Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Başlamak için, birkaç embriyoyu yavaşça embriyo ortamı içeren bir Petri kabına aktarın. Şimdi korononu tokmaklarla tutun ve başka bir asala yırtın.
Daha sonra, embriyoyu yırtıktan hafifçe itin. Koronun embriyodan çıkarılması büyümesini ve hareketini hızlandırır. Enkazdan kurtulmak için embriyoları pastör pipet kullanarak embriyo ortamı içeren başka bir Petri kabına aktarın.
Petri kabını bir inkübatöre yerleştirin ve embriyoların 28 santigrat derecede büyümesine izin verin. Larva davranışında sıcaklıkla ilgili sapmaları önlemek için deneyden önce ışıklı su dolu bir mikroskop aşamasını 28 santigrat dereceye ayarlayın.
Petri kabını sahneye yerleştirin ve kabın üstündeki kameraya monte edin. Sonra, embriyoyu kameranın görüş alanına ortalayın. Şimdi embriyoya künt bir iğneyle hafifçe dokunun ve larva tepkisini video kamera kayıt yazılımına kaydedin.
Uyaran üzerine, embriyo güçlü bir kaçış tepkisi sergiler-- keskin dönüşlerle birlikte bir patlama yüzer.
Örnek protokolde, zebra balığı larvalarının dış uyaranlara tepkisini gözlemleyeceğiz.
- Tahlil yapmak için, yaklaşık 25 mililitre embriyo ortamı ile dolu bir Petri kabını yaklaşık 28 santigrat dereceye ayarlanmış aydınlatılmış sıcaklık kontrollü bir sahneye yerleştirin. Yüksek hızlı kamerayı çanağın üzerine monte edin. Video kayıt yazılımını başlatın ve hızlı yüzme hızlarının yakalanabilmesini sağlamak için yakalama hızını saniyede 1.000 kareye ayarlayın.
Embriyoyu Petri kabının ortasına yerleştirin, görüş alanında açıkça görülebilir.
Embriyo görüş alanının dışına çıktıktan veya dinlenmeye döndükten sonra kaydı durdurun.
- Aynı larvaların tekrar tekrar test edilmesi, bazı hastalık modellerinde kas zayıflığının alışkanlık haline alınmasına veya teşvik edilmesine neden olabilir, bu da dokunsal uyarana yanıtın azalmasına neden olabilir. Bu nedenle, her embriyo sadece bir kez test edilmelidir.
