Journal
/
/
Identifiering av proteinkomplex i<em> Escherichia coli</em> Hjälp Sekventiell rening peptid affinitet i kombination med tandem masspektrometri
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
Identification of Protein Complexes in Escherichia coli using Sequential Peptide Affinity Purification in Combination with Tandem Mass Spectrometry
DOI:

14:58 min

November 12, 2012

, , , ,

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:47Construction of Gene-specific SPA-tagging in E. Coli DY330 Strain
  • 03:54Culturing and Sonication
  • 05:26Affinity Purification
  • 07:53Proteolysis and Sample Preparation for Mass Spectrometry
  • 09:38Protein Identification by LTQ Orbitap Velos Mass Spectrometer
  • 11:02Results
  • 14:27Conclusion

Summary

Automatic Translation

Affinitetsrening av märkta proteiner i kombination med masspektrometri (truppminor) är en kraftfull metod för systematisk kartläggning av nätverk proteininteraktioner och för undersökning av mekanistiska grunden för biologiska processer. Här beskriver vi en optimerad sekventiell peptid affinitet (SPA) truppminor förfarande utvecklats för bakterien<em> Escherichia coli</em> Som kan användas för att isolera och karakterisera stabila flera proteinkomplex till nära homogenitet även från låga kopieantal per cell.

Related Videos

Read Article