Journal
/
/
זיהוי של שותפי אינטראקציה חלבון בתאי יונקים באמצעות SILAC-immunoprecipitation פרוטאומיקה כמותי
JoVE Journal
Biology
This content is Free Access.
JoVE Journal Biology
Identification of Protein Interaction Partners in Mammalian Cells Using SILAC-immunoprecipitation Quantitative Proteomics
DOI:

12:53 min

July 06, 2014

,

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:49Harvesting of SILAC-labeled Cell Lysates
  • 03:39Binding Lysate to Anti-GFP Beads
  • 04:45Preparation of Samples for MS Analysis
  • 06:11Data Analysis I: Understanding the Results and Removal of Low-confidence Identifications
  • 07:36Data Analysis II: Selecting High Confidence Interactions for Further Study
  • 08:58Data Analysis III: Merging Replica Datasets
  • 10:59Results: Identification of Translation Initiation Factor – Binding Proteins
  • 12:22Conclusion

Summary

Automatic Translation

ניסויי immunoprecipitation SILAC מייצגים אמצעי רב עוצמה לגילוי חלבון חדש: אינטראקציות חלבון. על ידי המאפשר כימות היחסית מדויקת של שפע חלבון בשליטה והן דגימות בדיקה, אינטראקציות אמיתי ניתן להבחין בקלות ממזהמים ניסיוניים, ואינטראקציות זיקה נמוכות נשמרו באמצעות שימוש בתנאי חיץ פחות מחמירים.

Related Videos

Read Article