Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Till att börja med, överför försiktigt några embryon till en petriskål som innehåller embryomedium. Håll nu korgen med tång och gör en tår i den med en annan tång.
Tryck sedan försiktigt embryot genom revan. Att ta bort korieringen från embryot påskyndar dess tillväxt och rörelse.
Placera Petriskålen i en inkubator och låt embryona växa vid 28 grader Celsius. Ställ in ett upplyst vattenfyllt mikroskopstadium på 28 grader Celsius före experimentet för att undvika temperaturrelaterade avvikelser i larvbeteende.
Placera petriskålen på scenen och montera i kameran ovanför skålen.
Vid stimulans uppvisar embryot ett kraftfullt flyktsvar - en sprängning tillsammans med skarpa svängar.
I exempelprotokollet kommer vi att observera zebrafisklarvernas svar på yttre stimuli.
- För att utföra analysen, placera en petriskål fylld med cirka 25 milliliter embryomedium på en upplyst temperaturstyrd scen inställd på cirka 28 grader Celsius. Montera höghastighetskameran ovanför skålen.
Placera embryot i mitten av petriskålen, tydligt synligt i synfältet. Tryck på protokollet och leverera sedan en mekanosensorisk stimulans genom att försiktigt röra embryot med en trubbig nål ovanpå huvudet.
Stoppa inspelningen när embryot har simmat ut ur synfältet eller återgått till vila.
- Upprepad testning av samma larver kan leda till tillvänjning eller främja muskelsvaghet i vissa sjukdomsmodeller, vilket resulterar i minskat svar på den taktila stimulansen.
