Summary
Das orthotope Nierentransplantationsmodell der Ratte trägt dazu bei, den Mechanismus der renalen Allotransplantatabstoßung zu untersuchen. Das aktuelle Modell erhöht das Überleben der Empfänger ohne Beeinträchtigung der Blutversorgung und venösen Reflux des Unterkörpers unter Verwendung einer End-to-End-Anastomose der Nierenimplantation und einer End-to-Side-"Tunnel" -Methode der Harnleiter-Blasen-Anastomose.
Abstract
Die Abstoßung des renalen Allotransplantats begrenzt das Langzeitüberleben der Patienten nach einer Nierentransplantation. Die orthotope Nierentransplantation von Ratten ist ein wesentliches Modell zur Untersuchung des Mechanismus der renalen Allotransplantatabstoßung in präklinischen Studien und könnte bei der Entwicklung neuartiger Ansätze zur Verbesserung des Langzeitüberlebens von renalen Allotransplantaten helfen. Die Implantation der Spenderniere bei der orthotopen Nierentransplantation von Ratten wird üblicherweise durch End-to-Side-Anastomose an der Aorta der Empfänger und der unteren Hohlvene durchgeführt. In diesem Modell wurde die Niere des Spenders mittels End-to-End-Anastomose in die Nierenarterie und Nierenvene des Empfängers implantiert. Der Harnleiter des Spenders wurde in einer End-to-Side-Tunnelmethode an der Blase des Empfängers anastomosiert. Dieses Modell trägt zu einer besseren Heilung der Harnleiter-Blasen-Anastomose bei und erhöht das Überleben der Empfänger, indem es Störungen der Blutversorgung und venösen Reflux des Unterkörpers vermeidet. Mit diesem Modell können die Mechanismen der akuten und chronischen Immun- und pathologischen Abstoßung von Nierenallotransplantaten untersucht werden. Hier beschreibt die Studie die detaillierten Protokolle dieser orthotopen Nierentransplantation zwischen Ratten.
Introduction
Die Nierentransplantation hat sich zum effektivsten therapeutischen Ansatz für Patienten mit Nierenfunktionsstörungen im Endstadium entwickelt. T-Zell-vermittelte akute Abstoßung und alloantikörpervermittelte humorale Immunabstoßung führen jedoch zur pathologischen Schädigung von Nierenallotransplantaten und begrenzen das Kurz- und Langzeitüberleben von Patienten nach Nierentransplantation 1,2,3. Leider fehlen immer noch die wirksamen Arzneimittel, die die Abstoßung von Nierenallotransplantaten verhindern, da die genauen Mechanismen der immunen und pathologischen Abstoßung von Nierenallotransplantaten nicht klar sind. Folglich tragen die präklinischen Studien, die die Mechanismen der immunen und pathologischen Abstoßung von Nierenallotransplantaten aufklären, dazu bei, neue Ziele zu finden und relevante wirksame Arzneimittel zu entwickeln, um die Abstoßung von Nierenallotransplantaten zu verhindern und schließlich das Überleben der Patienten zu verlängern.
Viele potenzielle immunologische und pathophysiologische Mechanismen der renalen Allotransplantatabstoßung wurden kürzlich in Rattenmodellstudien zur orthotopen Nierentransplantation 4,5,6,7,8 vorgeschlagen. Diese Ergebnisse schlagen mehrere neuartige Ziele und relevante Störansätze als vielversprechende Therapeutika zur Unterdrückung der renalen Allotransplantatabstoßung vor, wie z.B. komplementäre regulatorische Faktoren und Anti-CD59-Antikörper6, Immunproteasom und Epoxyketon-Inhibitoren 7,8. Daher ist die orthotope Nierentransplantation bei Ratten ein ideales präklinisches Modell, um die Mechanismen der Immunabstoßung und der pathologischen Schädigung von Nierenallotransplantaten nach Nierentransplantationen zu untersuchen.
Die Nierentransplantation von Ratten hat sich allmählich von der heterotopen Implantation der Nieren des Spenders9 zur orthotopen renalen Implantation mit End-to-Side-Anastomose der Gefäße oder mit End-to-End-Anastomose des Harnleiters unter Verwendung einer Manschettenmethode10,11,12 verlagert. Die vorliegende Studie beschreibt detaillierte Protokolle der orthotopen Nierentransplantation zwischen Ratten unter Verwendung der End-to-End-Anastomose der Nierenarterie und der Nierenvene der Empfänger sowie eine End-to-Side-"Tunnel" -Methode der Harnleiter-Blasen-Anastomose, die die Ischämie des Unterkörpers und die Thrombose der unteren Hohlvene vermeidet und den postoperativen Urinverlust und die Verdrehung des Harnleiters reduziert.
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Protocol
Inzucht von 8-10 Wochen alten männlichen F344- und Lewis-Ratten (200 g bis 250 g) wurden kommerziell gewonnen. Die allogene linke Nierentransplantation wurde zwischen männlichen F344- und Lewis-Ratten durchgeführt. F344-Ratten wurden als Spender und syngene Empfänger verwendet, und Lewis-Ratten dienten als allogene Empfänger. Alle Tierhandhabungsverfahren wurden in Übereinstimmung mit den vom NIH veröffentlichten Richtlinien für die Pflege und Verwendung von Labortieren durchgeführt, und alle Tierversuchsprotokolle wurden vom Animal Care and Use Committee des Chongqing University Cancer Hospital genehmigt. Alle Verbrauchsmaterialien, die während der Operation verwendet werden, einschließlich chirurgischer Instrumente und Lösungen, sind steril. Ein Schema des Protokolls ist in Abbildung 1 dargestellt.
1. Ablauf des Spenders
- Induzieren Sie eine Vollnarkose bei der Ratte durch 5% Isofluran-Inhalation unter Verwendung einer Induktionskammer. Dann injizieren Sie subkutan Buprenorphin bei 0,1 mg / kg, um gleichzeitig eine präventive Analgesie durchzuführen.
- Legen Sie die Ratte auf den Rücken und halten Sie die Anästhesie mit 2% Isofluran-Inhalation unter Verwendung einer Gesichtsmaske über Nase und Mund aufrecht. Tragen Sie Augengleitmittel auf die Augen auf, um ein Austrocknen der Hornhaut zu vermeiden. Langsame Atemfrequenz und Rhythmus, das Verschwinden des Hornhautreflexes und die mangelnde Reaktion auf die Zehenklemme weisen auf die Wirksamkeit der Anästhesie hin.
- Rasieren Sie die Bauchhaare mit einem elektrischen Rasierer und sterilisieren Sie die Haut mit 0,5% Jod und 70% Alkohol.
- Subkutan injizieren Sie 0,5% Lidocain entlang der Mittellinie von der Symphyse pubis zu subxiphoid für lokale Analgetika, schneiden Sie dann den Bauch ein und ziehen Sie den Schnitt mit einem Retraktor auf.
- Nehmen Sie den Darm von der rechten Seite des Einschnitts und wickeln Sie ihn mit angefeuchteter Gaze ein, um zu verhindern, dass er austrocknet. Legen Sie dann die linke Niere frei.
- Trennen Sie Fettgewebe von der linken Niere und dem Harnleiter mit Wattestäbchen und dissoziieren Sie dann die linke Nierenarterie und Vena mit der Mikrozange unter einem Operationsmikroskop mit 20-facher Vergrößerung. Koagulieren Sie bei Bedarf Blutungen durch Elektrokoagulation.
- Führen Sie eine Ligatur der Aorta etwa 5 mm über der linken Nierenarterie mit einer 4-0 Polyamid-Monofilamentnaht durch. Transezieren Sie dann die linke Nierenvene distal zur Konjunktion der linken Genitalvene und der Nebennierenvene.
- Spülen Sie die Niere mit eiskalter UW-Lösung, ergänzt mit Heparin (100 U / ml), mit einer 24 G Kopfhautnadel von der Aorta unterhalb der linken Nierenarterie, bis das Blut in der Farbe verblasst. Die warme Ischämiezeit beträgt durchschnittlich 5 Minuten.
- Nach der Transekt der linken Nierenarterie ca. 2 mm neben der Aorta dissoziieren Sie die Niere und den Harnleiter mit Hilfe einer Mikrozange (bewahren Sie das periphere Bindegewebe, um die Blutversorgung des Harnleiters sicherzustellen). Transektieren Sie dann den Harnleiter neben der Blase und bewahren Sie die linke Spenderniere in eiskalter UW-Lösung.
- Opfere die Spenderratte mit Blutverlust, indem du die Aorta durchquerst und anschließend in eine CO2-Box legst, um den Tod sicherzustellen.
2. Empfängerverfahren
- Wiederholen Sie das in den Schritten 1.1-1.5 beschriebene Verfahren für die Empfängerratte.
- Dissoziieren Sie die linke Niere und den Harnleiter sowie die linke Nierenarterie und Nierenvene der Empfängerratte mit Wattestäbchen und Mikropinzetten unter einem Operationsmikroskop mit 20-facher Vergrößerung.
- Schneiden Sie die linke Nierenarterie und die Nierenvene an der Wurzel mit nichtinvasiven mikrovaskulären Klemmen ab. Ligatieren Sie den linken Harnleiter ca. 2-3 cm unterhalb der Niere mit einem 8-0 Polyamid monofil nähen und transektieren es bei der Ligatur.
- Resektieren Sie die native linke Niere des Empfängers, indem Sie die linke Nierenarterie 2 mm von der Mikrovaskulärklemme entfernt transzieren und die Nierenvene proximal zur Verbindung der linken Genitalvene und der Nebennierenvene transzieren. Koagulieren Sie die Nebennierenvene bei Bedarf mittels Elektrokoagulation.
- Implantieren Sie die Spenderniere in die linke Nierengrube der Empfängerratte und legen Sie Eis um die implantierte Spenderniere. Anastomose der Nierenarterie und Nierenvene des Spenders zur Nierenarterie und Nierenvene des Empfängers in einem End-to-End-Muster unter Verwendung von 10-0 Polyamid-Monofilamentnähten unter einem Operationsmikroskop mit 45-facher Vergrößerung, wie folgt.
- Anastomose der Nierenarterie mit unterbrochenen Nähten.
- Platzieren Sie die Aufenthaltsnähte an der 12- bzw. 6-Uhr-Position der Anastomose. Nähen Sie eine Seite der Anastomose zwischen den beiden Bleibähten mit 2-3 Stichen mit einer 10-0 Polyamid-Monofilament-Naht.
- Drehen Sie die Bleibähte um und nähen Sie die andere Seite der Anastomose zwischen den beiden Bleibähten mit 2-3 Stichen.
- Anastomose die Nierenvene mit kontinuierlichen Nähten.
- Platzieren Sie die Aufenthaltsnähte in den Positionen 6 bzw. 12 Uhr der Anastomose. Nähen Sie eine Seite der Anastomose aus der 12-Uhr-Position mit 4-5 Stichen unter Verwendung der laufenden Nähte und binden Sie dann die laufende Naht mit einer 10-0-Polyamid-Monofilamentnaht an der Stehnaht in der 6-Uhr-Position.
- Drehen Sie die Strebenähte um und nähen Sie die andere Seite der Anastomose aus der 6-Uhr-Position und binden Sie schließlich die laufende Naht an der Strebenaht in der 12-Uhr-Position.
- Perfusionieren Sie die Spenderniere erneut, indem Sie zuerst die nichtinvasive mikrovaskuläre Klemme der Nierenvene freigeben; Identifizieren Sie dann die Blutungsstellen und machen Sie zusätzliche Stiche.
- Lösen Sie die nichtinvasive mikrovaskuläre Klemme der Nierenarterie, identifizieren Sie die Blutungsstellen und machen Sie zusätzliche Stiche. Die Zeit für kalte Ischämie beträgt durchschnittlich 45 Minuten.
- Nähen Sie das Ende des Spenderharnleiters mit einer 4-0 Polyamid-Monofilamentnaht als Schlepptau, um das Ende durch den "Tunnel" der Empfängerblase unter einem Operationsmikroskop mit 20-facher Vergrößerung zu ziehen. Danach transektieren Sie das Ende des Spenderharnleiters mit der Naht außerhalb der Blase des Empfängers. Lassen Sie den Spenderharnleiter wieder in die Blase des Empfängers schrumpfen.
- Befestigen Sie den Spenderharnleiter mit der Blase des Empfängers, indem Sie die Adventitia des Spenderharnleiters mit der Muskelschicht der Blase des Empfängers außen an vier gleich weit entfernten Positionen mit einem 8-0 nähen Polyamid-Monofilament-Naht unter einem Operationsmikroskop mit 45-facher Vergrößerung.
- Legen Sie den Darm zurück in die Bauchhöhle und schließen Sie den Bauchschnitt zuerst mit kontinuierlichen Nähten in der Muskelschicht und dann die Hautschicht mit einer 4-0 Polyamid-Monofilamentnaht.
- Legen Sie die Empfängerratte auf ein 37 ° C-Heizkissen in einen trockenen und sauberen Käfig. Warten Sie, bis sich die Ratte von der Anästhesie erholt hat.
- Subkutan wird Buprenorphin (0,05 mg/kg) zur postoperativen Analgesie alle 6 h für 48 h in die Empfängerratte injiziert. Injizieren Sie Penicillin (50.000 U / kg) intramuskulär in die Empfängerratte einmal täglich für 3 Tage zur Vorbeugung einer Infektion. Die Empfängerratte wird geopfert, indem sie in eine CO2 -Box gelegt wird, um die chronische Abstoßung des renalen Allotransplantats nach 10 Wochen Transplantation zu beobachten.
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Representative Results
In diesem orthotopen Nierentransplantationsmodell der Ratte bewegen sich die Empfängerratten nach der Operation normal. Um die chronische Abstoßung des renalen Allotransplantats zu beobachten, werden Empfängerratten für 10 Wochen nach der Transplantation aufgezogen, und die Gesamtüberlebensrate der Empfängerratten beträgt zu diesem Zeitpunkt etwa 90%. Die Haupttodesursachen sind Blutungen und Austreten von Urin nach der Operation. Zu den anderen Hauptkomplikationen gehören Blutungen während der Operation, Thrombosen in den Nierengefäßen und Hydronephrose, deren jeweilige Inzidenz etwa 15%, 25% und 20% beträgt. Die meisten Blutungen während der Operation können gestoppt werden und beeinflussen das Überleben der Empfängerratten nicht. Nierentransplantate mit Embolisation der Gefäße und Hydronephrose sollten von den nachfolgenden Studien ausgeschlossen werden.
In diesem Modell sind F344-Ratten vom Ratten-MHC (RT1) Haplotyp RT1lv1 und Lewis-Ratten vom Haplotyp RT1l. Diese beiden Stämme unterscheiden sich im MHC-Klasse-Ib-Locus C/E/M13, der keine akute T-Zell-vermittelte Abstoßung verursacht, sondern zu einer anschließenden chronischen Antikörper-vermittelten Abstoßungführt 4,5. Die chronische Allotransplantatnephropathie ist gekennzeichnet durch glomeruläre Sklerose, interstitielle Fibrose, tubuläre Atrophie und interstitielle Arteriosklerose14. Nach 10 Wochen nach der Transplantation zeigen Hämatoxylin und Eosin (HE) -Färbung und periodische Säure-Schiff (PAS) -Färbung Glomeruläre Sklerose, interstitielle Fibrose und tubuläre Atrophie (Abbildung 2A und 2B) sowie interstitielle Arteriosklerose (Abbildung 2C) im renalen Allotransplantat im Gegensatz zur Isotransplantatniere. Als weiteres Merkmal der chronischen Glomerulopathie im renalen Allotransplantat zeigt die Silberfärbung die Verdickung der glomerulären Basalmembran in der Allotransplantatniere im Vergleich zur Isotransplantatniere (Abbildung 2D), was auf den Erfolg des vorliegenden orthotopen Nierentransplantationsmodells der Ratte hinweist.
Abbildung 1: Schematische Darstellung des orthotopen Nierentransplantationsmodells der Ratte . (A) Resektion der Niere des Spenders. Ligatieren Sie die Aorta oberhalb der linken Nierenarterie und transsektieren Sie die linke Nierenvene distal zur Verbindung von Genitalvene und Nebennierenvene. Nach der Perfusion mit eiskalter UW-Lösung wird die linke Niere des Spenders dann reseziert, indem die linke Nierenarterie etwa 2 mm neben der Aorta transjiziert und der Harnleiter neben der Blase transjiziert wird. (B) Resektion der Niere des Empfängers. Nach der Klemmung der linken Nierenarterie und der Nierenvene an der Wurzel wird der Harnleiter nach der Ligatur transektiert. Die linke Niere des Empfängers wird dann reseziert, indem die linke Nierenarterie 2 mm von der Mikrovaskulärklemme transkreiert und die Nierenvene proximal zur Konjunktion der linken Genitalvene und der Nebennierenvene transjiziert wird. (C) Implantation der Niere des Spenders. Die Nierenarterie und die Nierenvene des Spenders werden durch unterbrochene Naht und kontinuierliche Naht in einem End-to-End-Muster an die Nierenarterie bzw. die Nierenvene des Empfängers anastomosiert. Der Spenderharnleiter wird dann mit einer End-to-Side-"Tunnel" -Methode an die Blase des Empfängers anastomosiert. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung zu sehen.
Abbildung 2: Pathologische Färbung von Nierentransplantaten. Chronische Transplantatnephropathie, gekennzeichnet durch glomeruläre Sklerose, interstitielle Fibrose, tubuläre Atrophie und interstitielle Arteriosklerose, wie bei renalen Allotransplantaten nach 10 Wochen Nierentransplantation von F344-Spendern an Lewis-Rattenempfänger gezeigt. (A,B) Glomeruläre Sklerose, interstitielle Fibrose und tubuläre Atrophie sowie (C) interstitielle Arteriosklerose im renalen Allotransplantat werden durch Hämatoxylin- und Eosinfärbung und periodische Säure-Schiff-Färbung gezeigt. Maßstab: 50 μm. (D) Die Verdickung der glomerulären Basalmembranen (GBM) im renalen Allotransplantat im Vergleich zum renalen Isotransplantat wird durch Silberfärbung gezeigt. Die gestrichelten Quadrate umreißen das Bild mit höherer Vergrößerung von GBM. Maßstabsbalken: 50 μm. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Abbildung zu sehen.
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Discussion
Die Nierentransplantation bei der Ratte ist eine anspruchsvolle Arbeit, die ein hohes Maß an mikrochirurgischen Techniken erfordert, und die Operationstechniken wurden mehrmals optimiert. Von Anfang an implantierten Gonzalez et al. die Spenderniere in den Hals des Empfängers und anastomosierten den Spenderharnleiter auf die Haut9. Aufgrund der hohen Inzidenz von Harnwegsinfektionen und Stenosen des Spenderharnleiters wurde die Operation jedoch in kurzer Zeit abgebrochen. Anschließend wurde die Implantatoperation der rechten Niere des Spenders durch Anastomose der Nierenarterie des Spenders und der Nierenvene zur Empfängeraorta und zur Vena cava15 inferior oder durch Anastomose der Nierenarterie des Spenders und der Nierenvene bis zur Nierenarterie des Empfängers und der Vena cava11 inferior verbessert. Dennoch sind die rechte Nierenarterie und die Nierenvene dünn und kurz, was die Schwierigkeiten und die Ausfallrate der Operation erhöht. Darüber hinaus erforderte diese Operation eine Blockierung der Aorta und der unteren Hohlvene des Empfängers. Daher führten eine Ischämie des Unterkörpers und die Thrombose der unteren Hohlvene zu einer hohen Inzidenz von Behinderung und Tod von Empfängerratten. Die anderen verbesserten Implantatoperationen umfassen die Anastomose der Spenderaorta und der Nierenvene an der Nierenarterie und der Nierenvene des Empfängers unter Verwendung einer Manschettenmethode16. Wieder andere anastomosieren den Harnleiter mit der Manschettenmethode12. Die Dünne der Nierenarterie und des Harnleiters erhöht jedoch die Schwierigkeit, die Manschette und die Anastomose herzustellen, wodurch die Anwendung dieser Implantatoperationen eingeschränkt wird.
Derzeit wird das häufig verwendete orthotope Nierentransplantationsmodell der Ratte in der linken Niere durch Anastomose der linken Nierenarterie des Spenders und der Nierenvene zur Empfängeraorta und zur Vena cava inferior sowie durch Anastomose des Spenderblasenpflasters zur Empfängerblase10 durchgeführt. Die linke Nierenarterie und die Nierenvene sind lang genug, um die Anastomose zu erleichtern. Dennoch kann die Anastomose der Empfängeraorta und der unteren Hohlvene die Ischämie des Unterkörpers und die Thrombose der unteren Hohlvene noch nicht vermeiden, so dass ein hohes Maß an mikrochirurgischer Erfahrung erforderlich ist, um die Operationszeit zu verkürzen. Das aktuelle orthotope Nierentransplantationsmodell der Ratte wird von Reuter S. et al.17 über eine End-to-End-Anastomose der linken Spendernierenarterie und der Nierenvene zur Nierenarterie und Nierenvene des Empfängers und zur Anastomose des Spenderharnleiters zur Blase des Empfängers unter Verwendung einer "Tunnel" -Methode modifiziert. In diesem Modell besteht keine Notwendigkeit, die Empfängeraorta und die untere Hohlvene zu beschneiden, so dass die physiologische systemische Zirkulation der Empfängerratte nicht unterbrochen wird und die Überlebensrate verbessert wird, ohne zu lähmen (über 90%). Darüber hinaus ist die "Tunnel" -Methode der Anastomose des Spenderharnleiters an der Blase des Empfängers einfach zu bedienen und reduziert das Auftreten von Urinleckagen nach der Operation durch Nähen des Spenderblasenpflasters.
Einige Details in diesem Modell müssen jedoch noch beachtet werden. Zuerst sollte der Darm draußen feucht gehalten werden, indem er mit angefeuchteter Gaze bedeckt wird. Andernfalls würde der Empfänger nach der Operation an einer Darmnekrose sterben. Zweitens sollte das Bindegewebe des Spenderharnleiters nicht vollständig entfernt werden, um die Blutversorgung sicherzustellen. Drittens sollten ähnliche Gewichte von Spender- und Empfängerratten gewährt werden, um sicherzustellen, dass die Spender- und Empfängerschiffe vom gleichen Kaliber sind. Ein signifikant unterschiedliches Kaliber von Spender- und Empfängergefäßen würde die Blutung oder Thrombose nach der Anastomose verstärken. Viertens sollte eine geeignete Länge der anastomosierten Gefäße beibehalten werden, insbesondere für die Venen, indem die Spendern-Nierenvene distal aus der Konjunktion von Genitalvene und Nebennierenvene transkrektiert und die Nierenvene des Empfängers proximal zur Konjunktion von Genitalvene und Nebennierenvene transkrektiert wird. Anastomisierte Gefäße, die überlang oder zu kurz sind, können zu Verdrehungen der Gefäße, schlechtem Blutfluss und Blutaustritt führen. Fünftens sollte der Anastomoseprozess aufgrund dünner Wände der Nierenarterie und der Nierenvene unter einem hohen Vergrößerungsfeld, wie z. B. x45-fach, durchgeführt werden. Ein schlecht aufgelöstes Feld würde falsche Nähte von Gefäßwänden verursachen. Sechstens, um die Thrombose nach der Operation zu reduzieren, muss Heparinlösung (100 U / ml) während des Anastomoseprozesses auf die anastomosierten Gefäße fallen gelassen werden. Siebtens sollte die gesamte Schicht des Spenderharnleiters nicht genäht werden, wenn er an der Blase des Empfängers befestigt wird, da die Stenose des Harnleiters und die Hydronephrose zunehmen würden.
Die Einschränkungen dieses Modells sind eine hohe Anforderung an mikrochirurgische Fähigkeiten und eine gewisse Wahrscheinlichkeit von Komplikationen, einschließlich Blutungen, Urinaustritt, Thrombose und Hydronephrose. Die wichtigsten postoperativen Komplikationen ähneln sich bei verschiedenen orthotopen Nierentransplantationstechniken bei Ratten, zu denen Blutungen, Urinaustritt, Thrombose und Hydronephrose infolge einer Harnleiteranastomosestenose gehören. Im Gegensatz zur Anastomose der Nierenarterie des Spenders und der Nierenvene zur Nierenarterie des Empfängers und der Vena cava11 inferior erhöht die derzeitige Technik jedoch aufgrund der Dünnheit der Anastomose leicht die Thrombose in den Nierengefäßen, vermeidet jedoch die Störung der Durchblutung der unteren Gliedmaßen. Im Gegensatz zur Anastomose der Nierenarterie und der Nierenvene mit einer Manschettenmethode16 verringert die derzeitige Technik die Verdrehung der Gefäße. Im Vergleich zur End-to-End-Anastomose des Harnleiters mit der Manschettenmethode12 erhöht die derzeitige Technik die Stenose der Harnleiteranastomose leicht, verringert jedoch die Schwierigkeit der Operation. Die Verbesserung der mikrochirurgischen Techniken durch kontinuierliche Praxis kann die Komplikationen reduzieren, die Überlebensrate von Empfängerratten erhöhen und die Nutzungsrate der Modelle in den nachfolgenden Experimenten erhöhen. Das aktuelle Modell bietet einen Verweis auf Wissenschaftler, die die Nierentransplantation untersuchen.
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Disclosures
Die Autoren haben keine Interessenkonflikte offenzulegen.
Acknowledgments
Diese Arbeit wurde von der National Natural Science Foundation of China (81870304) an Jun Li und von der Else Kröner-Fresenius-Stiftung (Nr. 2017_A28) an Marcus Groettrup unterstützt.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 10-0 Polyamide Monofilament suture | B.Braun Medical Inc. | G0090781 | |
| 4-0 Polyamide Monofilament suture | B.Braun Medical Inc. | C1048451 | |
| 8-0 Polyamide Monofilament suture | B.Braun Medical Inc. | C2090880 | |
| Buprenorphine | US Biological life Sciences | 352004 | |
| Electrocoagulator | Electrocoagulator | ZJ1099 | |
| F344 and Lewis rats | Center of Experimental Animals (Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, China) | NA | |
| Gauze | Henan piaoan group Co., LTD | 10210402 | |
| Heating pad | Guangzhou Dewei Biological Technology Co., LTD | DK0032 | |
| Heparin | North China Pharmaceutical Co., LTD | 2101131-2 | |
| Injection syringe (1 ml and 10 ml) | Shandong weigao group medical polymer Co., LTD | 20211001 | |
| Isoflurane | RWD Life Science Co., LTD | 21070201 | |
| Penicillin G Sodium | Wuhan HongDe Yuexin pharmatech co.,Ltd | 69-57-8 | |
| Scalp needle (24 G) | Hongyu Medical Group | 20183150210 | |
| Shaver | Beyotime | FS600 | |
| Small animal anesthesia machine | RWD Life Science | R500 | |
| Small Animal Surgery Kit | Beyotime | FS500 | |
| Sodium chloride injection | Southwest pharmaceutical Co., LTD | H50021610 | |
| Surgical operation microscope | Tiannuoxiang Scientific Instrument Co. , Ltd, Beijing, China | SZX-6745 | |
| Swab | Yubei Medical Materials Co., LTD | 21080274 | |
| Tape | Minnesota Mining Manufacturing Medical Equipment (Shanghai) Co., LTD | 1911N68 | |
| UW solution | Bristol-Myers Squibb Company | 17HB0002 |
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