Encyclopedia of Experiments: Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.
Transcript
Please note that all translations are automatically generated.
- Для начала аккуратно перенесите несколько эмбрионов в чашку Петри, содержащую эмбриона среды. Теперь держите хорион с типсами и сделать слезу в нем с другой типсов.
Далее, осторожно протолкнуть эмбрион через слезу. Удаление хориона из эмбриона ускоряет его рост и движение.Чтобы избавиться от мусора, перенести эмбрионы в другую чашку Петри, содержащую эмбриона среды с помощью пастер пипетки.
Поместите чашку Петри в инкубатор, и пусть эмбрионы растут на 28 градусов по Цельсию. Установите освещенной воды заполнены микроскоп этапе до 28 градусов по Цельсию до эксперимента, чтобы избежать каких-либо температурных отклонений в личинок поведения.
Поместите чашку Петри на сцену и смонтировать в камеру над тарелкой.Далее, центр эмбриона в поле зрения камеры. Теперь осторожно коснитесь эмбриона тупой иглой, и зафиксировать личиночинок ответ на видеокамеру записи программного обеспечения.
После стимула, эмбрион демонстрирует мощный ответ побега - взрыв плавать вместе с резкими поворотами. Измерьте время между прикосновением и пика ускорения личинок во время его побега.
В примере протокола мы будем наблюдать реакцию личинок зебры на внешние раздражители.
- Для выполнения анализа поместите чашку Петри, наполненную примерно 25 миллилитров среды эмбриона, на освещенную температуру контролируемой сцены, установленную примерно до 28 градусов по Цельсию. Гора высокоскоростной камеры над блюдом. Запуск программного обеспечения для видеозаписи, и установить скорость захвата до 1000 кадров в секунду, чтобы обеспечить быструю скорость плавания могут быть захвачены.
Распореждайте эмбрион в центре чашки Петри, хорошо видимой в поле зрения. Нажмите запись, а затем доставить механосенсорийный стимул, мягко касаясь эмбриона с тупой иглой на верхней части головы.
Остановите запись после того, как эмбрион выплыл из поля зрения или вернулся на отдых.
- Повторное тестирование одних и тех же личинок может привести к привыканию или способствовать мышечной слабости в некоторых моделях заболеваний, что приводит к снижению реакции на тактильный стимул.
