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में प्रोटीन परिसरों की पहचान<em> Escherichia कोलाई</em> संयोजन में अग्रानुक्रम मास स्पेक्ट्रोमेट्री के साथ अनुक्रमिक पेप्टाइड संबंध शुद्धीकरण का उपयोग
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Biology
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JoVE Journal Biology
Identification of Protein Complexes in Escherichia coli using Sequential Peptide Affinity Purification in Combination with Tandem Mass Spectrometry
DOI:

14:58 min

November 12, 2012

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:47Construction of Gene-specific SPA-tagging in E. Coli DY330 Strain
  • 03:54Culturing and Sonication
  • 05:26Affinity Purification
  • 07:53Proteolysis and Sample Preparation for Mass Spectrometry
  • 09:38Protein Identification by LTQ Orbitap Velos Mass Spectrometer
  • 11:02Results
  • 14:27Conclusion

Summary

Automatic Translation

आत्मीयता के साथ टैग मास स्पेक्ट्रोमेट्री (APMS) संयोजन में प्रोटीन की शुद्धि प्रोटीन बातचीत नेटवर्क के व्यवस्थित मानचित्रण और जैविक प्रक्रियाओं के यंत्रवत आधार की जांच के लिए एक शक्तिशाली तरीका है. यहाँ, हम एक अनुकूलित अनुक्रमिक पेप्टाइड आत्मीयता (एसपीए) APMS जीवाणु विकसित प्रक्रिया का वर्णन<em> Escherichia कोलाई</em> कि करने के लिए अलग और निकट एकरूपता भी सेल प्रति कम प्रतिलिपि संख्या से शुरू करने के लिए स्थिर बहु ​​- प्रोटीन परिसरों विशेषताएँ इस्तेमाल किया जा सकता है.

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