얼룩말 광유전학: 유전적으로 변형된 소마토감각 뉴런을 활성화하여 유목 행동 반응을 연구합니다.

- 제브라피시 애벌레에서는, 시각 자극은 세포 감각 신경을 활성화하고 탈출 반응을 시작할 수 있습니다. 유충, 삼각 및 로한 수염 뉴런에서 발견되는 이러한 뉴런의 두 가지 유형이 있습니다.

이 기술을 수행하기 위해, 아가로즈 젤에 직면 등쪽 측과 형질 유충을 장착하고 해부 현미경 아래에 배치. 면도날을 사용하여 노른자와 꼬리 주위에서 아가로즈의 쐐기 모양부분을 분리하십시오.

로한-비어드 뉴런의 세포 본체가 있는 트렁크 근처에 광학 케이블의 끝을 배치합니다.

예제 프로토콜에서, 우리는 로혼 수염 뉴런을 활성화하기 위해 애벌레를 탑재하여 채널로도프신 변이를 표현하고 행동 반응을 관찰할 것입니다.

- 이중 증류수로 1.5% 저용아가로즈를 만들고 고화화되는 것을 막기 위해 섭씨 42도의 열블록에 보관하십시오. 유리 파스퇴르 파이펫을 사용하여, 스크린 전 유충 중 하나를 1.5% 낮은 녹인 아가로즈 튜브로 가능한 한 작은 푸른 배아물로 옮기는 것입니다.

해부 현미경하에서 애벌레 등쪽을 위로 배치합니다. 아가로즈가 고화되면 얇은 면도날을 사용하여 애벌레의 양쪽에서 아가로즈를 잘라냅니다.

다음으로, 노른자의 양쪽에 두 개의 대각선 컷을 만들어 애벌레를 닉하지 않도록 주의하십시오.

이제 고속 카메라를 해부 범위에 장착하고 카메라를 컴퓨터에 연결합니다.

다음으로, 형광 해부 현미경을 사용하여 ChEF-tdTomato 발현을 사용하여 신경 세포 체 근처에 광학 케이블의 끝을 배치합니다.

애벌레를 방출하기 위해, 집게로를 분리하고 동물을 다치게하지 않도록 주의하십시오.