Summary
Rotteortotopisk nyretransplantationsmodel bidrager til at undersøge mekanismen for nyreallograftafstødning. Den nuværende model øger modtagernes overlevelse uden indblanding i blodforsyningen og venøs tilbagesvaling af underkroppen ved hjælp af en ende-til-ende anastomose af nyreimplantation og en ende-til-side "tunnel" metode til ureter-blære anastomose.
Abstract
Renal allograftafstødning begrænser patienternes langsigtede overlevelse efter nyretransplantation. Rotteortotopisk nyretransplantation er en væsentlig model til at undersøge mekanismen for nyreallograftafstødning i prækliniske undersøgelser og kan hjælpe med udviklingen af nye tilgange til forbedring af nyreallografternes langsigtede overlevelse. Donornyreimplantation i rotte ortotopisk nyretransplantation udføres almindeligvis ved end-to-side anastomose til modtagernes aorta og ringere vena cava. I denne model blev donorens nyre implanteret ved hjælp af end-to-end anastomose til modtagernes nyrearterie og nyrevene. Donorens urinleder blev anastomoseret til modtagerens blære i en ende-til-side 'tunnel' metode. Denne model bidrager til bedre heling af ureter-blære anastomose og øger modtagernes overlevelse ved at undgå interferens med blodforsyningen og venøs tilbagesvaling af underkroppen. Denne model kan bruges til at undersøge mekanismerne for akut og kronisk immun og patologisk afvisning af nyreallografter. Her beskriver undersøgelsen de detaljerede protokoller for denne ortotopiske nyretransplantation mellem rotter.
Introduction
Nyretransplantation er blevet den mest effektive terapeutiske tilgang til patienter med nyrefunktionssvigt i slutstadiet. Imidlertid resulterer T-cellemedieret akut afstødning og alloantistofmedieret humoral immunafstødning i patologisk skade på nyreallografter og begrænser patienternes kortsigtede og langsigtede overlevelse efter nyretransplantation 1,2,3. Desværre mangler de effektive lægemidler, der forhindrer afvisning af nyreallografter, stadig, fordi de nøjagtige mekanismer for immun og patologisk afvisning af nyreallografter ikke er klare. Derfor bidrager de prækliniske undersøgelser, der belyser mekanismerne for immun og patologisk afvisning af nyreallografter, til at finde nye mål og udvikle relevante effektive lægemidler for at forhindre afvisning af nyreallografter og i sidste ende forlænge patienternes overlevelse.
Mange potentielle immunologiske og patofysiologiske mekanismer for nyreallograftafstødning er for nylig blevet foreslået i rottemodelstudier af ortotopisk nyretransplantation 4,5,6,7,8. Disse resultater foreslår flere nye mål og relevante interfererende tilgange som lovende terapeutiske midler til at undertrykke renal allograftafstødning, såsom komplementære regulatoriske faktorer og anti-CD59 antistoffer6, immunoproteasom og epoxyketonhæmmere 7,8. Således er rotte ortotopisk nyretransplantation en ideel præklinisk model til at undersøge mekanismerne for immunafstødning og patologisk skade på nyreallografter efter nyretransplantation.
Rottenyretransplantation er gradvist skiftet fra heterotopisk implantation af donorens nyrer9 til ortotopisk nyreimplantation ved hjælp af ende-til-side anastomose af kar eller ved anvendelse af end-to-end anastomose af urinlederen ved hjælp af en manchetmetode 10,11,12. Den foreliggende undersøgelse beskriver detaljerede protokoller for den ortotopiske nyretransplantation mellem rotter ved hjælp af end-to-end anastomose til modtagernes nyrearterie og nyrevene og en ende-til-side "tunnel" -metode til ureter-blæreanastomose, som undgår iskæmi i underkroppen og trombosen af ringere vena cava og reducerer postoperativ urinlækage og ureterens vridning.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Indavlede 8-10 uger gamle mandlige F344 og Lewis rotter (200 g til 250 g) blev kommercielt opnået. Allogen venstre nyretransplantation blev udført mellem mandlige F344 og Lewis rotter. F344-rotter blev brugt som donorer og syngeneiske modtagere, og Lewis-rotter fungerede som allogene modtagere. Alle dyrehåndteringsprocedurer blev udført i overensstemmelse med retningslinjer for pleje og brug af forsøgsdyr udgivet af NIH, og alle dyreforsøgsprotokoller blev godkendt af Animal Care and Use Committee of Chongqing University Cancer Hospital. Alle forsyninger, der anvendes under operationen, herunder kirurgiske instrumenter og opløsninger, er sterile. Et skema over protokollen er vist i figur 1.
1. Donorprocedure
- Inducer generel anæstesi hos rotten ved 5% isofluranindånding ved hjælp af et induktionskammer. Derefter injiceres buprenorphin subkutant ved 0,1 mg/kg for at udføre samtidig forebyggende analgesi.
- Placer rotten på ryggen og oprethold anæstesi med 2% isofluranindånding ved hjælp af en ansigtsmaske over næse og mund. Påfør øjensmøremiddel på øjnene for at undgå tørring af hornhinden. Langsom respirationsfrekvens og rytme, forsvinden af hornhinderefleks og manglende reaktion på tåklemme indikerer effektiviteten af anæstesi.
- Barber mavehåret med en elektrisk barbermaskine og steriliser huden ved hjælp af 0,5% jod og 70% alkohol.
- Subkutant injicere 0,5% lidokain langs midterlinjen fra symfyse pubis til subxiphoid for lokale analgetika, og skær derefter maven og træk snittet op ved hjælp af en retraktor.
- Tag tarmene ud fra højre side af snittet og pakk dem ind med fugtet gasbind for at forhindre dem i at tørre ud. Udsæt derefter den venstre nyre.
- Segreger fedtvæv fra venstre nyre og urinleder ved hjælp af vatpinde, og dissociere derefter venstre nyrearterie og vene ved hjælp af mikropincet under et operationsmikroskop med 20x forstørrelse. Koagulere enhver blødning ved hjælp af elektrokoagulering, hvis det er nødvendigt.
- Udfør ligering af aorta ca. 5 mm over venstre nyrearterie med en 4-0 polyamid monofilament sutur. Derefter transekteres venstre nyrevene distal til sammenhængen mellem venstre kønsvene og binyrevenen.
- Skyl nyrerne med iskold UW-opløsning suppleret med heparin (100 U / ml) ved hjælp af en 24 G hovedbundsnål fra aorta under venstre nyrearterie, indtil blodet falmer i farve. Varm iskæmi tid er 5 min i gennemsnit.
- Efter transektering af venstre nyrearterie ca. 2 mm ved siden af aorta, dissocieres nyren og urinlederen ved hjælp af mikro-tang (bevar det perifere bindevæv for at sikre blodtilførslen til urinlederen). Derefter transekteres urinlederen ved siden af blæren og bevare donorens venstre nyre i iskold UW-opløsning.
- Ofre donorrotten med tab af blod ved at transektere aorta og efterfølgende placere den i en CO2 - boks for at sikre døden.
2. Proceduren for modtager
- Gentag proceduren beskrevet i trin 1.1-1.5 for modtagerrotten.
- Dissociere venstre nyre og urinleder samt venstre nyrearterie og nyrevene hos modtagerrotten ved hjælp af vatpinde og mikropincet under et operationsmikroskop med 20x forstørrelse.
- Klip venstre nyrearterie og nyrevene ved roden ved hjælp af ikke-invasive mikrovaskulære klemmer. Ligate venstre urinleder ca. 2-3 cm under nyren med en 8-0 polyamidmonofilament sutur og transekt det ved ligering.
- Resekter modtagerens oprindelige venstre nyre ved at transektere venstre nyrearterie 2 mm væk fra den mikrovaskulære klemme og transektere nyrevenen proksimal til sammenhængen mellem venstre kønsvene og binyrevene. Koaguler binyrevenen ved hjælp af elektrokoagulering, hvis det er nødvendigt.
- Implanter donornyren i modtagerrottens venstre nyrefossa og læg is omkring den implanterede donornyre. Anastomose donorens nyrearterie og nyrevene til modtagerens nyrearterie og nyrevene i et ende-til-ende-mønster ved hjælp af 10-0 polyamidmonofilamentsuturer under et operationsmikroskop med 45x forstørrelse som følger.
- Anastomose nyrearterien med afbrudte suturer.
- Placer opholdsuturerne henholdsvis kl. 12 og 6 af anastomose. Lige langt suturere den ene side af anastomosen mellem de to opholdsuturer med 2-3 sting ved hjælp af en 10-0 Polyamid Monofilament sutur.
- Vend opholdsuturerne og suturer på samme måde den anden side af anastomosen mellem de to opholdsuturer med 2-3 sting.
- Anastomose nyrevenen med kontinuerlige suturer.
- Placer opholdsuturerne henholdsvis kl. 6 og 12 af anastomose. Sutur den ene side af anastomosen fra klokken 12 med 4-5 sting ved hjælp af de løbende suturer, og bind derefter den løbende sutur til opholdsuturen ved 6-tiden med en 10-0 polyamid monofilament sutur.
- Vend opholdsuturerne og suturer på samme måde den anden side af anastomosen fra klokken 6, og bind til sidst den løbende sutur til opholdsuturen ved stillingen klokken 12.
- Genperfuser donornyren ved først at frigive den ikke-invasive mikrovaskulære klemme i nyrevenen; Identificer derefter blødningsstederne og lav yderligere sting.
- Slip den ikke-invasive mikrovaskulære klemme i nyrearterien, identificer blødningsstederne og lav yderligere sting. Kold iskæmi tid er 45 min i gennemsnit.
- Sy enden af donorurelederen med en 4-0 polyamidmonofilamentsutur som et slæb for at trække enden gennem "tunnelen" i modtagerens blære under et driftsmikroskop med 20x forstørrelse. Derefter transekteres enden af donorurelederen med suturen uden for modtagerens blære. Lad donorureturet krympe tilbage i modtagerens blære.
- Fastgør donorurelederen med modtagerens blære ved at sy adventitia af donorurelederen med muskellaget i modtagerens blære udenfor i fire lige store positioner ved hjælp af en 8-0 polyamidmonofilamentsutur under et driftsmikroskop med 45x forstørrelse.
- Placer tarmene tilbage i bughulen og luk mavesnittet med kontinuerlige suturer i muskellaget først og derefter hudlaget med en 4-0 polyamidmonofilament sutur.
- Anbring modtagerrotten på en 37 °C varmepude i et tørt og rent bur. Vent, indtil rotten kommer sig efter anæstesi.
- Subkutant injiceres buprenorphin (0,05 mg/kg) i modtagerrotten hver 6. time i 48 timer for postoperativ analgesi. Intramuskulært injicere penicillin (50.000 U/kg) i modtagerrotten en gang dagligt i 3 dage for at forebygge infektion. Modtagerrotten ofres ved at placere den i en CO2 - kasse for at observere den kroniske afvisning af nyreallograft efter 10 ugers transplantation.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
I denne rotteortotopiske nyretransplantationsmodel bevæger modtagerrotterne sig normalt efter operationen. For at observere den kroniske afvisning af nyreallograft hæves modtagerrotter i 10 uger efter transplantationen, og den samlede overlevelsesrate for modtagerrotter på dette tidspunkt er ca. 90%. De vigtigste dødsårsager er blødning og lækage af urin efter operationen. De andre store komplikationer omfatter blødning under operationen, trombose i nyrekar og hydronephrosis, hvis respektive forekomst er ca. 15%, 25% og 20%. Det meste af blødningen under operationen kan stoppes og påvirker ikke modtagerrotters overlevelse. Nyretransplantater med embolisering af kar og hydronephrose bør udelukkes fra de efterfølgende undersøgelser.
I denne model er F344-rotter af rotten MHC (RT1) haplotype RT1lv1 og Lewis-rotter er af haplotypen RT1l. Disse to stammer adskiller sig i MHC-klasse Ib locus C/E/M13, som ikke forårsager akut T-cellemedieret afstødning, men fører til en efterfølgende kronisk antistofmedieret afstødning 4,5. Kronisk allograft nefropati er karakteriseret ved glomerulær sklerose, interstitiel fibrose, rørformet atrofi og interstitiel arteriosklerose14. 10 uger efter transplantationen afslører hæmatoxylin og eosin (HE) farvning og periodisk syre-Schiff (PAS) farvning glomerulær sklerose, interstitiel fibrose og rørformet atrofi (figur 2A og 2B) og interstitiel arteriosklerose (figur 2C) i nyreallograft i modsætning til isograftnyren. Som et andet kendetegn ved kronisk glomerulopati i nyreallograften viser sølvfarvning fortykkelsen af den glomerulære kældermembran i allograftnyre sammenlignet med isograftnyre (figur 2D), hvilket indikerer succesen med den nuværende rotteortotopiske nyretransplantationsmodel.
Figur 1: Skematisk oversigt over rotteortotopisk nyretransplantationsmodel. (A) Resektion af donorens nyre. Ligate aorta over venstre nyrearterie og transektere venstre nyrevene distal til sammenhængen mellem kønsvenen og binyrevenen. Efter perfusion med iskold UW-opløsning resekteres donorens venstre nyre derefter ved at transektere venstre nyrearterie ca. 2 mm ved siden af aorta og transektere urinlederen ved siden af blæren. (B) Resektion af modtagerens nyre. Efter fastspænding af venstre nyrearterie og nyrevene ved roden transekteres urinlederen efter ligering. Modtagerens venstre nyre resekteres derefter ved at transektere venstre nyrearterie 2 mm fra den mikrovaskulære klemme og transektere nyrevenen proksimal til sammenhængen mellem venstre kønsvene og binyrevenen. C) Implantation af donorens nyre. Donorens nyrearterie og nyrevene anastomoseres til modtagerens henholdsvis nyrearterie og nyrevene ved afbrudt sutur og kontinuerlig sutur i et ende-til-ende-mønster. Donoruretlederen anastomoseres derefter til modtagerens blære ved hjælp af en ende-til-side "tunnel" -metode. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 2: Patologisk farvning af nyretransplantater. Kronisk graft nefropati karakteriseret ved glomerulær sklerose, interstitiel fibrose, rørformet atrofi og interstitiel arteriosklerose som vist i nyreallografter efter 10 ugers nyretransplantation fra F344-donorer til Lewis-rottemodtagere. (A,B) Glomerulær sklerose, interstitiel fibrose og rørformet atrofi samt (C) interstitiel arteriosklerose i nyreallograft er vist ved hæmatoxylin og eosinfarvning og periodisk syre-Schiff-farvning. Skalastang: 50 μm. (D) Fortykkelse af glomerulære kældermembraner (GBM) i nyreallograft sammenlignet med nyreiskograft er vist ved sølvfarvning. De stiplede firkanter skitserer gbM's højere forstørrelsesbillede. Skalabjælke: 50 μm. Klik her for at se en større version af denne figur.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Nyretransplantation i rotten er et udfordrende arbejde, der kræver et højt niveau af mikrokirurgiske teknikker, og operationsteknikkerne er blevet optimeret flere gange. Fra begyndelsen implanterede Gonzalez et al. donornyren i modtagerens hals og anastomoserede donorureturet til huden9. På grund af den høje forekomst af urinvejsinfektion og stenose i donoruretureten blev operationen imidlertid opgivet på kort tid. Efterfølgende blev implantatoperationen af donorens højre nyre forbedret ved anastomose af donorens nyrearterie og nyrevene til modtageren aorta og ringere vena cava15 eller ved anastomose af donorens nyrearterie og nyrevene til modtagerens nyrearterie og ringere vena cava11. Ikke desto mindre er den højre nyrearterie og nyrevene tynde og korte, hvilket øger vanskelighederne og fejlfrekvensen af operationen. Desuden havde denne operation brug for blokering af modtagerens aorta og ringere vena cava. Derfor resulterede iskæmi i underkroppen og trombosen af ringere vena cava i høje forekomster af invaliderende og død af modtagerrotter. De andre forbedrede implantatoperationer omfatter anastomose af donor aorta og nyrevene til modtagerens nyrearterie og nyrevene ved hjælp af en manchetmetode16. Atter andre anastomose urinlederen ved hjælp af manchetmetoden12. Tyndheden af nyrearterien og urinlederen øger imidlertid vanskeligheden ved at producere manchetten og anastomosen og derved begrænse anvendelsen af disse implantatoperationer.
I øjeblikket udføres den almindeligt anvendte rotteortotopiske nyretransplantationsmodel i venstre nyre ved anastomose af venstre donor nyrearterie og nyrevene til modtageren aorta og ringere vena cava og anastomose af donorblæreplasteret til modtagerblæren10. Den venstre nyrearterie og nyrevene er lange nok til at lette anastomose. Ikke desto mindre kan anastomosen til modtageren aorta og ringere vena cava stadig ikke undgå iskæmi i underkroppen og trombosen af ringere vena cava, hvilket kræver et højt niveau af mikrokirurgisk erfaring for at forkorte operationstiden. Den nuværende rotte ortotopiske nyretransplantationsmodel er modificeret fra Reuter S. et al.17 via end-to-end anastomose af venstre donor nyrearterie og nyrevene til modtagerens nyrearterie og nyrevene og anastomose af donoruretlederen til modtagerens blære ved hjælp af en "tunnel" -metode. I denne model er der ikke behov for at klippe modtageren aorta og ringere vena cava, så modtagerrottens fysiologiske systemiske cirkulation ikke afbrydes, og overlevelsesraten forbedres uden lammelse (over 90%). Desuden er "tunnel" -metoden til anastomose af donorurelederen til modtagerens blære let at betjene og reducerer forekomsten af urinlækage efter operation ved at sy donorblæreplasteret.
Nogle detaljer i denne model skal dog stadig bemærkes. For det første skal tarmene holdes fugtige udenfor ved at dække dem med fugtet gasbind. Ellers ville modtageren dø af intestinal nekrose efter operationen. For det andet bør bindevævet i donoruretureterne ikke fjernes fuldstændigt for at sikre blodtilførslen til den. For det tredje bør der tildeles tilsvarende vægte for donor- og modtagerrotter for at sikre, at donor- og modtagerbeholderne er af samme kaliber. En signifikant anderledes kaliber af donor- og modtagerkar ville øge blødningen eller trombosen efter anastomose. For det fjerde bør der holdes en passende længde af de anastomoserede kar, især for venerne ved at transektere donorens nyrevene distal fra sammenhængen mellem kønsvenen og binyrevenen og transektere modtagerens nyrevene proksimal til sammenhængen mellem kønsvenen og binyrevenen. Anastomoserede kar, der er for lange eller for korte, kan resultere i vridning af kar, dårlig blodgennemstrømning og blodlækage. For det femte skal anastomoseprocessen udføres under et højt forstørrelsesfelt, såsom x45 fold, på grund af tynde vægge i nyrearterien og nyrevenen. Et dårligt løst felt ville forårsage forkerte suturer af karvægge. For det sjette, for at reducere trombosen efter operationen, skal heparinopløsning (100 U / ml) droppes på de anastomoserede kar under anastomoseprocessen. For det syvende bør hele laget af donoruretureterne ikke sys, når det fastgøres til modtagerens blære, fordi stenose i urinlederen og hydronephrosis ville stige.
Begrænsningerne ved denne model er et højt krav til mikrokirurgiske færdigheder og en vis sandsynlighed for komplikationer, herunder blødning, urinlækage, trombose og hydronephrosis. De vigtigste postoperative komplikationer er ens blandt forskellige ortotopiske nyretransplantationsteknikker hos rotter, som omfatter blødning, urinlækage, trombose og hydronephrose som følge af ureter anastomose stenose. I modsætning til anastomosen af donorens nyrearterie og nyrevene til modtagerens nyrearterie og ringere vena cava11 øger den nuværende teknik mildt trombosen i nyrekar på grund af anastomoseens tyndhed, men undgår interferens med cirkulationen af underekstremiteterne. I modsætning til anastomosen i nyrearterien og nyrevenen ved hjælp af en manchetmetode16 reducerer den nuværende teknik drejningen af kar. I sammenligning med end-to-end anastomose af urinlederen ved hjælp afmanchetmetoden 12 øger den nuværende teknik mildt stenose af ureter anastomose, men reducerer driftsvanskeligheden. Forbedringen af mikrokirurgiske teknikker ved kontinuerlig praksis kan reducere komplikationerne, øge overlevelsesraten for modtagerrotter og øge udnyttelsesgraden af modellerne i de efterfølgende eksperimenter. Den nuværende model giver en henvisning til forskere, der studerer nyretransplantation.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ingen interessekonflikter at oplyse.
Acknowledgments
Dette arbejde blev støttet af National Natural Science Foundation of China (81870304) til Jun Li og af Else Kröner-Fresenius-Stiftung (nr. 2017_A28) til Marcus Groettrup.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 10-0 Polyamide Monofilament suture | B.Braun Medical Inc. | G0090781 | |
| 4-0 Polyamide Monofilament suture | B.Braun Medical Inc. | C1048451 | |
| 8-0 Polyamide Monofilament suture | B.Braun Medical Inc. | C2090880 | |
| Buprenorphine | US Biological life Sciences | 352004 | |
| Electrocoagulator | Electrocoagulator | ZJ1099 | |
| F344 and Lewis rats | Center of Experimental Animals (Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, China) | NA | |
| Gauze | Henan piaoan group Co., LTD | 10210402 | |
| Heating pad | Guangzhou Dewei Biological Technology Co., LTD | DK0032 | |
| Heparin | North China Pharmaceutical Co., LTD | 2101131-2 | |
| Injection syringe (1 ml and 10 ml) | Shandong weigao group medical polymer Co., LTD | 20211001 | |
| Isoflurane | RWD Life Science Co., LTD | 21070201 | |
| Penicillin G Sodium | Wuhan HongDe Yuexin pharmatech co.,Ltd | 69-57-8 | |
| Scalp needle (24 G) | Hongyu Medical Group | 20183150210 | |
| Shaver | Beyotime | FS600 | |
| Small animal anesthesia machine | RWD Life Science | R500 | |
| Small Animal Surgery Kit | Beyotime | FS500 | |
| Sodium chloride injection | Southwest pharmaceutical Co., LTD | H50021610 | |
| Surgical operation microscope | Tiannuoxiang Scientific Instrument Co. , Ltd, Beijing, China | SZX-6745 | |
| Swab | Yubei Medical Materials Co., LTD | 21080274 | |
| Tape | Minnesota Mining Manufacturing Medical Equipment (Shanghai) Co., LTD | 1911N68 | |
| UW solution | Bristol-Myers Squibb Company | 17HB0002 |
References
- Cooper, J. E., Wiseman, A. C. Novel immunosuppressive agents in kidney transplantation. Clinical Nephrology. 73 (5), 333-343 (2010).
- Colaneri, J. An overview of transplant immunosuppression--history, principles, and current practices in kidney transplantation. Nephrology Nursing Journal. 41 (6), 549-560 (2014).
- Colvin, R. B., Smith, R. N.
- Joosten, S. A., et al. Antibody response against perlecan and collagen types IV and VI in chronic renal allograft rejection in the rat. American Journal of Pathology. 160 (4), 1301-1310 (2002).
- Joosten, S. A., van Ham, V., Borrias, M. C., van Kooten, C., Paul, L. C. Antibodies against mesangial cells in a rat model of chronic renal allograft rejection. Nephrology Dialysis Transplantation. 20 (4), 692-698 (2005).
- Yamanaka, K., et al. Depression of complement regulatory factors in rat and human renal grafts is associated with the progress of acute T-cell mediated rejection. PLoS One. 11 (2), 0148881 (2016).
- Li, J., et al. Immunoproteasome inhibition prevents chronic antibody-mediated allograft rejection in renal transplantation. Kidney International. 93 (3), 670-680 (2018).
- Li, J., et al. Immunoproteasome inhibition induces plasma cell apoptosis and preserves kidney allografts by activating the unfolded protein response and suppressing plasma cell survival factors. Kidney International. 95 (3), 611-623 (2019).
- Miller, B. F., Gonzalez, E., Wilchins, L. J., Nathan, P.
- Tillou, X., Howden, B. O., Kanellis, J., Nikolic-Paterson, D. J., Ma, F. Y. Methods in renal research: kidney transplantation in the rat. Nephrology. 21 (6), 451-456 (2016).
- Daniller, A., Buchholz, R., Chase, R. A. Renal transplantation in rats with the use of microsurgical techniques: a new method. Surgery. 63 (6), 956-961 (1968).
- Ahmadi, A. R., et al. Orthotopic rat kidney transplantation: A novel and simplified surgical approach. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (147), e59403 (2019).
- Günther, E., Walter, L. The major histocompatibility complex of the rat (Rattus norvegicus). Immunogenetics. 53 (7), 520-542 (2001).
- Loupy, A., et al. The Banff 2015 Kidney Meeting Report: Current challenges in rejection classification and prospects for adopting molecular pathology. American Journal of Transplantation. 17 (1), 28-41 (2017).
- Fisher, B., Sun, L. Microvascular surgical techniques in research, with special reference to renal transplantation in the rat. Surgery. 58 (5), 904-914 (1965).
- Kamada, N. A description of cuff techniques for renal transplantation in the rat. Use in studies of tolerance induction during combined liver grafting. Transplantation. 39 (1), 93-95 (1985).
- Grabner, A., et al. Non-invasive imaging of acute allograft rejection after rat renal transplantation using 18F-FDG PET. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (74), e4240 (2013).
