Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- لأداء الشللالناجم عن السباحة- I، أو SWIP المقايسة، نقل L4 نظمت C. elegans اليرقات إلى لوحة بقعة زجاجية مليئة السائل. تحديد L4 hermaphrodites من خلال وجود الفرج النامية.
لتقييم السباحة بوساطة الدوبامين، سجل حركة الدودة التي تتميز بثني الجسم على شكل C وسلوك الضرب.
بمجرد تمرير الرسالة ، يتم تحرير الدوبامين من المستقبلات ، ويمكن تناول الناقلات العصبية غير المنضمة من قبل الخلايا العصبية الدوبامين من خلال بروتينات الناقل المتخصصة وإعادة استخدامها.
في اليرقات مع إشارات الدوبامين المتغيرة ، الناجمة عن تعطيل الطفرات في ناقل الدوبامين أو العلاجات الدوائية التي تزيد من إطلاق الدوبامين ، يتراكم الدوبامين في المشقوق المتشابك.
في بروتوكول المثال ، سنرى عروضا تفصيلية للمقايسات اليدوية والآلية SWIP في C. elegans تعامل مع الأمفيتامين.
- للتقييم اليدوي ل SWIP، أضف 40 ميكرولتر من محلول التحكم مع أو بدون أمفيتامين 0.5 ملليمولار في لوحة بقعة زجاجية.
بدء تشغيل جهاز ضبط الوقت. لاحظ عدد الديدان التي تم إطلاقها في البئر ، ولاحظ وسجل عدد الديدان التي تعرض SWIP في كل علامة دقيقة لمدة إجمالية قدرها 10 دقائق.
في نهاية الإجراء، انسخ البيانات الأولية إلى جدول بيانات واحسب نسبة الديدان المشلولة بقسمة عدد الديدان المشلولة في كل دقيقة على العدد الإجمالي للديدان التي تم اختبارها في جميع أنحاء المقايسة والضرب بنسبة 100. انسخ قيم النسبة المئوية إلى أي رسوم بيانية وبرامج إحصائية ورسم البيانات بقيم مئوية من SWIP على المحور ص والوقت على المحور x باستخدام تنسيق الرسم البياني xy.
ويمكن إجراء تحليل إحصائي بين المجموعات التي تعالج بالمكافحة والأمفيتامين ووقت العلاج.
للتحليل الآلي للشلل الناجم عن السباحة ، قم بإعداد الكاميرا وبرنامج تعقب الديدان والسيناريو لتشغيل تحليل برامج التتبع.
ثم، تسجيل أشرطة الفيديو السباحة من دودة واحدة في وقت واحد، واستخدام برنامج تعقب دودة لحساب وتيرة الانحناءات الجسم.
