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Fusão SNARE mediada por uma única proteolipossomos com Bicamadas suportados Tethered em uma célula Microfluidic fluxo monitorado por polarizada TIRF microscopia
JoVE Journal
Neuroscience
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JoVE Journal Neuroscience
SNARE-mediated Fusion of Single Proteoliposomes with Tethered Supported Bilayers in a Microfluidic Flow Cell Monitored by Polarized TIRF Microscopy
DOI:

10:58 min

August 24, 2016

,

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:01Preparation of a PDMS Block to Form the Microfluidic Channel
  • 03:17Formation of the Tethered Supported Bilayer
  • 06:18Checking Bilayer Fluidity
  • 07:06Introducing v-SUVs into the Microfluidic Channels
  • 07:59Observing the Fusion of Single v-SUVs and the SBL
  • 08:42Results: Docking and Fusion Events Described by Lipid and Content Release
  • 10:26Conclusion

Summary

Automatic Translation

Aqui, apresentamos um protocolo para detectar eventos individuais, mediada por SNARE fusão entre lipossomas e bicamadas suportados em canais microfluídicos usando TIRFM polarizada, com sensibilidade única molécula e ~ 15 resolução de tempo ms. Lipídico e liberação de cargas solúveis podem ser detectados simultaneamente. o tamanho do lipossoma, de difusividade lípido, e propriedades de fusão dos poros são medidos.

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