Detta protokoll utgör en fullständig och detaljerad procedur för att tillämpa RNA-seq, en kraftfull nästa generations DNA-sekvensering teknik, profil transcriptomes i humana pulmonära mikrovaskulära endotelceller med eller utan trombin behandling. Detta protokoll är generaliserbara till olika celler eller vävnader som påverkas av olika reagenser eller sjukdomstillstånd.