Journal
/
Biology
/
Detectie van RNA-bindende eiwitten door<em> In Vitro</em> RNA Pull-down in Adipocyte Cultuur
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
Detection of RNA-binding Proteins by In Vitro RNA Pull-down in Adipocyte Culture
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Detectie van RNA-bindende eiwitten door<em> In Vitro</em> RNA Pull-down in Adipocyte Cultuur

DOI:
10.3791/54207-v

•

10:34 min

•

July 22, 2016

•

, , ,
1Cardiovascular and Metabolic Disorders Program,Duke-NUS Medical School, 2Institute of Molecular and Cell Biology, Singapore, 3Division of Bioengineering, School of Chemical & Biomedical Engineering,Nanyang Technological University

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:35Preparation of Biotin-labeled RNA
  • 02:18Preparation of RNA-conjugated Beads
  • 04:16Preparation of Cellular Lysate from Primary Adipocytes
  • 07:00Binding and Elution of RBP
  • 08:45Results: RNA Pull-down Assay
  • 10:05Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Een RNA-pull-down protocol is hier geoptimaliseerd voor detectie van interacties tussen RNA-bindende eiwitten (RBPs) en niet-coderende en coderende RNAs. Een RNA fragment uit androgeenreceptor (AR) werd gebruikt als een voorbeeld om te demonstreren hoe de RBP halen uit lystate primaire bruine adipocyten.

Tags

RNA-binding ProteinsRNA Pull-downAdipocyte CultureAntigen Receptor 3-Prime Untranslated Region (AR 3-Prime UTR)Biotinylated RNAIn Vitro TranscriptionStreptavidin-coated Magnetic BeadsRNA Structure BufferRNA-protein InteractionsRNA Regulatory MechanismsLong Non-coding RNA

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

PAR-Clip - een methode om Transcriptome-breed de bindingsplaatsen van RNA-bindende eiwitten te identificeren

Genereren van RNA / DNA-Hybriden in Genomic DNA door omzetting door middel RNA-bevattende Oligonucleotiden

Pull-down van calmoduline-bindende eiwitten

In vitro transcriptie en aftopping van Gaussia Luciferase mRNA Gevolgd door HeLa celtransfectie

Chromatine Isolatie door RNA-zuivering (Chirp)

Detectie van virale RNA door fluorescentie<em> In situ</em> Hybridisatie (FISH)

Rapid Generation of Amyloid from Native Proteins In vitro

Verbeterde Northern Blot detectie van kleine RNA Species in<em> Drosophila melanogaster</em

Isolatie en cultuur van menselijke volwassen adipocyten met behulp van membraan volwassen adipocyte aggregaat culturen (MAAC)

Eenvoudige detectie van primaire trilharen door immunofluorescentie

Read Article