gennemsnit ± SEM. Klik her for at se en større version af dette tal.

Figur 7
Figur 7. Repræsentative bevægeapparatet sensibilisering resultater (A) Kumulative stråle pauser for de første 20 minutter af hver daglig retssag for fire separate doser:. 5, 10, 15 og 30 mg / kg i vildtype-mus efterfulgt af samme-, halv- dobbeltklik dosis end saltvand udfordringer, modificeret fra (18). Alle grupper modtog samme dosis udfordringer enten én (10, 15, 30 mg / kg) eller to (5 mg / kg) uger efter den sidste eksponering kokain. Nogle grupper fik yderligere udfordringer, som blev udført ved variable perioder tilbagetrækning. (B) Plot af bevægeapparatet data (beam pauser) summeres med 5-min bin for daglige forsøg under 15 mg / kg kokain overfølsomhed eksperiment. (C) Illustrationer viser forskelle i bevægeapparatet overfølsomhed for to behandlingsgrupper, der primært drevet af (venstre) akut kokain respons forskelle, (i midten) en overfølsomhed rate forskel eller (højre) forskelle i maksimal sensibilisering. Data præsenteret som gennemsnit ± SEM. Klik her for at se en større version af dette tal.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Denne protokol viser fremgangsmåder til konditioneret sted præference og lokomotorisk sensibilisering, som hver især kan anvendes af den gennemsnitlige lab at vurdere aspekter af lægemiddelinduceret adfærdsmæssige plasticitet. Som med de fleste adfærdsmæssige forsøg, der yderligere værdige overvejelser ud over den grundlæggende protokol. Først, kan hver af disse teknikker opfattes som havende to faser, induktion og ekspression. "Induktion" dækker udvikling af adfærden-for CPP det sker under condition, og for overfølsomhed er det den første periode på (typisk på hinanden følgende) narkotika engagementer. "Expression" for CPP er den post-test, mens det for overfølsomhed det kan defineres som et lægemiddel udfordring gives enten efter tilbagetrækning eller blot som den sidste i træk eksponering.

Det er værd at overveje at begrænse manipulationer til en af ​​disse faser versus den anden for bedre parse deres potentielle virkninger. Vira med tidsmæssigt begrænsede effektivitet (EG, HSV) eller narkotika co-administrationer / forbehandlinger (f.eks agonister / antagonister) er nyttige i sådanne bestræbelser. Når du tager denne tilgang, kan det være yderligere nødvendigt at bruge komprimerede protokoller, således at en bestemt fase bedre vil falde sammen med viral udtryk. For CPP, er det muligt at gennemføre en to-dages condition metode, som vi har beskrevet tidligere 37. Især for bevægeapparatet sensibilisering kan ændringer i fortrydelsesperioden mellem induktion og udtryk kombineret med disse metoder, afdække processer involveret i opretholdelse eller stabiliteten af ​​adfærd. Derudover kan sådanne fremgangsmåder anvendes til at undersøge fænomenet krydssensibilisering, hvor en sensibiliseret adfærd induceres ved hjælp af en lægemiddel, men kan udtrykkes ved udsættelse for et andet lægemiddel. Da krydssensibilisering ikke forekommer mellem alle sensibiliserende misbrugsstoffer, kan fremkalde en sensibiliseret adfærd, der adskiller sig noget fra originalen, og er ikke nødvendigvis tovejs forethvert givet sæt af narkotika, kan undersøgelsen giver unikke muligheder for at forstå, hvor og hvordan forskellige stoffer påvirker hjernens plasticitet og funktion.

Korrekt fortolkning af CPP, især afhænger udelukke alternative forklaringer på resultaterne. Data genereret i en tre kamre apparat bør yderligere undersøges inden fastsættelsen subtraktion af tid brugt i saltvand-parrede side fra kokain-parrede side på post-test som præference, da en stigning i en præference for lægemiddel-parrede side, alene skyldes et fald i tid brugt i saltvand-parrede kammer sandsynligvis uegnet til en sådan fortolkning. Den midterste kammer muliggør dette resultat, da musen kan ændre tidsforbrug der i stedet for den lægemiddel-parrede kammer. Det er også muligt at observere øget tid tilbragt i den lægemiddel-parrede side på bekostning af den midterste kammer i stedet for saltvand-parrede side; velsagtens, kan dette resultat stadig være acceptabelt fortolk-ted som en stigning i præference lægemiddel. Inddragelsen af tredje rum giver en neutral kammer, der tillader uvildig placering af dyret under før og efter test sessioner 41. Selvom nyttige for adressering indledende placering skævheder, der bidrager til test-dages scores, er det tredje kammer ikke påkrævet for condition. Alternative CPP designs at funktionen to forskellige rum eller et enkelt rum med varieret stimulus konfigurationer diskuteres andetsteds 41-42.

Ethvert underskud på plads præference for et lægemiddel skal også ledsages af vurderinger af både evnen til at lære kontekstuelle foreninger og generel belønning funktion. Der er en række justeringer, der kan foretages i CPP paradigme, der kan aide i fortolkningen af ​​ændrede præference, herunder modificere prominens af UCS (lægemiddel) ved at forøge (eller formindske) antallet af bindinger eller ved hjælp af højere eller lavere lægemiddel dosis. CPP kan udføres ved anvendelse velsmagende food (f.eks, højt fedtindhold, saccharose) eller sociale interaktioner at vurdere, om den observerede ændring er specifik for lægemiddel eller er relevant for naturlige belønninger; ikke-CPP nærmer anvendelige til dette formål indbefatter intrakraniel selv-stimulering, saccharose præference, og / eller appetitforstyrrelser tilgang opgaver. Men alle disse muligheder varierer i deres evne til at imødegå den ønskede spørgsmål. Food-baserede CPP kan være særligt gavnligt, da normale reaktioner demonstrere evne til at lære og danne passende kontekstuelle foreninger med en naturlig belønning. Yderligere kontroller for vurdering af indlæringsevne omfatter opgaver, der er afhængige af kontekstuelle læring / hukommelse (kontekstuelle frygt condition og CPA). CPA har den fordel, at blive kørt på samme måde som CPP, ofte i de samme kamre, der erstatter den appetitive lægemiddel med et afskrækningsmiddel erfaringer (f.eks, lithiumchlorid injektion). Dyr, der viser underskud i CPP, men normal CPA, demonstrere en evne til at danne passende baggrundsoplysninger forenings, hvilket indikerer, at nedskrivninger i stof CPP sandsynligvis vedrører belønne (lægemiddel-specifik eller på anden måde). Én forsigtighed for CPA hjælp lithiumchlorid at overveje, er, om dette stof er en kendt behandling for enhver tilstand, der kan modelleres ved forsøgsdyrene. For eksempel har lithium behandling vist sig at modvirke læringsmangler i musemodel med fragilt X-43, hvilket ville forvirre denne kontrolmetode.

Ud over den klassiske CPP paradigme, der er potentielle udvidelser brugere kan finde nyttige, såsom test udslettelse af den lærde lægemiddel-kontekst foreningen og dens genindsættelse efter CPP. Conditioned reaktioner (CRS), først er etableret, kan opretholdes i længere perioder 19,20 når dyrene uforstyrret. Trods den relative persistens af CR, kan det effektivt slukkes ved gentagne præsentationer af CS (kontekst) i fravær af UCS (lægemiddel). To CPP extinction metoder vises i litratur: gentagen test eksponering uden injektion 21 eller re-parringer af tidligere lægemiddel-parrede side med køretøjet 22. Extinction processer afspejler ny læring, i modsætning til "aflære" af den oprindelige condition, en idé effektivt demonstreret gennem "genindsættelse." Genindsættelse er klassisk udløst af re-eksponering for UCS, der producerer inddrivelse af CR. I forbindelse med CPP, vil en enkelt injektion af træningslægemidlet forårsage dyr til at vise sted præference. Interessant mange ikke tilbyder uddannelse narkotika signaler kan også producere genindsættelse af CPP, herunder priming med alternative lægemidler 22 og en række stressfaktorer 23-26. Udryddelse, og genindtrædelsespræmie eksperimenter er af særlig interesse for stofmisbrug feltet som modeller for medicinsk behandling og tilbagefald. Interventioner, der forbedrer hastigheden af ​​udryddelse og / eller reducere størrelsen af ​​genansættelse kunne være værdifulde mål for menneskelige farmakologiske.

(f.eks 27-29). Især har imidlertid kontekst-uafhængige sensibilisering klart blevet påvist i andre undersøgelser (f.eks, 30-32). Eksperimentelle detaljer, der kan bidrage til, om en kontekst-afhængig stigning i sensibilisering kan observeres omfatter medicin dosis, eksponeringens længde, uanset om enhver gruppe skal transporteres til testen of overfølsomhed og visse aspekter af pre-eksponering for test kammer; men disse detaljer forbliver noget uklart. En metode til bestemmelse af bidrag kontekstuelle sensibilisering er at give et saltvand udfordring efter narkotika overfølsomhed 33. Anvendelsen af ​​det beskrevne paradigme minimerer bidraget af kontekst-afhængige sensibilisering som vist ved meget lidt lokomotorisk aktivering i tidligere undersøgelser upon saltvand udfordring. Den kontekstuelle bidrag til sensibilisering er blevet gennemgået i en række papirer, ofte herunder drøftelser af andre end bevægelsesaktivitet 34 adfærd.

For at begrænse forurening af lægemiddel-induceret aktivering og sensibilisering med bevægeapparatet stimulerende virkninger induceret af et hidtil ukendt miljø musene akklimatiseres til saltvandsinjektioner i tre til fire dage i begyndelsen af ​​hvert eksperiment. Som det kan ses i figur 7, mus typisk viser reduceret bevægelse mellem den første ogsidste saltvand akklimatisering dag. Desuden musene er mærkbart roligere og lettere at håndtere og injicere den sidste saltvand eksponering. Tidligere værker har testet flere stammer og genotyper af mus ved hjælp af dette paradigme og ikke kan se meget varians i saltvand akklimatisering aktivitet på tværs af dem; det er imidlertid muligt at lejlighedsvis observere meget stærke hyperaktivitet fænotyper associeret med visse genotyper, der ikke overvindes ved hjælp af denne metode. I disse tilfælde kan det være ønskeligt at udføre flere saltvand akklimatisering dage (indtil bevægelseskomponenter plateauer i hyperaktive gruppe), og derefter normalisere den hyperaktive gruppe med kontrolgruppen ved anvendelse af de sidste saltvandsinjektion dag data. Mens ikke ideelt, det giver mulighed for en mere rimelig sammenligning af virkningerne af et lægemiddel på bevægelse mellem disse grupper. Andre muligheder, der kan dæmpe ekstreme hyperaktivitet er at udstrække tilvænning trial længde før injektion hver dag med en til 5 timer, og / eller anvende længere injektion forsøg (2 - 4 timer) ever dag.

Der er yderligere overvejelser, der er vigtige for fortolkningen af ​​bevægeapparatet adfærd. Som illustreret i figur 7C, kan observerede gruppeforskelle primært drevet af forskelle i den akutte bevægelsesreaktion, satsen for sensibilisering over dage, den maksimale grænse for overfølsomhed, eller en kombination af disse faktorer. Parsing bidrag disse faktorer hver for kan være nyttig. Til dette formål kan den akutte bevægelsesreaktion analyseres statistisk alene. Så hastigheden af ​​overfølsomhed kan vurderes ved hjælp af et program, der kan kurvetilpasning og en sats normalisering proces, der diskonterer eventuelle akutte bevægeapparatet forskelle. Ændret maksimal sensibilisering er normalt afsløret i en RM ANOVA over på hinanden følgende dage eksponering narkotika, hvor opfølgende dag-for-dag post-hoc sammenligninger er væsentlige på dage efter gruppens reaktioner har toppet. Man skal være opmærksom på, at maksimal sensibilisering ikke kan bestemmesfor enhver gruppe, der opretholder en lineær bevægelsesreaktion overeksponering drug dage, så som skildret i figur 7C (middeltunge blå linie). I et sådant tilfælde, kan lægemiddeleksponering udvides til at forsøge at bestemme maksimal sensibilisering.

Endelig er det typisk bedst at sammenligne overfølsomhed mellem grupper med mindst to primære stof doser udført i separate grupper af dyr. Forskelle i nogen af ​​de ovennævnte aspekter af bevægeapparatet aktivering, på én dosis eller begge dele, bør bruges til at guide yderligere test for at udelukke andre forklaringer, herunder ændringer i udviklingen af ​​stereotypi. Gentagen udsættelse for nogle lægemidler, såsom kokain og amfetamin, ikke kun producerer sensibiliserede bevægelse på en dosis-afhængig måde, men også sensibiliserer konkurrerende stereotype adfærd. Disse stereotypier bliver særlig åbenlys ved høje doser, således at lokomotorisk sensibilisering er ofte delvist eller fuldstændigt tildækket, men afslørede igen ved indgivelse afen lavere dosis. Af denne grund kan en "underskud" i lokomotorisk sensibilisering i en forsøgsgruppe faktisk afspejler øget følsomhed over for lægemiddelinduceret udvikling af stereotypier. Vurderingen af stereotypi kan være udfordrende, men der er en række af offentliggjorte tariffer 35 og andre tilgange 36. Ved hjælp af både en generel stereotypi skala og en vurdering af specifikke adfærd anbefales, som tidligere 18 offentliggjort.

Som konklusion er en række adfærdsmæssige tests blevet udviklet i dyremodeller i et forsøg på at analysere kompleksiteten af ​​menneskelige afhængighed. Konditioneret sted præference og lokomotorisk sensibilisering er to grundlæggende tests vid udstrækning anvendes i gnavere og henholdsvis kan de være særlig nyttig ved vurderingen af ​​tidlig lægemiddel-associeret belønning og den vedvarende plasticitet induceret af gentagen brug. Der er en række overvejelser til design og fortolkning af hver type undersøgelse, hvilket gør det worthwhile til nøje at overveje de eksperimentelle mål og tidligere litteratur, når du planlægger disse vurderinger.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Forfatterne erklærer, at de ikke har nogen konkurrerende finansielle interesser.

Acknowledgments

Forfatterne takker Karen Dietz og Shari Birnbaum til tidligere input om adfærdsmæssige design overvejelser og Lauren Peca om hjælp med adfærdsmæssige test. Forfatterne anerkender også den generøse støtte fra Simons Foundation (Simons Foundation Autism Research Initiative tilskud til CWC), Nida (DA008277, DA027664, og DA030590 til CWC, F32DA027265 til LMS og F32DA036319 til RDP), den FRAXA Research Foundation og Eleanor og Miles Shore Fellowship Program (stipendium støtte til LNS), og John Kaneb Fellowship Program (stipendium støtte til MT).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Cocaine Hydrochloride USP Mallinckrodt Pharmaceuticals 0406-1520 Purchase and use (Schedule II controlled substance) for research purposes requires compliance and licensure according to state and federal law. 
Conditioned Place Preference,  Three Compartment Apparatus with Manual Doors and Lights for Mouse Med-Associates Inc. MED-CPP-MS & MED-CPP-3013 Our laboratory has used these boxes; however, many alternative boxes are available & acceptable.
PAS-Home Cage Activity Monitoring Photobeam Arrays San Diego Instruments 2325-0223 & 7500-0221 Our lab houses these arrays inside of custom built chambers, as described in the text.  There are alternatives available.
Disposable Sani-Cloth disenfecting wipes PDI 13872

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. National Institute on Drug Abuse. Drug Facts: Understanding Drug Abuse and Addiction. www.drugabuse.gov. , Available from: http://www.drugabuse.gov/publications/drugfacts/understanding-drug-abuse-addiction (2012).
  2. Kasanetz, F., et al. Transition to addiction is associated with a persistent impairment in synaptic plasticity. Science. 328 (5986), 1709-1712 (2010).
  3. Beach, H. D. Morphine addiction in rats. Can J Psychol. 11 (2), 104-112 (1957).
  4. van der Kooy, D. Chapter 13, Place Conditioning: A simple and effective method for assessing the motivational properties of drugs. Methods of Assessing the Reinforcing Properties of Abused Drugs. Bozarth, M. A. , 229-240 (2012).
  5. Carlezon, W. A. Place conditioning to study drug reward and aversion. Methods Mol Med. 84, 243-249 (2003).
  6. Prus, A. J., James, J. R., Rosecrans, J. A. Chapter 4, Conditioned Place Preference. Methods of Behavior Analysis in Neuroscience. Buccafusco, J. J. , (2009).
  7. Tzschentke, T. M. Measuring reward with the conditioned place preference (CPP) paradigm: update of the last decade. Addict Biol. 12 (3-4), 227-462 (2007).
  8. Aguilar, M. A., Rodrìguez-Arias, M., Miñarro, J. Neurobiological mechanisms of the reinstatement of drug-conditioned place preference. Brain Res Rev. 59 (2), 253-277 (2009).
  9. Feduccia, A. A., Duvauchelle, C. L. Novel apparatus and method for drug reinforcement. JoVE. (42), (2010).
  10. Brabant, C., Quertemont, E., Tirelli, E. Influence of the dose and the number of drug-context pairings on the magnitude and the long-lasting retention of cocaine-induced conditioned place preference in C57BL/6J mice. Psychopharmacology. 180 (1), 33-40 (2005).
  11. Pliakas, A. M., Carlson, R. R., Neve, R. L., Konradi, C., Nestler, E. J., Carlezon, W. A. Altered responsiveness to cocaine and increased immobility in the forced swim test associated with elevated cAMP response element-binding protein expression in nucleus accumbens. J Neurosci. 21 (18), 7397-7403 (2001).
  12. Knackstedt, L. A., Samimi, M. M., Ettenberg, A. Evidence for opponent-process actions of intravenous cocaine and cocaethylene. Pharmacol Biochem Behav. 72 (4), 931-936 (2002).
  13. Post, R. M., Rose, H. Increasing effects of repetitive cocaine administration in the rat. Nature. 260 (5553), 731-732 (1976).
  14. Marin, M. T., Cruz, F. C., Planeta, C. S. Cocaine-induced behavioral sensitization in adolescent rats endures until adulthood: lack of association with GluR1 and NR1 glutamate receptor subunits and tyrosine hydroxylase. Pharmacol Biochem Behav. 91 (1), 109-114 (2008).
  15. Henry, D. J., White, F. J. The persistence of behavioral sensitization to cocaine parallels enhanced inhibition of nucleus accumbens neurons. J Neurosci. 15 (9), 6287-6299 (1995).
  16. Hope, B. T., Simmons, D. E., Mitchell, T. B., Kreuter, J. D., Mattson, B. J. Cocaine-induced locomotor activity and Fos expression in nucleus accumbens are sensitized for 6 after repeated cocaine administration outside the home cage. Eur J Neurosci. 24 (3), 867-875 (2006).
  17. Shuster, L., Yu, G., Bates, A. Sensitization to cocaine stimulation in mice. Psychopharmacology. 52 (2), 185-190 (1977).
  18. Smith, L. N., Jedynak, J. P., Fontenot, M. R., Hale, C. R., Dietz, K. C., Taniguchi, M., Thomas, F. S., Zirlin, B. C., Birnbaum, S. G., Huber, K. M., Thomas, M. J., Cowan, C. W. Fragile X mental retardation protein regulates synaptic and behavioral plasticity to repeated cocaine administration. Neuron. 82 (3), 645-658 (2014).
  19. Mueller, D., Stewart, J. Cocaine-induced conditioned place preference: reinstatement by priming injections of cocaine after extinction. Behav Brain Res. 115 (1), 39-47 (2000).
  20. Sakoori, K., Murphy, N. P. Maintenance of conditioned place preferences and aversion in C57BL6 mice: effects of repeated and drug state testing. Behav Brain Res. 160 (1), 34-43 (2005).
  21. Bardo, M. T., Neisewander, J. L., Miller, J. S. Repeated testing attenuates conditioned place preference with cocaine. Psychopharmacologia. 89 (2), 239-243 (1986).
  22. Itzhak, Y., Martin, J. L. Cocaine-induced conditioned place preference in mice: induction, extinction and reinstatement by related psychostimulants. Neuropsychopharmacology. 26 (1), 130-134 (2002).
  23. Kreibich, A. S., Blendy, J. A. cAMP response element-binding protein is required for stress but not cocaine-induced reinstatement. J Neurosci. 24 (30), 6686-6692 (2004).
  24. Briand, L. A., Blendy, J. A. Not all stress is equal: CREB is not necessary for restraint stress reinstatement of cocaine-conditioned reward. Behav Brain Res. 246, 63-68 (2013).
  25. Redila, V. A., Chavkin, C. Stress-induced reinstatement of cocaine seeking is mediated by the kappa opioid system. Psychopharmacology. 200 (1), 59-70 (2008).
  26. Do Couto, R. ibeiro, Aguilar, B., A, M., Manzanedo, C., Rodriguez-Arias, M., Armario, A., Minarro, J. Social stress is as effective as physical stress in reinstating morphine-induced place preference in mice. Psychopharmacology. 185 (4), 459-470 (2006).
  27. Post, R. M., Lockfeld, A., Squillace, K. M., Contel, N. R. Drug-environment interaction: context dependency of cocaine-induced behavioral sensitization. Life sciences. 28 (7), 755-760 (1981).
  28. Badiani, A., Browman, K. E., Robinson, T. E. Influence of novel versus home environments on sensitization to the psychomotor stimulant effects of cocaine and amphetamine. Brain Res. 674 (2), 291-298 (1995).
  29. Li, Y., Acerbo, M. J., Robinson, T. E. The induction of behavioural sensitization is associated with cocaine-induced structural plasticity in the core (but not shell) of the nucleus accumbens. Eur J Neurosci. 20 (6), 1647-1654 (2004).
  30. Partridge, B., Schenk, S. Context-independent sensitization to the locomotor-activating effects of cocaine. Pharmacol Biochem Behav. 63 (4), 543-548 (1999).
  31. Le Foll, B., Diaz, J., Sokoloff, P. Increased dopamine D3 receptor expression accompanying behavioral sensitization to nicotine in rats. Synapse. 47 (3), 176-183 (2003).
  32. Heidbreder, C. A., Babovic-Vuksanovic, D., Shoaib, M., Shippenberg, T. S. Development of behavioral sensitization to cocaine: influence of kappa opioid receptor agonists. J Pharmacol Exp Ther. 275 (1), 150-163 (1995).
  33. Tirelli, E., Michel, A., Brabant, C. Cocaine-conditioned activity persists for a longer time than cocaine-sensitized activity in mice: implications for the theories using Pavlovian excitatory conditioning to explain the context-specificity of sensitization. Behav Brain Res. 165 (1), 18-25 (2005).
  34. Anagnostaras, S. G., Schallert, T., Robinson, T. E. Memory processes governing amphetamine-induced psychomotor sensitization. Neuropsychopharmacology. 26 (6), 703-715 (2002).
  35. Spangler, R., Zhou, Y., Schlussman, S. D., Ho, A., Kreek, M. J. Behavioral stereotypies induced by 'binge' cocaine administration are independent of drug-induced increases in corticosterone levels. Behav Brain Res. 86 (2), 201-204 (1997).
  36. Kelley, A. E. Measurement of rodent stereotyped behavior. Curr Protoc Neurosci. Chapter 8, Unit 8.8 (2001).
  37. Taniguchi, M., Carreira, M. B., Smith, L. N., Zirlin, B. C., Neve, R. L., Cowan, C. W. Histone deacetylase 5 limits cocaine reward through cAMP-induced nuclear import. Neuron. 73 (1), 108-120 (2012).
  38. Zangen, A., Solinas, M., Ikemoto, S., Goldberg, S. R., Wise, R. A. Two brain sites for cannabinoid reward. J Neurosci. 26 (18), 4901-4907 (2006).
  39. Huston, J. P., de Souza Silva, M. A., Topic, B., Müller, C. P. What's conditioned in conditioned place preference. Trends Pharmacol Sci. 34 (3), 162-166 (2013).
  40. Schechter, M. D., Calcagnetti, D. J. Trends in place preference conditioning with a cross-indexed bibliography; 1957-1991. Neurosci Biobehav Rev. 17, 21-41 (1993).
  41. Bevins, R. A., Cunningham, C. L. Chapter 9, Place Conditioning: A Methodological Analysis. Tasks and Techiniques: A sampling of methodologies for the investigation of animal learning, behavior, and cognition. Anderson, M. , 99-110 (2006).
  42. Hitchcock, L. N., Cunningham, C. L., Lattal, K. M. Cue configuration effects in the acquisition of a cocaine-induced place preference. Behav Neurosci. 128 (2), 217-227 (2014).
  43. Liu, Z. -H., Chuang, D. M., Smith, C. B. Lithium amerliorates phenotypic deficits in a mouse model of fragile X syndrome. Int J Neuropscyhopharmacol. 14 (5), 618-630 (2011).
  44. Bardo, M. T., Rowlett, J. K., Harris, M. J. Conditioned place preference using opiate and stimulant drugs: A meta-analysis. Neurosci Biobehav Rev. 19 (1), 39-51 (1995).

Tags

Adfærd kokain bevægeapparatet overfølsomhed konditioneret sted præference mus psykostimulerende
Vurdering af kokain-induceret Behavioral Sensibilisering og konditioneret Place Preference i mus
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Smith, L. N., Penrod, R. D.,… More

Smith, L. N., Penrod, R. D., Taniguchi, M., Cowan, C. W. Assessment of Cocaine-induced Behavioral Sensitization and Conditioned Place Preference in Mice. J. Vis. Exp. (108), e53107, doi:10.3791/53107 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter