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Articolo metodologico

In vitro Digestione delle emulsioni in una singola goccia tramite scambio multifase di fluidi gastrointestinali simulati

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DOI:

10.3791/64158

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18 novembre 2022

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In questo articolo

Sommario

Una bilancia del film superficiale a goccia pendente implementata con uno scambio multi-sottofase, soprannominato OCTOPUS, consente di imitare le condizioni digestive mediante lo scambio sequenziale di sottofase della soluzione originale di massa con fluidi gastrointestinali simulati. La digestione simulata in vitro viene monitorata registrando in situ la tensione interfacciale dello strato interfacciale digerito.

Abstract

Le emulsioni vengono attualmente utilizzate per incapsulare e fornire nutrienti e farmaci per affrontare diverse condizioni gastrointestinali come obesità, fortificazione dei nutrienti, allergie alimentari e malattie digestive. La capacità di un'emulsione di fornire la funzionalità desiderata, vale a dire, raggiungere un sito specifico all'interno del tratto gastrointestinale, inibire / ritardare la lipolisi o facilitare la digeribilità, dipende in ultima analisi dalla sua suscettibilità alla degradazione enzimatica nel tratto gastrointestinale. Nelle emulsioni olio-in-acqua, le goccioline lipidiche sono circondate da strati interfacciali, dove gli emulsionanti stabilizzano l'emulsione e proteggono il composto incapsulato. Ottenere una digeribilità su misura delle emulsioni dipende dalla loro composizione iniziale, ma richiede anche il monitoraggio dell'evoluzione di quegli strati interfacciali in quanto sono sottoposti a diverse fasi della digestione gastrointestinale. Una bilancia del film superficiale a goccia pendente implementata con uno scambio multi-sottofase consente di simulare la digestione in vitro delle emulsioni in una singola goccia acquosa immersa nell'olio applicando un modello di digestione statica personalizzato. Il transito attraverso il tratto gastrointestinale è imitato dallo scambio di sottofase della soluzione originale di goccioline bulk con mezzi artificiali, imitando le condizioni fisiologiche di ciascun compartimento / fase del tratto gastrointestinale. L'evoluzione dinamica della tensione interfacciale è registrata in situ durante l'intera digestione gastrointestinale simulata. Le proprietà meccaniche delle interfacce digerite, come l'elasticità e la viscosità dilatatoria interfacciale, vengono misurate dopo ogni fase di digestione (orale, gastrica, intestino tenue). La composizione di ciascun mezzo digestivo può essere regolata per tenere conto delle particolarità delle condizioni digestive, comprese le patologie gastrointestinali e i mezzi digestivi infantili. Vengono identificati i meccanismi interfacciali specifici che influenzano la proteolisi e la lipolisi, fornendo strumenti per modulare la digestione mediante l'ingegneria interfacciale delle emulsioni. I risultati ottenuti possono essere manipolati per la progettazione di nuove matrici alimentari con funzionalità su misura come bassa allergenicità, apporto energetico controllato e ridotta digeribilità.

Introduzione

Capire come viene digerito il grasso, che comporta la digestione dell'emulsione, è importante per progettare razionalmente prodotti con funzionalità su misura1. Il substrato per la digestione dei grassi è un'emulsione poiché il grasso viene emulsionato al consumo per azione meccanica e miscelazione con biotensioattivi nella bocca e nello stomaco. Inoltre, la maggior parte del grasso consumato dagli esseri umani è già emulsionato (come i prodotti lattiero-caseari), e nel caso di neonati o di alcuni anziani, questa è l'unica forma di consumo. Quindi, la progettazione di prodotti a base di emulsioni con profili digestivi specifici è molto importan....

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Protocollo

1. Sequenza di pulizia per tutti gli oggetti in vetro utilizzati nella sperimentazione scientifica delle superfici

  1. Strofinare la vetreria con una soluzione detergente concentrata (vedi Tabella dei materiali) diluita in acqua (10%).
  2. Risciacquare abbondantemente con una sequenza di acqua di rubinetto, propanolo, acqua distillata e acqua ultrapura. Asciugare in una cabina e conservare in un armadietto chiuso fino all'uso.

2. Preparazione del campione

  1. Preparare mezzi digestivi artificiali secondo i protocolli standardizzati INFOGEST11,20

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Risultati

Questa sezione mostra diversi esempi di profili di digestione misurati con OCTOPUS. L'aspetto generale delle corrispondenze del profilo di digestione simulato è mostrato nella Figura 4B. La tensione interfacciale è solitamente rappresentata contro il tempo nel profilo della digestione. Le diverse fasi/fasi di digestione considerate sono rappresentate in diversi colori. La prima fase forma lo strato iniziale e corrisponde alla fase di adsorbimento dell'emulsionante o della proteina/tensioatti.......

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Discussione

Questo articolo descrive un protocollo generalizzato per misurare la digestione in vitro degli strati interfacciali utilizzando apparecchiature per la caduta del pendente. Il protocollo può essere adattato alle esigenze specifiche dell'esperimento regolando la composizione dei tamponi digestivi, che si basano sul protocollo armonizzato INFOGEST11,20 per facilitare il confronto con la letteratura. Gli enzimi digestivi e i biotensioattivi possono essere ag.......

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Dichiarazioni

Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari concorrenti noti o relazioni personali che potrebbero aver influenzato il lavoro riportato in questo articolo.

Ringraziamenti

Questa ricerca è stata finanziata dai progetti RTI2018-101309-B-C21 e PID2020-631-116615RAI00, finanziati da MCIN/AEI/10.13039/501100011033 e da "FESR A way of making Europe". Questo lavoro è stato (parzialmente) supportato dal Biocolloid and Fluid Physics Group (ref. PAI-FQM115) dell'Università di Granada (Spagna).

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Materiali

Elenco dei materiali utilizzati in questo articolo
NomeAziendaNumero di catalogoCommenti
Alfa-chimotripsina da pancreas bovinoSigma-AldrichC4129Enzima
Beta-lattoglobulinaSigma-AldrichL0130Emulsionatore
Siero bovino AlbuminaSigma-Aldrich9048-46-8Emulsionante
CaCl2Sigma-Aldrich10043-52-4elettrolitica
Kronton strumentiCentrikon T-124Per separare olio e resine
Pectina di agrumiSigma-AldrichP9135Emulsionante
co-lipasi DAL PANCREAS SUINOSigmaC3028Enzima
CONTACTOUniversità di Granada (UGR)https://core.ugr.es/dinaten/, ultimo accesso: 07/18/2022
DINATEN Università di Granada (UGR)https://core.ugr.es/dinaten/, ultimo accesso: 07/18/2022
Lipasi gastricaLipolytechRGE15-1GEnzima
Albumina sierica umanaSigma-Aldrich70024-90-7Emulsionante
INFOGESThttp://www.proteomics.ch/IVD/
Lipasi da pancreas suino, tipo IISigma-AldrichL33126Enzima
magnesio metasilicato resineFluka1343-88-0Resine per purificare l'olio
Micro 90Prodotti internazionaliM-9051-04Detergente
NaClSigma7647-14-5Elettrolita
NaH2PO4Scharlau10049-21-5Per preparare il tampone
OCTOPUSProducciones Cientí ficas y Té cnicas S.L. (Gó Olio
d'olivaSigma-Aldrich1514Olio
pancreatico da pancreas suinoSigmaP7545-25 gEnzima
PepsinaSigma-AldrichP6887Enzima
Pluronic F127SigmaP2443Emulsionante
Pluronic F68SigmaP1300Emulsionante
Sodio desossicolatoSigmaSali biliari
Glicodesossicolato di sodioSigmaC9910Sali biliari
Sodio taurocolatoSigma86339Sali
biliari Filtro siringaMillex-DPSLGP033R  Filtro per siringa 0,22 & micro; m dimensione dei pori polietersulfone
tripsinaSigma-AldrichT1426enzima
Centrifuga

Riferimenti

  1. McClements, D. J. The biophysics of digestion: Lipids. Current Opinion in Food Science. 21, 1-6 (2018).
  2. McClements, D. J., Li, Y. Structured emulsion-based delivery systems: Controlling the digestion and release of lipo....

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Ristampe e permessi

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