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JoVE Encyclopedia of Experiments
Encyclopedia of Experiments: Biology

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Ensayo de respuesta de escape

 
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Ensayo de respuesta de escape: un método para estudiar la respuesta de larva de pez cebra para tocar estímulos

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- Para empezar, transfiera suavemente algunos embriones a una placa de Petri que contenga el medio embrionario.

A continuación, empuje suavemente el embrión a través del desgarro.

Coloca la placa Petri en una incubadora y deja que los embriones crezcan a 28 grados centígrados.

Coloque la placa Petri en el escenario y monte en la cámara por encima del plato.

Tras el estímulo, el embrión muestra una poderosa respuesta de escape: un baño de ráfagas junto con giros bruscos.

En el protocolo de ejemplo, observaremos la respuesta de las larvas de pez cebra a estímulos externos.

- Para realizar el ensayo, coloque una placa Petri llena de aproximadamente 25 mililitros de medio embrión en una etapa controlada por temperatura iluminada situada en aproximadamente 28 grados centígrados. Monte la cámara de alta velocidad sobre el plato. Inicie el software de grabación de vídeo y establezca la velocidad de captura en 1.000 fotogramas por segundo para garantizar que se puedan capturar velocidades de natación rápidas.

Coloque el embrión en el centro de la placa de Petri, claramente visible en el campo de visión.

Detenga la grabación una vez que el embrión haya salido del campo de visión o vuelva a descansar.

- Las pruebas repetidas de las mismas larvas pueden conducir a la habituación o promover la debilidad muscular en algunos modelos de enfermedad, lo que resulta en una respuesta reducida al estímulo táctil.

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