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Eine quantitative Assay zur Protein Studie: DNA-Wechselwirkungen, Discover Transkriptionsregulatoren der Genexpression, und identifizieren Novel Anti-Tumor-Wirkstoffe
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A Quantitative Assay to Study Protein:DNA Interactions, Discover Transcriptional Regulators of Gene Expression, and Identify Novel Anti-tumor Agents
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Eine quantitative Assay zur Protein Studie: DNA-Wechselwirkungen, Discover Transkriptionsregulatoren der Genexpression, und identifizieren Novel Anti-Tumor-Wirkstoffe

DOI:
10.3791/50512-v

•

06:43 min

•

August 31, 2013

•

, , , , ,
1Greenebaum Cancer Center,University of Maryland School of Medicine, 2Program in Molecular Medicine,University of Maryland School of Medicine, 3Department of Biochemistry & Molecular Biology,University of Maryland School of Medicine, 4Department of Pharmacology & Experimental Therapeutics,University of Maryland School of Medicine, 5Department of Pathology and Biochemistry & Molecular Biology,University of Maryland School of Medicine

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:49Cell Culture and Nuclear Protein Isolation
  • 02:46Preparation of 96-well Plates by Incubation with Nuclear Extracts
  • 03:58Measurement of RUNX2 DNA Binding
  • 05:36Results: Inhibition of RUNX2 DNA Binding
  • 06:22Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Wir entwickelten eine quantitative DNA-bindenden, ELISA-basierten Assay Transkriptionsfaktor-Interaktionen mit DNA zu messen. Hohe Spezifität für das RUNX2 Protein wurde mit einer Consensus-DNA-Oligonukleotid und Erkennung spezifischer monoklonaler Antikörper erreicht. Kolorimetrischen Nachweis mit einem Enzym-gekoppelten Antikörper Substrat-Reaktion wurde in Echtzeit überwacht.

Tags

Protein:DNA InteractionsTranscriptional RegulatorsGene ExpressionAnti-tumor AgentsDNA-binding AssayEMSAChIPD-ELISARUNX2Protein-DNA InteractionQuantitative AssayDrug Screening

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