Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

En modifisert to nyre en klipp mus modell av renin regulering i nyrearterie stenose

Published: October 26, 2020 doi: 10.3791/61058
Automatic Translation
1, 1, 1, 1
1Department of Medicine/Clinical Pharmacology Division, Vanderbilt University Medical Center

Summary

En modifisert 2 nyre 1 klipp (2K1C) Goldblatt musemodell ble utviklet ved hjelp av polyuretanrør for å initiere nyrearteriestenose, noe som induserte en økning i reninuttrykk og nyreskade. Her beskriver vi en detaljert prosedyre for å forberede og plassere mansjetten på nyrearterien for å generere en reproduserbar og konsistent 2K1C musemodell.

Abstract

Nyrearteriestenose er en vanlig tilstand hos pasienter med koronar eller perifer vaskulær sykdom der reninangiotensinaldosteronsystemet (RAAS) er overaktivert. I denne sammenheng er det en innsnevring av nyrearteriene som stimulerer en økning i uttrykket og frigjøringen av renin, den hastighetsbegrensende proteasen i RAAS. Den resulterende økningen i reninuttrykk er en kjent driver for renovaskulær hypertensjon, ofte forbundet med nyreskade og endeorganskade. Dermed er det stor interesse for å utvikle nye behandlinger for denne tilstanden. Den molekylære og cellulære mekanismen for reninkontroll ved nyrearteriestenose er ikke fullt ut forstått og garanterer videre undersøkelse. For å indusere nyrearteriestenose hos mus ble det utviklet en modifisert 2 nyre 1 klipp (2K1C) Goldblatt musemodell. Den høyre nyren ble stenosert i villtype mus og humbugopererte mus ble brukt som kontroll. Etter nyrearteriestenose bestemte vi reninuttrykk og nyreskade. Nyrer ble høstet, og friske cortices ble brukt til å bestemme protein og mRNA-uttrykk av renin. Denne dyremodellen er reproduserbar og kan brukes til å studere patofysiologiske responser, molekylære og cellulære veier involvert i renovaskulær hypertensjon og nyreskade.

Introduction

Nyrearteriestenose (RAStenosis) er et ugjennomtrengelig problem som påvirker ca 6% av personer over 65 og hos opptil 40% av personer med koronar eller perifer vaskulær sykdom 1,2. Nåværende behandlinger for sykdommen er begrenset; Derfor er det et kritisk behov for å utvikle nye terapier for å behandle renovaskulær hypertensjon eller resistent hypertensjon indusert av RAStenosis. Renin angiotensin aldosteron system (RAAS) er nøkkelveien involvert i patogenesen av RAStenosis indusert hypertensjon eller renovaskulær hypertensjon 3,4. Kjente terapier rettet mot RAAS, som ACE-hemmere eller angiotensinreseptorblokkere, lindrer hypertensjon, men trenger nøye undersøkelse for nyresvikt og hyperkalemi 5,6,7. Renin katalyserer det hastighetsbegrensende trinnet i RAAS; det omdanner angiotensinogen til angiotensin I. Ved aterosklerose forårsaker plakkdannelse innsnevring av nyrearterien som driver reninsekresjon, noe som resulterer i renovaskulær hypertensjon og nyreskade8. En rekke studier har rapportert økte nivåer av oksidativt stress under renovaskulær hypertensjon hos mennesker, som ble bekreftet med to nyre ett klipp (2K1C) mus modell samt andre hypertensive dyremodeller 2,9,10,11,12,13,14,15,16 . Den molekylære mekanismen for reninekspresjonskontroll under RAStenosis indusert renovaskulær hypertensjon er ikke godt forstått og garanterer videre undersøkelse.

Eksperimentelle dyremodeller som pålitelig og reproduserbart rekapitulerer RAStenosis er viktige for å belyse de cellulære og molekylære mekanismene for reninuttrykkskontroll for utvikling av nye terapier. 2K1C-musemodellen er en veletablert eksperimentell modell for å studere patogenesen av renovaskulær hypertensjon17,18,19,20. Denne modellen genereres ved innsnevring av nyrearterien ved hjelp av et klipp 17,20,21, og produserer derfor okklusjon av nyrearterien som resulterer i en økning i reninuttrykk og hypertensjon 17,19,20,21. Imidlertid er det ingen tekniske rapporter tilgjengelig, som beskriver en trinnvis prosedyre for å generere nyrearteriestenose i dyremodeller.

Konvensjonelle U-formede sølvklemmer, polyuretanrør og andre klips har blitt brukt til å innsnevre nyrearterien for å indusere nyrearteriestenose. Noen studier har vist at klippets design og materiale er avgjørende for å oppnå pålitelige og reproduserbare data med dyremodellen 2K1C. Ifølge Lorenz et al., induserer bruken av konvensjonelle U-designede sølvklipp en lav suksessrate for hypertensjon (40-60%)21. På grunn av klipsdesignet presses nyrearterien lateralt, noe som utløser noen få innsnevringer og større sannsynlighet for å bli løsnet fra nyrearterien. Sølvformbarhet og duktilitet kan tillate endringer i klippbredder; derfor forårsaker forskjellige hypertensjonsnivåer blant mus. Sølvdioksider på klippet kan forårsake perivaskulær betennelse, intim proliferasjon og vevgranulering, og endrer nyrearteriediameteren22. På grunn av variasjonen i nivåene av hypertensjon oppnådd med den konvensjonelle U-design sølvklemmen, har Warner et al. og Lorenz et al. med hell brukt en rundere-design polyuretanrør for å initiere nyrearteriestenose hos mus, og genererer en mer pålitelig og konsistent induksjon av de to nyre ett klipp dyremodell20,21.

I denne rapporten beskriver vi en kirurgisk protokoll for å generere eksperimentell RAStenosis hos mus, ved hjelp av polyuretanslangen for å innsnevre nyrearterien. Polyuretan runddesignet mansjett er en mer reproduserbar, pålitelig og billig klips for å generere stenose i mus. Målet med denne eksperimentelle modellen er å studere og definere den molekylære og cellulære mekanismen for reninuttrykkskontroll under nyrearteriestenose. Vi bekreftet suksessen til RAStenosis mus modell ved å måle renin uttrykk og nyreskade markør nøytrofil gelatinase-assosiert lipokalin (N-GAL).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Mus ble plassert og tatt vare på Vanderbilt University Medical Center (VUMC) Division of Animal Care etter National Institutes of Health (NIH) retningslinjer og Guide for omsorg og bruk av laboratoriedyr, US Department of Health and Human Services. Alle dyreprosedyrer ble godkjent av VUMC Institutional Animal Care and Use Committee før forsøkene startet.

1. Forberedelse og disseksjon av dyr

  1. Slå på germinator og vannpumpe på varmeputen ca 30 min før du starter operasjonen.
  2. Skjær 0,5 mm lengde polyuretanrør med en skarp skalpell. Fjern 0,2 mm av omkretsen ved å lage et kutt på langs for å lage en mansjett.
    MERK: Dette er en kritisk del av nyrearteriestenoseprosedyren som krever ekstrem presisjon, oppmerksomhet på detaljer og tålmodighet. Prøv å kutte flere biter av polyuretanrør om gangen. Utfør all denne prosedyren under mikroskop.
  3. Før du går videre, ta på kirurgiske sterile hansker og en kirurgisk maske.
  4. Bruk C57BL/6 villtype (WT) mus på 6-8 uker. Bruk like mange mannlige og kvinnelige mus for å unngå kjønnsforstyrrelser.
  5. Registrer vekten av musene før du utfører kirurgi. Den ideelle vekten for å utføre nyrearteriestenose med polyuretanrør er 18-22 g. Håndter musene forsiktig og ikke rør mens du injiserer anestesien. Administrer preoperativ analgesi (Ketofgen, 5 mg/kg body wieght).
    MERK: Mens du overfører musene fra deres boligrom til operasjonsrommet, bær dem med stor mildhet og forsiktighet for å unngå agitasjon. Å bære musebur i hendene i stedet for en vogn anbefales på det sterkeste.
  6. Bedøv musene med en blanding av ketamin (100 mg/kg kroppsvekt) og xylazin (10 mg/kg kroppsvekt) via intraperitoneale (I.P.) injeksjoner.
  7. Plasser musen tilbake inne i buret til den er helt bedøvet. Det tar ca 4-5 minutter før musen er helt bevisstløs. Klyp halen eller tåen med tang for å sjekke om musen er helt bevisstløs og klar for operasjonen.
  8. Legg musen på ryggen på et papirhåndkle. Fjern håret i lateral buk ved hjelp av en elektrisk hårklipper som følger motsatt retning av hårvekst. Etter barbering av operasjonsstedet, rengjør området med en kirurgisk skrubb som inneholder jod (eller klorhexidin) etterfulgt av en skylling med 70% etanol (eller steril saltvann).  Gjenta 3 ganger.
    MERK: Hårfjerningsprosedyren må utføres på litt avstand eller helst på en annen benk enn operasjonsprosedyrebenken for å unngå hårforstyrrelser og hårforurensning under operasjonsprosedyren.
  9. Dekk varmeputen med et sterilt ark. Ta musen til kirurgisk benk og legg på det sterile arket, vendt mot musens høyre sideside mot mikroskopet. Oppretthold en konstant putetemperatur på 37 °C med sirkulerende vann.
  10. Åpne den steriliserte posen som inneholder alt kirurgisk utstyr. Bruk et dissekeringsmikroskop og steril skarp saks, lag et lite flankesnitt (nær 13th thoracic ribbe, den siste ribben i musen) og ca 0,5 cm fra ryggvirvlene. Fortsett langs lumbale ryggvirvler og gjør et 1 tommers snitt.
  11. Trekk tilbake huden og muskelen for å eksponere nyrene.
  12. Rengjør og fjern det omkringliggende fettet ved hjelp av sterile bomullspinner for å isolere nyrearterien. Isoler nyrenerven fra nyrearterien ved hjelp av buede tang.
  13. Når du utfører sham kirurgi, bruk suturer for å lukke huden og bruk antibiotika til det lukkede såret, og fortsett deretter til postoperativ behandling. Hvis ikke, fortsett med følgende avsnitt for å stenose arterien.
    MERK: Hvert eksperiment bør ha humbugdyr som kontroller av det kirurgiske inngrepet. Sham dyr består av mus som har gått gjennom den kirurgiske prosedyren for å utsette nyrearterien uten å plassere mansjett på den.

2. Høyre nyrearteriestenose

  1. Plasser to nylonsuturer under høyre nyrearterie, lag løse knuter, og plasser deretter mansjetten rundt hovedpulsåren omtrent like langt mellom nyre- og aortabifurkasjonen
  2. Lukk mansjetten med nylonsuturene. Lag fire knuter for hver sutur for å unngå sannsynligheten for å miste suturene etter operasjonen.
  3. Lukk snittet i muskelen ved å bruke en enkel kontinuerlig sutur.
  4. Lag enkle avbrutte suturer for å lukke huden.
  5. Administrer IACUC-godkjente analgetika.
    MERK: Autoklav kirurgiske verktøy før hver bruk. Hvis mer enn en operasjon utføres samtidig, tørk alle brukte verktøy med en steril alkoholmåler og legg dem i varm germinator i 15-30 s etter hver operasjon. Bytt sterile hansker også for hver mus.

3. Postoperativ behandling

  1. Returner mus til buret og la buret være halvt på, halvt av, en sirkulerende vannvarmepute i 2 - 3 timer. Legg gel diett utvinning mat inne i buret.
  2. Administrer smertestillende (ketoprofen) intraperitonealt (dose: 5 mg/kg kroppsvekt) neste dag.
  3. Vei musene de neste to dagene; hvis noen mus mister mer enn 20% av vekten, kontakt veterinæren og avgjøre om dyret må avlives etter den aktuelle IACUC-autoriserte prosedyren.
  4. Overvåk musene daglig for å vurdere rødhet, hevelse, smerte eller infeksjon.
  5. Søk veterinærkonsultasjon for postoperative komplikasjoner i samsvar med de institusjonelle IACUC-retningslinjene.

4. Vevshøsting

  1. Høst vev 3 uker etter kirurgisk prosedyre. Ta opp vekten på hver mus.
  2. Avliv musen med en IACUC-godkjent prosedyre.
  3. Plasser musen på en steril plattform i liggende stilling for å dissekere.
  4. Sikre og strekk lemmer for å begrense bevegelse.
  5. Spray musene grundig med 70% etanol.
  6. Lag et midtlinjesnitt for å åpne magen og brystområdet ved hjelp av skarp saks.
  7. Trekk tilbake huden og bukhinnen.
  8. Utsett hjertet forsiktig og punkter høyre ventrikel og ekssanguiner musen.
  9. Fjern begge nyrene ved hjelp av tang. Nyrer er plassert på baksiden av musene.
    MERK: Ikke bland begge nyrene. Vær oppmerksom på stenoserte, humbug og kontralaterale nyrer.
  10. Fjern nyrekapselen, rengjør dem fra noe fett og registrer vekten av hver nyre separat.
  11. Kutt en langsgående del av begge nyrene og fast i 4% PFA over natten ved 4 ° C for senere å bli behandlet for paraffininnbygging, for å utføre in situ hybridisering (ISH) og immunhistokjemi (IHC). Følg ISH- og IHC-protokoller som rapportert23,24.
  12. Isoler cortex av gjenværende nyre og flash fryse i flytende nitrogen for å utføre western blot. Oppbevar prøver ved -80 °C til analyse.
  13. Kvantifisere renin og N-GAL-uttrykk med Western blot som beskrevet i litteratur23,24.

5. Statistikk

  1. Bruk enveis eller toveis ANOVA for eksperimenter med tre eller flere betingelser etterfulgt av Bonferroni post-hoc-tester for sammenligninger mellom individuelle grupper. Vurder en p-verdi lik eller mindre enn 0,05 signifikant. Bruk programvare (f.eks GraphPad Prism 8.2) for å utføre all statistisk analyse.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Innsnevring av nyrearterien øker reninuttrykket i den stenoserte nyren mens den undertrykker uttrykket i den kontralaterale nyren. De to nyre en klipp (2K1C) eller Goldblatt modell av stenose induserer økt renin uttrykk og nyreskade. Dette er anerkjent som den beste representative modellen for ensidig nyrearteriestenose hos mennesker.

Ekspresjon av renin og prorenin (forløper til renin) ble målt med immunoblotting. Dataene viser at renin og proreninuttrykk økte i den stenoserte nyren sammenlignet med kontralaterale og humbugnyrer, noe som tyder på at mansjetten innsnevret nyrearterien og forårsaket endringer i nyreperfusjon (figur 1). For å visualisere lokaliseringen av reninuttrykk ble IHC utført. IHC bekreftet immunblottingsdata som viste økt ekspresjon av renin i den avskårne nyren (figur 2). Videre ble det sett juxtaglomerulære (JG) celler rekruttering langs afferente arteriole i stenosert nyre (figur 2). For å undersøke effekten på renin mRNA-ekspresjonsnivåer ble ISH utført. ISH-dataene antyder økt rekruttering av renin-mRNA- og JG-celler i den stenoserte nyren sammenlignet med kontralaterale og humbugnyrer (figur 3).

Et annet kjennetegn ved nyrearteriestenose er oppregulering av nyreskademarkører på grunn av endringer i nyreperfusjon, superoksidproduksjon og hypertensjon 2,25,26. Nøytrofil gelatinaseassosiert lipokalin (NGAL) er en godt karakterisert akutt skademarkør og overuttrykkes ved nyreskade27,28. Akutt nyreskademarkør NGAL ble derfor målt med immunoblotting. Immunblottingsdata viste at N-GAL var sterkt oppregulert i den stenoserte nyren sammenliknet med kontralaterale og humbugaktige nyrer (figur 4).

Figure 1
Figur 1: Renin-uttrykk. Etter 15- og 3-dagers nyrearteriestenose ble musene avlivet. Nyrer ble høstet, og reninuttrykk ble bestemt av western blot. (A) viser representative western blot-bilder fra 15-dagers stenosert (venstre panel) og humbugmus (høyre panel). (B) viser densitometrisk analyse av prorenin (venstre panel) og renin (høyre panel) proteinbånd. Betaaktin ble brukt som lastekontroll. (C) viser de representative western blot-bildene fra 3-dagers stenosert (venstre panel) og humbugmus (høyre panel). (D) viser densitometrisk analyse av prorenin (venstre panel) og renin (høyre panel) proteinbånd. Betaaktin ble brukt som lastekontroll. Data er presentert som gjennomsnittlig ± SD. P-verdi beregnet med toveis ANOVA etterfulgt av Tukey post-hoc test. *P<0,05, **P< 0,01, ***P< 0,001, N=3-6. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 2
Figur 2: Immunhistokjemianalyse for visualisering og lokalisering av reninuttrykk etter nyrearteriestenose. Nyrene ble isolert etter avliving av mus fra 3-dagers nyrearteriestenose. Ett stykke fra langsgående kutt av hele nyren ble festet med 4% nøytral bufret formalinløsning, deretter dehydrert i en gradert etanolserie og innebygd i paraffin. Grønn farging representerer reninproteinuttrykk; blå, kjerner. (A) Representative mikroskopibilder av stenosert nyre (venstre side), kontralateral nyre (høyre side) fra stenoserte mus. (B) Representative mikroskopibilder av humbugnyre (venstre side) og kontralateral nyre (høyre side) fra humbugmus. Skala bar 30 mikron. 90X forstørrelse. (C) Representative mikroskopibilder av stenosert nyre (venstre side), kontralateral nyre (høyre side) fra stenoserte mus. (D) Representative mikroskopibilder av humbugnyre (venstre side) og kontralateral nyre (høyre side) fra humbugmus. Disse bildene ble hovedsakelig tatt fra cortex-regionen. Skala bar 50 μm. 15x forstørrelse. Hvite stiplede sirkler angir plasseringen av glomeruli. G: Glomeruli, AfAr: Afferente arteriole, N=4. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 3
Figur 3: In situ hybridiseringsanalyse av renin mRNA-uttrykk etter nyrearteriestenose. Etter 3 dager med nyrearteriestenose ble mus avlivet og nyrene ble isolert og perfusjonsfiksert med 4% nøytral bufret formalinløsning, dehydrert i en gradert etanolserie og innebygd i paraffin. In situ hybridisering ble utført i henhold til produsentens instruksjoner. Mørk rød farging representerer mRNA renin uttrykk; blå, kjerner. (A) . Representativt mikroskopibilde av stenoserte nyrer (venstre side) og kontralateral nyre (høyre side) fra stenoserte mus. (B) . Representativt mikroskopibilde av humbugnyre (venstre side) og kontralateral nyre (høyre side) fra humbugmus. Skala bar 50 μm. Hvite stiplede sirkler betegner glomeruli som uttrykker renin. G: Glomeruli, AfAr: Afferente arteriole, N=4. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Figure 4
Figur 4: Nøytrofil gelatinaseassosiert lipokalin (N-GAL) ekspresjon etter nyrearteriestenose. Etter 3-dagers nyrearteriestenose ble mus avlivet og nyrer høstet, og N-GAL-ekspresjon målt ved Western blot. (A) Representative Western blots bilder fra 3-dagers stenosed (venstre panel) og humbug mus (høyre panel). Betaaktin ble brukt som lastekontroll. (B) Densitometrisk analyse av N-GAL-bånd. Proteintetthetsverdier for N-GAL ble normalisert til β-aktin. Data er presentert som gjennomsnittlig ± SD. P-verdi beregnet med toveis ANOVA etterfulgt av Tukey post-hoc test. **P<0.01, ***P< 0.001, N=3-5. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Nyrearteriestenose er en viktig årsak til sekundær eller resistent hypertensjon, og nyreskade 1,29. De to nyre ett klipp (2K1C) Goldblatt modellen har blitt brukt til å studere RAStenosis indusert renovaskulær hypertensjon 1,17,18,19. En rekke tidligere studier ved bruk av ulike dyremodeller har vist at stenose i nyrearterien er en sterk stimulator for renin overuttrykk og frigjøring, og nyreskade 18,30,31,32,33,34,35. Videre brukes denne modellen til å studere immuncelleinfiltrasjon, fibrose, betennelse og akutte og kroniske nyreskademarkører29.

Her beskrev vi en detaljert og trinnvis prosedyre for å generere reproduserbar, pålitelig og konsistent nyrearteriestenosemodell hos mus. Tidligere har metallklemmer blitt brukt til å initiere nyrearteriestenose36,37,38. Som et alternativ brukte vi polyuretan rund slange (MRE 025; indre diameter (ID) = 0,30 mm; utvendig diameter (OD) = 0,63 mm; veggtykkelse, (WT) = 0,16 mm). Vi brukte rør, siden plassering av en polyuretan mansjett ville resultere innsnevring i to dimensjoner (innsnevring) i stedet for en (flate), som med en metallklips. Bruk av polyuretan rund slange gir også en fordel med jevn innsnevring i nyrearterien. Det kritiske trinnet og utfordringene er å kutte riktig størrelse på polyuretanrør, noe som krever ekstrem oppmerksomhet på detaljer som må utføres ved hjelp av et mikroskop. Et annet kritisk kriterium er å holde mus mellom 18-22 g for å passe slangen på nyrearterien. Mus innenfor dette vektområdet har normalt en ytre diameter på nyrearterien (OD) som konsekvent er innenfor området for slangemansjettdiameteren. En begrensning av metoden er at tunge (over 25 g) eller små (under 16 g) mus er vanskelige å utføre kirurgi på grunn av størrelsen på røret og mansjetten som er laget i den. Men når det er nødvendig, kan endringer i polyuretanslangen gjøres for å imøtekomme yngre eller eldre mus.

Vi har utført 3-dagers og 15-dagers studier for å initiere nyrearteriestenose hos mus med ca. 95% suksessrate. Etter vår erfaring ga induksjon av nyrearteriestenose ved hjelp av denne metoden pålitelige, reproduserbare og konsistente resultater blant musene uavhengig av kjønn. For å bekrefte innsnevring av nyrearterien målte vi reninuttrykk og nyreskade. Våre data tyder på at reninuttrykket økte signifikant i den stenoserte nyren.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Ingen interessekonflikter, økonomiske eller på annen måte, er erklært av forfatterne.

Acknowledgments

Forskningen ble støttet av NHLBI Research Scientist Development Grant (1K01HL135461-01) til JAG. Takk til David Carmona-Berrio og Isabel Adarve-Rengifo for teknisk assistanse.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Diet Gel Clear H2O Diet-Gel 76A Surgery recovery diet
EMC Heated Hard pad Hallowell 000A2788B Heating pads were used to keep mice warm
Ethilon Nylon Suture Ethicon 662G 4-0 (1.5 metric), This suture was used to close the peritoneum, and skin
Ethilon Nylon Suture Ethicon 2815 G 8-0 (0.4 metric), This suture was used to close cuff to tie and constrict the artery
Germinator 500 Braintree Scientific Inc. GER 5287 Sterilize surgical tools between surgeries
Ketoprofen Zoetis Ketofen Painkiller
Polyurethane Braintree Scientific Inc. MRE-025 This tube was used to initiate stenosis
Povidone-iodine antiseptic swabsticks Medline MDS093901 It was applied after hair removal and surgery on the skin
Reflex 7 Clip Applier Roboz Surgical Instrument Co 204-1000 This clip applier was used to apply clip in case one or more sutures went off
Sterile towel drapes Dynarex 4410 It was used as a bedsheet for mice during surgery
Triple antibiotic ointment Medi-First 22312
Water pump Stryker T/pump Professionals Used to warm and circulate water in the heating hard pad to keep mice warm during and post-surgery

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Kashyap, S., et al. Blockade of CCR2 reduces macrophage influx and development of chronic renal damage in murine renovascular hypertension. American Journal of Physiology-Renal Physiology. 310 (5), 372-384 (2016).
  2. Wang, W., et al. Changes in inflammatory biomarkers after renal revascularization in atherosclerotic renal artery stenosis. Nephrology Dialysis Transplantation. 31 (9), 1437-1443 (2016).
  3. Yerram, P., Karuparthi, P. R., Chaudhary, K. Pathogenesis and management of renovascular hypertension and ischemic nephropathy. Minerva Urologica e Nefrologica. 64 (1), 63-72 (2012).
  4. Covic, A., Gusbeth-Tatomir, P. The role of the renin-angiotensin-aldosterone system in renal artery stenosis, renovascular hypertension, and ischemic nephropathy: diagnostic implications. Progress in Cardiovascular Diseases. 52 (3), 204-208 (2009).
  5. Barreras, A., Gurk-Turner, C. Angiotensin II receptor blockers. Proceedings. 16 (1), Baylor University. Medical Center. 123-126 (2003).
  6. Sica, D. A. Angiotensin-converting enzyme inhibitors side effects--physiologic and non-physiologic considerations. Journal of Clinical Hypertension. 6 (7), 410-416 (2004).
  7. Hill, R. D., Vaidya, P. N. Angiotensin II Receptor Blockers (ARB, ARb). StatPearls. , (2019).
  8. Durante, A., et al. Role of the renin-angiotensin-aldosterone system in the pathogenesis of atherosclerosis. Current Pharmaceutical Design. 18 (7), 981-1004 (2012).
  9. Chen, K., et al. Plasma reactive carbonyl species: Potential risk factor for hypertension. Free Radical Research. 45 (5), 568-574 (2011).
  10. Zhang, X., et al. Angiotensin receptor blockade has protective effects on the poststenotic porcine kidney. Kidney International. 84 (4), 767-775 (2013).
  11. Zou, X., et al. Renal scattered tubular-like cells confer protective effects in the stenotic murine kidney mediated by release of extracellular vesicles. Scientific Reports. 8 (1), 1263 (2018).
  12. Kinra, M., Mudgal, J., Arora, D., Nampoothiri, M. An insight into the role of cyclooxygenase and lipooxygenase pathway in renal ischemia. European Review for Medical and Pharmacological Sciences. 21 (21), 5017-5020 (2017).
  13. Cavalcanti, C. O., et al. Inhibition of PDE5 Restores Depressed Baroreflex Sensitivity in Renovascular Hypertensive Rats. Frontiers in Physiology. 7, 15 (2016).
  14. Dias, A. T., et al. Sildenafil ameliorates oxidative stress and DNA damage in the stenotic kidneys in mice with renovascular hypertension. Journal of Translational Medicine. 12, 35 (2014).
  15. Lerman, L. O., Chade, A. R., Sica, V., Napoli, C. Animal models of hypertension: an overview. Journal of Laboratory and Clinical Medicine. 146 (3), 160-173 (2005).
  16. Reckelhoff, J. F., Romero, D. G., Yanes Cardozo, L. L. Sex, Oxidative Stress, and Hypertension: Insights From Animal Models. Physiology (Bethesda). 34 (3), 178-188 (2019).
  17. Goldblatt, H., Lynch, J., Hanzal, R. F., Summerville, W. W. Studies on Experimental Hypertension : I. The Production of Persistent Elevation of Systolic Blood Pressure by Means of Renal Ischemia. Journal of Experimental Medicine. 59 (3), 347-379 (1934).
  18. Gollan, F., Richardson, E., Goldblatt, H. Hypertension in the systemic blood of animals with experimental renal hypertension. Journal of Experimental Medicine. 88 (4), 389-400 (1948).
  19. Lewis, H. A., Goldblatt, H. Studies on Experimental Hypertension: XVIII. Experimental Observations on the Humoral Mechanism of Hypertension. Bulletin of the New York Academy of Medicine. 18 (7), 459-487 (1942).
  20. Warner, G. M., et al. Genetic deficiency of Smad3 protects the kidneys from atrophy and interstitial fibrosis in 2K1C hypertension. American Journal of Physiology-Renal Physiology. 302 (11), 1455-1464 (2012).
  21. Lorenz, J. N., et al. Renovascular hypertension using a modified two-kidney, one-clip approach in mice is not dependent on the alpha1 or alpha2 Na-K-ATPase ouabain-binding site. American Journal of Physiology-Renal Physiology. 301 (3), 615-621 (2011).
  22. Ebina, K., Iwabuchi, T., Suzuki, S. Histological change in permanently clipped or ligated cerebral arterial wall. Part II: Autopsy cases of aneurysmal neck clipping. Acta Neurochirurgica. 66 (1-2), 23-42 (1982).
  23. Saleem, M., et al. Sox6: A new modulator of renin expression during physiological conditions. bioRxiv. , (2019).
  24. Saleem, M., et al. Sox6 as a new modulator of renin expression in the kidney. American Journal of Physiology-Renal Physiology. , (2019).
  25. Chade, A. R., Williams, M. L., Engel, J., Guise, E., Harvey, T. W. A translational model of chronic kidney disease in swine. American Journal of Physiology-Renal Physiology. 315 (2), 364-373 (2018).
  26. Xue, Y., Xu, Z., Chen, H., Gan, W., Chong, T. Low-energy shock wave preconditioning reduces renal ischemic reperfusion injury caused by renal artery occlusion. Acta Cirúrgica Brasileira. 32 (7), 550-558 (2017).
  27. Lalanne, A., Beaudeux, J. L., Bernard, M. A. NGAL: a biomarker of acute and chronic renal dysfunction. Annales de Biologie Clinique. 69 (6), 629-636 (2011).
  28. Bolignano, D., et al. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) as a marker of kidney damage. American Journal of Kidney Diseases. 52 (3), 595-605 (2008).
  29. Kashyap, S., et al. Development of renal atrophy in murine 2 kidney 1 clip hypertension is strain independent. Research in Veterinary Science. 107, 171-177 (2016).
  30. Anderson, W. P., Woods, R. L., Kline, R. L., Korner, P. I. Acute haemodynamic responses to unilateral renal artery stenosis in conscious dogs. Clinical and Experimental Pharmacology and Physiology. 12 (3), 305-309 (1985).
  31. Imanishi, M., et al. Critical degree of renal arterial stenosis that causes hypertension in dogs. Angiology. 43 (10), 833-842 (1992).
  32. Ziecina, R., Abramczyk, P., Lisiecka, A., Papierski, K., Przybylski, J. Adrenal-renal portal circulation contributes to decrease in renal blood flow after renal artery stenosis in rats. Journal of Physiology and Pharmacology. 49 (4), 553-560 (1998).
  33. Johnson, J. A., Ichikawa, S., Kurz, K. D., Fowler, W. L., Payne, C. G. Pressor responses to vasopressin in rabbits with 3-day renal artery stenosis. American Journal of Physiology. 240 (6), 862-867 (1981).
  34. Eirin, A., et al. Changes in glomerular filtration rate after renal revascularization correlate with microvascular hemodynamics and inflammation in Swine renal artery stenosis. Circulation: Cardiovascular Interventions. 5 (5), 720-728 (2012).
  35. Ma, Z., Jin, X., He, L., Wang, Y. CXCL16 regulates renal injury and fibrosis in experimental renal artery stenosis. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory. 311 (3), 815-821 (2016).
  36. Cheng, J., et al. Temporal analysis of signaling pathways activated in a murine model of two-kidney, one-clip hypertension. American Journal of Physiology-Renal Physiology. 297 (4), 1055-1068 (2009).
  37. Wiesel, P., Mazzolai, L., Nussberger, J., Pedrazzini, T. Two-kidney, one clip and one-kidney, one clip hypertension in mice. Hypertension. 29 (4), 1025-1030 (1997).
  38. Johns, C., Gavras, I., Handy, D. E., Salomao, A., Gavras, H. Models of experimental hypertension in mice. Hypertension. 28 (6), 1064-1069 (1996).

Tags

Medisin To nyre en klipp (2K1C) Nyrearterie stenose Renin Angiotensin Aldosterone System renin uttrykk Nyreskade mus modell
En modifisert to nyre en klipp mus modell av renin regulering i nyrearterie stenose
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Saleem, M., Barturen-Larrea, P.,… More

Saleem, M., Barturen-Larrea, P., Saavedra, L., Gomez, J. A. A Modified Two Kidney One Clip Mouse Model of Renin Regulation in Renal Artery Stenosis. J. Vis. Exp. (164), e61058, doi:10.3791/61058 (2020).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter