Journal
/
/
Biotine gebaseerde Pulldown Assay te valideren mRNA doelstellingen van cellulaire miRNAs
JoVE Journal
Genetics
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Genetics
Biotin-based Pulldown Assay to Validate mRNA Targets of Cellular miRNAs
DOI:

11:00 min

June 12, 2018

, , ,

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:34Preparation of Streptavidin Coated Magnetic Beads — I
  • 03:52Preparation of Cell Lysate
  • 05:36Preparation of Streptavidin Magnetic Beads — II
  • 06:34Pull-down of Target mRNA-miRNA Complexes
  • 07:35Total RNA Extracted, cDNA Synthesis, and qPCR
  • 08:57Results: Use of MicroRNAs to Capture the Target mRNA
  • 09:55Conclusion

Summary

Automatic Translation

Dit verslag wordt een snelle en betrouwbare methode voor het valideren van mRNA doelstellingen van cellulaire miRNAs beschreven. Het gebruik van de methode synthetische biotinyleerd vergrendeld nucleïnezuur LNA gebaseerde miRNA bootst te vangen target mRNA. Vervolgens daar beklede magnetische kralen pulldown worden gebruikt de doelstelling mRNA voor kwantificering van qPCR polymerase-kettingreactie.

Related Videos

Read Article