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Quantitativo de alta capacidade ensaio de citotoxicidade de célula única para as células T.
JoVE Journal
Immunology and Infection
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JoVE Journal Immunology and Infection
Quantitative High-throughput Single-cell Cytotoxicity Assay For T Cells
DOI:

09:28 min

February 02, 2013

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Chapters

  • 00:05Title
  • 01:32Fabrication of Arrays of Nanowells in PDMS
  • 02:14Target Cell (T) Labeling
  • 02:53Effector (E) Cell Labeling
  • 03:26Separation of Live and Dead Cells by Ficoll Density Gradient
  • 05:23Cell Loading onto Nanowell Array
  • 06:51Imaging
  • 07:58Results: A High-throughput Cytolytic Assay
  • 09:03Conclusion

Summary

Automatic Translation

Descrevemos uma única célula ensaio de elevado débito para medir a citotoxicidade de células T, quando incubado com as células-alvo tumorais. Este método emprega uma matriz elastomérica denso, de sub-nanolitro poços (~ 100000 poços matriz /) para confinar espacialmente as células T e as células alvo em proporções definidas e está acoplado a microscopia de fluorescência para monitorizar alvo efetuador conjugação e apoptose subsequente.

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