Summary
यहां, हम सिलिकॉन तेल के इंट्राकैमराल इंजेक्शन द्वारा माउस आंखों में नेत्र उच्च रक्तचाप और मोतियाबिंद न्यूरोडिजेनरेशन को प्रेरित करने के लिए एक प्रोटोकॉल पेश करते हैं और पूर्वकाल कक्ष से सिलिकॉन तेल हटाने की प्रक्रिया को ऊंचा इंट्राओकुलर दबाव वापस करने के लिए सामान्य.
Abstract
ऊंचा इंट्राओकुलर प्रेशर (आईओपी) मोतियाबिंद के लिए एक अच्छी तरह से प्रलेखित जोखिम कारक है। यहां हम चूहों में स्थिर आईओपी ऊंचाई को लगातार प्रेरित करने के लिए एक उपन्यास, प्रभावी विधि का वर्णन करते हैं जो मानव विट्रेओरेटिनल सर्जरी में टैम्पोनाड एजेंट के रूप में सिलिकॉन तेल (एसओ) का उपयोग करने की पोस्ट-ऑपरेटिव जटिलता की नकल करता है। इस प्रोटोकॉल में, एसओ को पुतली को ब्लॉक करने और जलीय हास्य के प्रवाह को रोकने के लिए माउस आई के पूर्वकाल कक्ष में इंजेक्ट किया जाता है। पीछे चैंबर जलीय हास्य जमा करता है और यह बदले में पीछे के खंड के IOP बढ़ जाती है । एक एकल एसओ इंजेक्शन विश्वसनीय, पर्याप्त और स्थिर आईओपी ऊंचाई पैदा करता है, जो महत्वपूर्ण मोतियाबिंद न्यूरोडिजेनरेशन को प्रेरित करता है। यह मॉडल नेत्र क्लिनिक में माध्यमिक मोतियाबिंद की एक सच्ची प्रतिकृति है। नैदानिक सेटिंग की नकल करने के लिए, एसओ को जल निकासी मार्ग को फिर से खोलने और जलीय हास्य के प्रवाह की अनुमति देने के लिए पूर्वकाल कक्ष से हटाया जा सकता है, जिसे पूर्वकाल कक्ष के कोण पर ट्रैबेकुलर मेशवर्क (टीएम) के माध्यम से सूखा जाता है। क्योंकि आईओपी जल्दी से सामान्य हो जाता है, मॉडल का उपयोग मोतियाबिंद रेटिना गैंगलियन कोशिकाओं पर आईओपी को कम करने के प्रभाव का परीक्षण करने के लिए किया जा सकता है। यह विधि सीधी है, विशेष उपकरणया दोहराने की प्रक्रियाओं की आवश्यकता नहीं है, बारीकी से नैदानिक स्थितियों का अनुकरण करती है, और विविध पशु प्रजातियों पर लागू हो सकती है। हालांकि, मामूली संशोधनों की आवश्यकता हो सकती है।
Introduction
रेटिना गैंगलियन कोशिकाओं (आरजीसी) और उनके एक्सोन का प्रगतिशील नुकसान मोतियाबिंद की पहचान है, जो रेटिना1में एक आम न्यूरोडीजेनेरेटिव बीमारी है । यह 2040 2 तक 100 मिलियन से अधिक व्यक्तियों को 40−80 साल पुराना प्रभावित करेगा। आईओपी मोतियाबिंद के विकास और प्रगति में एकमात्र संशोधित जोखिम कारक बना हुआ है। मोतियाबिंद के रोगजनक, प्रगति और संभावित उपचारों का पता लगाने के लिए, एक विश्वसनीय, प्रजनन योग्य, और अप्रेरित प्रयोगात्मक नेत्र उच्च रक्तचाप/मोतियाबिंद मॉडल जो मानव रोगियों की प्रमुख विशेषताओं को दोहराता है, अनिवार्य है ।
आईओपी पूर्वकाल कक्ष में सिलियरी शरीर से पूर्वकाल कक्ष में जलीय हास्य प्रवाह पर निर्भर करता है और पूर्वकाल कक्ष के कोण पर ट्रैबेकुलर मेशवर्क (टीएम) के माध्यम से बहिर्वाह करता है। एक स्थिर स्थिति तक पहुंचने पर, आईओपी बनाए रखा जाता है। जब आवक अधिक हो जाती है या बहिर्वाह से कम होती है, तो आईओपी क्रमशः उगता है या गिरता है। पूर्वकाल कक्ष के कोण को कम करके या टीएम को नुकसान पहुंचाकर जलीय बहिर्वाह को कम करके, कई मोतियाबिंद मॉडल स्थापित किए गए हैं3, 4,5,6,7,8,9,10। ये मॉडल आम तौर पर अपरिवर्तनीय नेत्र ऊतक क्षति से जुड़े होते हैं, और पूर्वकाल कक्ष में उच्च आईओपी भी कॉर्नियल एडीमा और इंट्राओकुलर सूजन जैसी अवांछित जटिलताओं का कारण बनता है, जो रेटिना इमेजिंग और दृश्य कार्य को प्रदर्शन और व्याख्या करना मुश्किल बनाते हैं।
इन कमियों को दूर करने वाले मॉडल को विकसित करने के लिए, हमने सिलिकॉन तेल (एसओ) के कारण अच्छी तरह से सुप्रलेखित माध्यमिक मोतियाबिंद पर ध्यान केंद्रित किया जो मानव विट्रेओरेटिनल सर्जरी11,12की एक पश्चात जटिलता के रूप में होता है। इसलिए इसका उपयोग उच्च सतह तनाव के कारण रेटिना सर्जरी में टैम्पोनेड के रूप में किया जाता है। हालांकि, एसओ शारीरिक रूप से पुतली को ऑक्सील्ड कर सकते हैं क्योंकि यह जलीय और विट्रेसस तरल पदार्थ ों की तुलना में हल्का होता है, जो पूर्वकाल कक्ष में जलीय प्रवाह को रोकता है। बाधा जलीय हास्य संचय के कारण पीछे के कक्ष में IOP ऊंचाई का कारण बनता है । इसने हमें माध्यमिक मोतियाबिंद की प्रमुख विशेषताओं के साथ इंट्राकैमराल एसओ इंजेक्शन और पुपिलरी ब्लॉक13पर आधारित एक उपन्यास नेत्र उच्च रक्तचाप माउस मॉडल विकसित करने और चित्रित करने के लिए प्रेरित किया: प्रभावी प्यूपिलरी ब्लॉक, महत्वपूर्ण आईओपी ऊंचाई जो एसओ हटाने के बाद सामान्य हो सकती है, और मोतियाबिंद न्यूरोडिजेनरेशन।
यहां हम माउस आंख में एसओ-प्रेरित नेत्र उच्च रक्तचाप के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल पेश करते हैं, जिसमें एसओ इंजेक्शन और हटाने और आईओपी माप शामिल हैं।
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Protocol
स्टैनफोर्ड विश्वविद्यालय की संस्थागत पशु देखभाल और उपयोग समिति (आईएसयूसी) द्वारा सभी प्रक्रियाओं को मंजूरी दे दी गई है ।
1. एसओ के इंट्राकैमराल इंजेक्शन द्वारा नेत्र उच्च रक्तचाप प्रेरण
- माइक्रोपाइपेट उत्पन्न करने के लिए एक पिपेट पुलर के साथ एक ग्लास केशिका खींचकर इंट्राकैमराल एसओ इंजेक्शन के लिए एक ग्लास माइक्रोपाइपेट तैयार करें। माइक्रोपाइपेट की नोक पर एक खोलने को काटें और 35 डिग्री 40 डिग्री बेवेल बनाने के लिए माइक्रोग्राइंडर-बेवेलिंग मशीन के साथ टिप को और तेज करें।
- बेजल के किनारों को पॉलिश करें और पानी से धोकर सभी मलबे को हटा दें। उपयोग से पहले माइक्रोपिपेट को ऑटोक्लेव करें।
- कॉर्नियल एंट्री के लिए पैरासेन्टिस सुई तैयार करें। ऐसा करने के लिए, एक लूर लॉक पर 5 मिलीग्राम सिरिंज के लिए एक 32 जी सुई संलग्न करें, और इसे टेप के साथ और सुरक्षित करें। सुई बेवेल टिप चेहरा 30 डिग्री पर मोड़ें।
- पहले 10 मीटर सिरिंज पर कुंद अंत 18 जी सुई संलग्न और सुरक्षित करके एसओ इंजेक्टर तैयार करें। फिर एक छोर पर 18 जी सुई के साथ एक प्लास्टिक ट्यूब संलग्न करते हैं और दूसरे छोर के माध्यम से आवश्यक एसओ से भरें।
- प्लास्टिक ट्यूब के लिए निष्फल माइक्रोपाइपेट संलग्न करें और सिरिंज प्लंजर को एसओ के साथ पूरे माइक्रोपाइपेट को भरने के लिए धक्का दें।
2. एक आंख के लिए इंट्राकैमराल एसओ इंजेक्शन
- एक 9−10 सप्ताह पुराने पुरुष C57B6/J माउस को एक इंडक्शन चैंबर में रखें, जिसमें 3% आइसोफ्लोरीन को 3 मिन के लिए 2 एल/मिन में ऑक्सीजन के साथ मिलाया गया है ।
- इंट्रापेरिटोनी 0.3 मिलीग्राम/ग्राम शरीर के वजन पर 2,2,2-ट्राइब्रोमोथेनॉल इंजेक्ट करें।
नोट: केटामाइन/जाइलाज़ीन के विपरीत, 2,2,2-ट्राइब्रोमोनॉल स्पष्ट पुतली फैलाव का कारण नहीं बनता है। - एक अंगूठे चुटकी और मूंछ या पूंछ के आंदोलन की कमी के लिए प्रतिक्रिया की कमी के लिए जांच संवेदनानुसार शक्ति का निर्धारण करने के लिए ।
- माउस को एक सर्जरी प्लेटफॉर्म पर पार्श्व स्थिति में रखें। प्रक्रिया के दौरान इसकी संवेदनशीलता को कम करने के लिए इंजेक्शन से पहले कॉर्निया में 0.5% प्रोपैराकेन हाइड्रोक्लोराइड की एक बूंद लगाएं।
- लिम्बस से लगभग 0.5 मिमी, सुपरोटेम्पोरल क्वाड्रेंट में 32 ग्राम पैरासेंटेसिस सुई के साथ प्रवेश चीरा बनाएं।
- पूर्वकाल कक्ष में भेदी से पहले लगभग 0.3 मिमी के लिए कॉर्निया की परतों के माध्यम से सुरंग। लेंस या आईरिस को न छूने का ध्यान रखें।
- सुरंग (पैरासेंटेसिस) के माध्यम से पूर्वकाल कक्ष से कुछ जलीय हास्य (लगभग 1−2 μL) जारी करने के लिए सुई को धीरे-धीरे वापस लें।
- आईओपी को और कम करने के लिए ~ 8 मिन का इंतजार करें। यह कॉन्ट्रालेटरल, कंट्रोल आई को मापने से तय किया जा सकता है।
- कॉर्नियल सुरंग के माध्यम से पूर्वकाल कक्ष में एसओ के साथ ग्लास माइक्रोपाइपेट को प्रीलोडेड डालें, जिसमें बेवेल आईरिस सतह पर नीचे का सामना कर रहा है।
- सिरिंज प्लंजर को धीरे-धीरे पूर्वकाल कक्ष में इंजेक्ट करने के लिए पुश करें जब तक कि एसओ बूंद आईरिस सतह के अधिकांश को कवर न कर दे, ~ 2.3−2.4 मिमी व्यास में।
- माइक्रोपिपेट को धीरे-धीरे वापस लेने से पहले 10 एस अधिक के लिए पूर्वकाल कक्ष में छोड़ दें।
- धीरे से ऊपरी पलक धक्का कॉर्निया चीरा बंद करने के लिए तो रिसाव को कम करने के लिए ।
- आंखों की सतह पर एंटीबायोटिक मरहम (बैसिट्रासिन-नियोमाइसिन-पॉलीमाइक्सिन) लगाएं।
- प्रक्रिया के दौरान, अक्सर कृत्रिम आँसू के साथ कॉर्निया गीला।
- एनेस्थीसिया से पूरी तरह से बरामद होने तक माउस को हीटिंग पैड पर रखें।
3. एसओ को हटाना
- सिंचाई व्यवस्था तैयार करें।
- निर्माता के निर्देशों के अनुसार सिंचाई समाधान तैयार करें और इसे सिंचाई की बोतल में रखें। सर्जरी प्लेटफॉर्म के ऊपर सिंचाई समाधान की बोतल को 110−120 सेमी (81−88 एमएमएचजी) तक बढ़ा दें।
- सिंचाई समाधान की बोतल के लिए सेट एक चतुर्थ प्रशासन संलग्न करें। चतुर्थ ट्यूबिंग से हवा के बुलबुले निकालें। आईवी ट्यूबिंग तक 20 डिग्री चेहरे पर झुका हुआ 33 जी सुई कनेक्ट करें।
- ड्रेनेज सिस्टम तैयार करने के लिए 1 मिलीज सिरिंज से प्लंजर निकालें। सिरिंज के लिए एक 33 जी सुई संलग्न करें और सुई को 20 डिग्री तक मोड़ें।
- पूर्वकाल कक्ष से एसओ निकालें।
- इंट्रापेरिटोनी 2,2,2-ट्राइब्रोमोथेनॉल (0.3 मिलीग्राम/जी शरीर का वजन) इंजेक्ट करें। संवेदनावक शक्ति और मूंछ या पूंछ के आंदोलन की कमी का निर्धारण करने के लिए अंगूठे चुटकी के लिए प्रतिक्रिया की कमी के लिए जांच करें ।
- माउस को एक सर्जरी प्लेटफॉर्म पर रखें और टेप के साथ पार्श्व स्थिति में सुरक्षित करें। इसकी संवेदनशीलता को कम करने के लिए कॉर्निया में 0.5% प्रोपैराकेन हाइड्रोक्लोराइड की एक बूंद लागू करें।
- प्रीमेड 32 जी पैरासेंटेसिस सुई का उपयोग करके एसओ बूंद के किनारे पर ~ 2 से 5 बजे के बीच कॉर्निया के लौकिक चतुर्भुज में दो चीरे लगाएं।
- एक कॉर्नियल चीरा, अधिकतम गति के माध्यम से सिंचाई समाधान से जुड़ी 33 ग्राम सिंचाई सुई डालें।
- अन्य कॉर्नियल चीरा के माध्यम से एक प्लंजर के बिना सिरिंज से जुड़ी एक और 33 ग्राम जल निकासी सुई डालें ताकि सिंचाई समाधान के साथ सिंचाई करते समय एसओ बूंद को पूर्वकाल कक्ष से बाहर निकलने की अनुमति दी जा सके।
- जल निकासी सुई वापस लें, फिर सिंचाई सुई।
- अपनी सामान्य गहराई को बनाए रखने और कॉर्नियल चीरा बंद करने के लिए प्रेस करने के लिए पूर्वकाल कक्ष में एक हवा बुलबुला इंजेक्ट करें।
- दोनों आंखों पर एंटीबायोटिक मरहम लगाएं।
- एनेस्थीसिया से पूरी तरह से बरामद होने तक माउस को हीटिंग रिकवरी पैड पर रखें।
4. सप्ताह में एक बार आईओपी माप
- माउस को 3 मिन के लिए 2L/min पर ऑक्सीजन के साथ मिश्रित 3% आइसोफ्लोरीन के साथ एक प्रेरण कक्ष में रखें।
- इंट्रापेरिटोनी जाइलाज़ीन और केटामाइन (0.01 मिलीग्राम जाइलाज़ीन/जी, 0.08 मिलीग्राम केटामाइन/जी) इंजेक्ट करें।
- पूरी प्रक्रिया में कृत्रिम आंसू लगाकर कॉर्निया नम रखें।
- पुतली को पूरी तरह से डिलेट करने की अनुमति देने के लिए लगभग 15 मिन का इंतजार करें।
- उत्पाद निर्देशों के अनुसार एक टोनोमीटर का उपयोग कर दोनों आंखों के आईओपी को मापें। माउस आई के पास टोनोमीटर लाएं। जांच की नोक से लगभग 3−4 मिमी पर माउस कॉर्निया तक दूरी रखें। एक रीडिंग जेनरेट करने के लिए मापने वाला बटन 6x दबाएं। मतलब आईओपी प्राप्त करने के लिए प्रत्येक आंख से तीन मशीन जनित रीडिंग प्राप्त की जाती है।
- एसओ इंजेक्शन के बाद 8 सप्ताह में जानवरों का बलिदान करें और पूरे माउंट रेटिना, आरजीसी गिनती, ऑप्टिक तंत्रिका (ऑन) अर्ध-पतली वर्गों की इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री करें, और जीवित अक्षों की मात्रा, जिन्हें13से पहले वर्णित किया गया है।
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Representative Results
इंजेक्शन के तुरंत बाद हम आसानी से चूहों की पहचान कर सकते हैं जो स्थिर नेत्र उच्च रक्तचाप का उत्पादन नहीं करते हैं क्योंकि एसओ बूंदें बहुत छोटी (‧1.5 मिमी)13हैं। इन जानवरों को बाद के प्रयोगों से बाहर रखा गया है। इंजेक्शन प्रक्रियाओं के बाद, एसओ इंजेक्शन चूहों के 80% से अधिक 1.6 मिमी से बड़ी बूंदों के साथ खत्म होता है। हम एक ही एसओ इंजेक्शन के बाद 8 सप्ताह के लिए एक सप्ताह में एक बार इन माउस आंखों के IOP मापा। एसओ प्राप्त करने वाली आंख का आईओपी उच्च बना रहा, आम तौर पर कॉन्ट्रालेटरल नियंत्रण आंख के आईओपी को दोगुना कर दिया गया, जो प्रभावी छात्र अवरुद्ध(चित्रा 1)का संकेत देता है। माउस कॉर्निया में एडीमा को इंट्राकैमराल इंजेक्शन के बाद लाइट विच्छेदन माइक्रोस्कोप के तहत चेक किया जा सकता है जो आम तौर पर वसूली के लिए 2−3 दिन लगते हैं। पुतली फैलाव में समय लगता है, और आईओपी माप लेने से पहले किसी को छात्र फैलाव का इंतजार करना चाहिए। इस प्रकार, हम एक इंजेक्शन के बाद भी जल्द ही आईओपी को मापने की कोशिश नहीं करते हैं। इसी कारण से, हम आईओपी को अक्सर मापने की सिफारिश नहीं करते हैं। चूहों के एक अन्य समूह के साथ, हमने एसओ इंजेक्शन के 2 सप्ताह बाद पूर्वकाल कक्ष से एसओ को बाहर निकाल दिया, और हमने एक और सप्ताह तक इंतजार किया ताकि कॉर्निया को आईओपी को मापने से पहले ठीक होने की अनुमति दी जा सके, जिसने आईओपी को सामान्य करने के लिए वापस कर दिया(चित्रा 1)।
आरजीसी पर एसओ इंजेक्शन द्वारा प्रेरित नेत्र उच्च रक्तचाप के प्रभाव को निर्धारित करने के लिए, हमने आरबीपीएमएस द्वारा रेटिना साबुत के परिधीय क्षेत्रों में जीवित आरजीसी सोमता को14,15 और पीपीडी द्वारा ऑन सेमीथिन क्रॉस वर्गों में जीवित अक्षत 16 को एसओ इंजेक्शन के बाद 8 सप्ताह बाद16 धुंधला कर दिया। मोतियाबिंद आरजीसी मौत और एक्सोन अध: पतन एसओ प्रेरित नेत्र उच्च रक्तचाप के तहत पता चला आंखों (SOHU)(चित्रा 2)में नाटकीय थे । इस बारे में और अधिक जानकारी चर्चा अनुभाग में प्रदान की गई है ।
चित्रा 1: एसओ आंखों और कॉन्ट्रालेटरल नियंत्रण आंखों में आईओपी माप, के साथ या बिना एसओ हटाने। एसओ = एसओ इंजेक्शन आंखें; सीएल = कॉन्ट्रालेटरल कंट्रोल आंखें। डेटा का मतलब ± एसईएम, एन = 12 के रूप में प्रस्तुत किया जाता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
चित्रा 2: सोहू में मोतियाबिंद आरजीसी सोमा और एक्सोन पतन । (ए)ऊपरी पैनल परिधीय क्षेत्र को दर्शाया गया है जिसमें पूरे घुड़सवार रेटिना के एसओ इंजेक्शन के बाद 8 सप्ताह में आरजीसी (आरबीपीएमएसएस +, लाल) दिखाया गया है । स्केल बार = 20 μm. लोअर पैनल पर पीपीपीडी के साथ दाग के पार वर्गों की अर्द्ध पतली छवियों को दर्शाया गया है 8 सप्ताह में पीपीडी के साथ दाग के बाद एसओ इंजेक्शन । स्केल बार = 10 μm.(B)परिधीय रेटिना (एन = 12) में आरजीसी जीवित रहने के परिमाणीकरण डेटा और कॉन्फिडेंस (एन = 10) में एक्सोन ्स के बाद 8 सप्ताह में कॉन्ट्रालेटरल कंट्रोल (सीएल) आंखों की तुलना में एसओ इंजेक्शन। डेटा का मतलब के रूप में प्रस्तुत किया जाता है ± S.E.M. ***: पी एंड एलटी; 0.0001; छात्र की बनती टी परीक्षा। आरजीसी = रेटिना गैंगलियन सेल; = ऑप्टिक तंत्रिका पर। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।
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Discussion
यहां हम एसओ के इंट्राकैमराल इंजेक्शन द्वारा माउस आंख में निरंतर आईओपी ऊंचाई को प्रेरित करने के लिए एक सरल लेकिन प्रभावी प्रक्रिया प्रदर्शित करते हैं। इस प्रक्रिया को माइक्रोस्कोप के तहत माइक्रोडिसेक्शन में अनुभव के साथ किसी के द्वारा जल्दी से सीखा जा सकता है। विफलता का प्राथमिक संभावित जोखिम कॉर्नियल चीरा से एसओ का रिसाव है। हालांकि, एसओ का उपयोग करने के फायदों में से एक यह है कि क्योंकि तेल की बूंद दिखाई देती है और मापने योग्य है, हम आसानी से चूहों की पहचान कर सकते हैं जिन्हें इंजेक्शन के तुरंत बाद स्थिर नेत्र उच्च रक्तचाप को प्रेरित करने और बाद के प्रयोगों से बाहर करने के लिए बहुत छोटी बूंदें प्राप्त होती हैं। हम नियमित रूप से एक 80% सफलता दर हासिल की है और एक छोटे से एसओ बूंद (‧1.5 मिमी)13के कारण चूहों के बारे में 20% बाहर रखा. हालांकि, एक अनुभवी सर्जन जो कॉर्निया की परतों के भीतर एक अपेक्षाकृत लंबी सुरंग (0.3 मिमी) बना सकता है, बेकल्ड टिप के साथ पूर्वकाल कक्ष में कॉर्निया को भेदने से पहले लगभग बाहरी उद्घाटन की तुलना में कॉर्नियल सुरंग के भीतर खोलने से रोक सकता है। इसलिए, लगभग सभी चूहों को 1.8 मिमी से बड़ा एसओ बूंद के साथ इंजेक्ट किया गया था। सुरंग की लंबाई के अलावा, कुछ अन्य महत्वपूर्ण बिंदु जोर देने लायक हैं। सबसे पहले, यह इंजेक्शन आंख में IOP कम रखने के लिए पूर्वकाल कक्ष से बाहर एसओ धक्का से बचने के लिए महत्वपूर्ण है । एक आम गलती बहुत ज्यादा एसओ को इंजेक्ट करना है, जिससे रिसाव आसान हो जाता है। हम पूर्वकाल कक्ष में एसओ की मात्रा को सीमित करते हैं ताकि यह लगभग, लेकिन पूरी तरह से नहीं, आईरिस सतह को कवर करता है। इस एसओ बूंद का व्यास ~ 2.3−2.4 मिमी है। दूसरा, कॉर्नियल सुरंग चीरा लिम्बस के लिए जितना संभव हो उतना करीब बनाया जाता है ताकि चीरा को आईरिस के करीब ले जाने की अनुमति दी जा सके लेकिन इसे चोट नहीं पहुंचाई जा सके, ताकि आईरिस आसानी से चीरा लगा सके। तीसरा, इंजेक्शन की गति पूर्वकाल कक्ष में एसओ के अत्यधिक ओवरफ्लो से बचने के लिए यथासंभव धीमी होनी चाहिए। चौथा, इंजेक्शन के बाद ऊपरी पलक मालिश कॉर्नियल चीरा बंद करने में मदद करती है और कभी-कभी परिधीय आइरिस के पूर्वकाल सिनेचिया को कॉर्नियल चीरा बंद करने में सहायता करती है, और इसलिए तेल रिसाव से बचने के लिए।
आईओपी में केवल आंख के पीछे वाले हिस्से में वृद्धि हुई है, लेकिन पूर्वकाल कक्ष में नहीं, जिससे यह इस मॉडल की अनूठी विशेषता बन गई है। छात्र अवरुद्ध पूर्वकाल कक्ष में जलीय हास्य प्रवाह को रोकता है और इसलिए केवल पीछे के हिस्से में IOP बढ़ जाती है । आईरिस और बड़ी आंखलेंस के साथ एसओ द्वारा गठित शारीरिक बाधा पूर्ववर्ती कक्ष को पीछे के खंड से काट सकती है, जो केवल पीछे के खंड में आईओपी ऊंचाई को सीमित कर सकता है, जहां जलीय सामग्री जमा होती है। जब माउस पुतली फैलाव के बाद एसओ बूंद से बड़ा होता है, तो पूर्वकाल और पीछे के कक्ष फिर से जुड़े होते हैं, जिससे पूर्वकाल कक्ष में आईओपी की त्वरित वृद्धि जलीय बाढ़ से होती है। इसलिए, एक टोनोमीटर केवल पुपिलरी ब्लॉक को हटाने के बाद बढ़ी हुई आईओपी का पता लगा सकता है, इसलिए पीछे के सेगमेंट में सच्चे आईओपी को निस्संदेह कम करके आंका जाता है। इसलिए, हमने इस मॉडल को एसओ-प्रेरित नेत्र उच्च रक्तचाप के तहत पता लगाया मॉडल (SOHU) नाम दिया, जो मॉडल की इस प्रमुख विशेषता को अधिक सटीक और उपयोगी रूप से दर्शाता है। सबसे अच्छा होगा कि वह सीधे पीछे के सेगमेंट में आईओपी को माप ने में सक्षम हो, लेकिन अभी तक यह संभव नहीं है। सोहू मॉडल के इस अनूठे रोगजनन में दो लाभप्रद विशेषताएं हैं: पहला, प्रायोगिक आंखों में स्पष्ट नेत्र तत्व होते हैं जो दृश्य कार्य और आकृति विज्ञान के वीवो मूल्यांकन में अनुमति देते हैं और दूसरा, गंभीर मोतियाबिंद न्यूरोडिजेनरेशन न्यूरोप्रोटेक्ट्स के परीक्षण के किसी भी लाभ का पता लगाने की अनुमति देता है।
एसओ इंजेक्शन अस्थायी रूप से कॉर्नियल एडीमा का कारण बन सकता है और हम आईओपी मापन को बहुत जल्दी या अक्सर नहीं करने की सलाह देते हैं। हमने सोहू आंखों में पूर्वकाल कक्ष या कॉर्निया में किसी भी सूजन का पता नहीं लगाया, हालांकि हमें एसओ इंजेक्शन प्राप्त करने वाले 100 चूहों में कॉर्निया नियोवैस्कुलराइजेशन के दो उदाहरणों का सामना करना पड़ा।
क्योंकि इसलिए मानव रोगियों और चूहों दोनों में नेत्र उच्च रक्तचाप का कारण बनता है, यह बताना उचित है कि इस वैचारिक उपन्यास और व्यावहारिक रूप से महत्वपूर्ण मोतियाबिंद मॉडल को बड़े जानवरों के लिए अनुकूलित किया जा सकता है जो पूर्वनैदानिक अनुप्रयोगों के लिए अधिक उपयुक्त हैं। तंत्रिका समारोह और इस मॉडल की आकृति विज्ञान में घाटे के लक्षण वर्णन निश्चित रूप से अंय जांचकर्ताओं को प्रोत्साहित करने के लिए इसका लाभ लेने के लिए मोतियाबिंद के बारे में महत्वपूर्ण सवालों को आगे बढ़ाने और, और भी अधिक मोटे तौर पर, रोगों है कि RGC और पर प्रेरित अध : पतन.
संक्षेप में, यह एक सीधा पशु मोतियाबिंद मॉडल है जिसमें विशेष उपकरणया दोहराने वाली चोटों की आवश्यकता नहीं होती है और यह अन्य जानवरों की प्रजातियों पर लागू हो सकती है। दिलचस्प बात यह है कि सोहू मॉडल की आईओपी ऊंचाई को पूर्वकाल कक्ष से तेल को हटाकर उलट दिया जा सकता है, इस प्रकार यह आईओपी कम करने वाले उपचारों के साथ संयुक्त न्यूरोप्रोटेक्टिव उपचार की स्क्रीनिंग के लिए उपयोगी है।
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Disclosures
लेखकों के पास खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।
Acknowledgments
इस काम को NIH अनुदान EY024932, EY023295, और YY028106 YH द्वारा समर्थित है ।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 0.5% proparacaine hydrochloride | Akorn, Somerset | ||
| 10mL syinge | BD | Luer-Lok Tip | |
| 18G needle | BD | with Regular Bevel, Needle Length:25.4 mm | |
| 2,2,2-Tribromoethanol (Avertin) | Fisher Scientific | CAS# 75-80-9 | 50g |
| 32G nano | BD | 320122 | BD Nano Ultra Fine Pen Needle-32G 4mm |
| 33G ophalmology needle | TSK/ VWR | TSK3313/ 10147-200 | |
| 5mL syinge | BD | Luer-Lok Tip | |
| AnaSed Injection (xylazine) | Butler Schein | 100 mg/ml, 50 ml | |
| artificial tears | Alcon Laboratories | 300651431414 | Systane Ultra Lubricant Eye Drops |
| BSS PLUS Irrigating solution | Alcon Laboratories | 65080050 | |
| Dual-Stage Glass Micropipette Puller | NARISHIGE | PC-10 | |
| EZ-7000 Classic System | EZ system | ||
| Isoflurane | VetOne | 502017 | isoflurane, USP, 250ml/bottle |
| IV Administration sets | EXELint/ Fisher | 29081 | |
| KETAMINE HYDROCHLORIDE INJECTION | VEDCO | 50989-996-06 | KETAVED 100mg/ml * 10ml |
| microgrind bevelling machine | NARISHIGE | EG-401 | |
| Miniature EVA Tubing | McMaster-Carr | 1883T4 | 0.05" ID, 0.09" OD, 10 ft. Length |
| silicon oil (SILIKON) | Alcon Laboratories | 8065601185 | 1,000 mPa.s |
| Standard Glass Capillaries | WPI/ Fisher | 1B150-4 | 4 in. (100mm) OD 1.5mm ID 0.84mm |
| TonoLab tonometer | Colonial Medical Supply, Finland | ||
| veterinary antibiotic ointment | Dechra Veterinary | 1223RX | BNP ophthalmic ointment, Vetropolycin |
References
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