逃生反应分析：研究斑马鱼幼虫触摸刺激反应的方法

- 首先， 轻轻地将几个胚胎转移到含有胚胎介质的培养皿中。现在用钳子握住巧克力， 用另一个钳子在其中撕裂。

接下来，轻轻将胚胎推过眼泪。从胚胎中取出胆汁会加速胚胎的生长和运动。为了清除碎片，使用巴斯德移液器将胚胎转移到另一个含有胚胎介质的培养皿中。

将培养皿放在孵化器中，让胚胎在28摄氏度下生长。 在实验前将充满水的显微镜阶段设置为28摄氏度，以避免幼虫行为中与温度相关的任何偏差。

将培养皿放在舞台上，安装在盘子上方的相机中。接下来，将胚胎放在相机的视野中。现在用钝针轻轻触摸胚胎，并在摄像机录制软件上记录幼虫反应。

刺激后，胚胎表现出强大的逃生反应——突然游泳和急转弯。测量触摸和幼虫在逃生过程中的峰值加速度之间的时间。

在示例协议中，我们将观察斑马鱼幼虫对外部刺激的反应。

-要执行测定，将装满约25 毫升胚胎介质的培养皿放在设定为约 28摄氏度的照明温度控制阶段。将高速摄像机安装在盘上方。 启动视频录制软件，并将捕获速度设置为每秒 1，000 帧，以确保可以捕获快速游泳速度。

将胚胎放在培养皿的中心，在视野中清晰可见。 按记录，然后用钝针轻轻触摸胚胎头部顶部，进行机械感官刺激。

一旦胚胎游出视野或恢复休息，停止记录。

-重复测试同一幼虫可能导致一些疾病模型的习惯或促进肌肉无力，导致对触觉刺激的反应降低，因此，每个胚胎只能测试一次。