Cette vidéo décrit un test de conditionnement classique qui teste l’apprentissage et la mémoire à Drosophila, appelé conditionnement de la cour. L’analyse est basée sur la réduction de la cour masculine après avoir subi un rejet par une femelle prématée non réceptive. Le protocole d’exemple montre une configuration de la procédure qui peut être utilisée pour évaluer la mémoire à court et à long terme.
Protocol
Ce protocole est un extrait de Koemans et coll., Drosophila Courtship Conditioning As a Measure of Learning and Memory, J. Vis. Exp. (2017). REMARQUE: Dans le protocole décrit ci-dessous, une réplique de la collecte, de la formation et des tests est décrite. Afin de tester la reproductibilité des résultats, ces étapes doivent être répétées en parallèle, sur plusieurs jours, et avec des groupes distincts de mouches (tab…
Representative Results
Figure 1 : Détermination de l’indice de cour et vue d’ensemble expérimentale. (A) Images montrant un comportement de cour masculine stéréotypée envers une mouche femelle. Différentes étapes du comportement de la cour sont indiquées : orientation (I), suivi (II), vibration de l’aile (extension) et taraudage (III), léchage (IV) et tentative de copulation (V). (<s…
Materials
P{KK101437}VIE-260B
VDRC
101437
Dhat-at-RNAi in 60100 background
P{KK108109}VIE-260B
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Control-RNAi in 60100 background (gift from K. Keleman)
w+, UAS-dcr2/yhh;;elav-Gal4 (III)
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panneuronal driver line
Containers for plant tissue culture
VWR
960177
175 mL plastic vials
Folded filters
Whatman
10311643
Filter paper to enlarge area flies can pupate on
Flat-bottom blocks (96-wells)
Qiagen
19579
Used for housing blocks
MicroAmp Clear Adhesive Film
Applied Biosystems
4306311
PCR adhesive film as lid on flat-bottom blocks
Razor blade
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Any sharp will do
Needle
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0.8 mm diameter
Aspirator
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Cut a 1mL pipet tip with scissors in order to have two pieces. The narrow tip of the pipettip is placed as fly entrance in a ~80 cm flexible hose. To prevent a fly from getting in the hose, a normal piece of cotton or small mesh gaze is placed in between the tip and the hose. The other half of the pipettip can be used as mouth piece at the end of the hose.
Courtship chambers
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file S1 can be opened with indicated CAD software
Camcorder
Sony
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camera specification: >4M pixels, full HD.
For manual quantification, any simple video recording device has the potential to produce a video of sufficient quality to observe courtship behavior accurately. For automated quantification, there will likely be different requirements depending on the software to be used, and users should investigate this thoroughly if automated quantification is desired.